|
1 rinkinys (10 buteliukų)
| Kiekis: | |
|---|---|
▎ Glutationo tyrimai
Molekulinis fonas
Glutationas (GSH), taip pat žinomas kaip L-γ-glutamil-L-cisteinilglicinas, yra tripeptidas, sudarytas iš glutamato, cisteino ir glicino. Skirtingai nuo įprasto α-peptido jungties, glutamato liekana yra prijungta prie cisteino per jo γ-karboksilo grupę. Molekulėje yra cisteino tiolio (-SH), kuris yra pagrindinė redokso aktyvioji grupė jos struktūroje. PubChem nurodo redukuotą glutationą pagal CID 124886, kurio molekulinė formulė C10H17N3O6S ir 307,33 g/mol molekulinė masė.[6]
Tyrimų pažanga
Zeng Jiayu ir kolegos sukūrė į mitochondrijas nukreiptą fluorescencinį zondą (MTTP), galintį atskirti cisteiną ir glutationą (GSH) per du skirtingus emisijos signalus. Zondas buvo naudojamas stebėti mitochondrijų cisteino ir GSH pokyčius ferroptozės ir jos slopinimo metu. Deguonies ir gliukozės trūkumo / reoksigenacijos (OGD/R) modelyje, naudojant H9C2 ląsteles, autoriai taikė MTTP, kad vizualizuotų šių tiolių pokyčius eksperimentinėmis sąlygomis, susijusiomis su miokardo išemija / reperfuzijos pažeidimu.[1]
1 pav. Grafinis ferroptozės stebėjimo mechanizmas esant OGD/R sukeltam MI/R pažeidimui naudojant MTTP [1].
Jiao Liu ir kt. ištyrė GSH vaidmenį kuproptozėje, naudodamas kasos latakų adenokarcinomos (PDAC) ląstelių linijas ir pelių navikų modelius. Autoriai pranešė, kad GSH chelatino varį per savo tiolio grupę ir sumažino mitochondrijų su variu susijusį proteotoksinį stresą eksperimentinėmis sąlygomis. Jų mechaniniai eksperimentai parodė, kad ES-Cu padidino NFE2L2 baltymų stabilumą ir sureguliavo su GSH sinteze susijusius genus, o SLC25A39 dalyvavo transportuojant GSH į mitochondrijas. Genetinis NFE2L2-GSH-SLC25A39 kelio slopinimas padidino su kuproptoze susijusius atsakus tirtuose ląstelių ir pelių modeliuose.[2]
2 pav. Padidėjęs NFE2L2 baltymų stabilumas ir aktyvumas kuproptozės metu [2].
(A, B) Western blot ir qPCR analizė, skirta NFE2L2 ekspresijai PDAC ląstelėse ištisų ląstelių ekstraktuose po apdorojimo ES-Cu (100 nM, 1:1) 6–24 valandas (n = 3 biologiškai nepriklausomi mėginiai, * P < 0,05, palyginti su kontrole, ANOVA testas). (C) CHX persekiojimo tyrimas, skirtas NFE2L2 baltymo skilimo kinetikai PANC1 ląstelėse po apdorojimo CHX (50 µg/ml), kai nėra 100 nM ES-Cu arba 2 µM MG132 15–60 min. (n = 3 biologiškai nepriklausomi mėginiai, * 5, palyginti su 0VA grupė). ACTB buvo naudojamas kaip pakrovimo kontrolė. (D) PDAC ląstelių NFE2L2 transkripcijos aktyvumo tyrimas po apdorojimo ES-Cu (100 nM) 6–24 valandas (n = 3 biologiškai nepriklausomi mėginiai, * P < 0,05, palyginti su kontrole, ANOVA testas). (E) NFE2L2 lokalizacijos PANC1 ląstelėse vaizdo analizė po gydymo ES-Cu 24 valandas. Strypas = 15 μm.
Gurung ir kt. ištyrė glutationo metabolizmą sergant argininosukcino acidurija (ASA), naudodamas tikslinę metabolomiką asmenims, turintiems ASL trūkumą, ir pelių modeliuose. Autoriai pranešė apie glutationo išeikvojimą kartu su pakitusiu cisteino panaudojimu ir antioksidantų takų pokyčiais. Ikiklinikinių tyrimų su pelėmis metu į lipidų ir nanodalelių inkapsuliuota žmogaus ASL mRNR pagerino ASL aktyvumą, ureagenezę ir išmatavo glutationo metabolizmo galutinius taškus. Šiame tyrime įvertinta intervencija buvo ASL mRNR terapija, o ne egzogeninio glutationo skyrimas.[3]
Wang ir kt. mikrobangų sintezės būdu paruošė paladžio nanokristalus ir sukūrė nanofermentų pagrindu pagamintą kolorimetrinį metodą GSH nustatymui. Atliekant tyrimą buvo naudojama sąveika tarp GSH tiolio grupės ir paladžio nanokristalų, kad pakeistų katalizinę spalvos reakciją. Autoriai pranešė apie 3–40 μM ir 55–110 μM linijinius aptikimo diapazonus, o aptikimo riba – 0,14 μM. Metodas taip pat buvo įvertintas serumo mėginiuose, o atkūrimo vertės buvo nurodytos pirminiame tyrime.[4]
Chen ir kt. sukūrė rodamino-Gd(III) fluorescencinį / magnetinio rezonanso dvigubo modalinį zondą (RG), skirtą GSH aptikimui. Esant GSH, zondas generuoja suderintus fluorescencijos ir magnetinio rezonanso signalo pokyčius. Autoriai pranešė apie maždaug 5 ms atsako trukmę ir 2,47 μM aptikimo ribą, o vėliau zondą pritaikė dvigubam GSH vaizdavimui pelės modelyje.[5]
3 pav. GSH aptikimo zondo RG projektavimo strategija.
Tyrimo apribojimai
Pirmiau apibendrintuose tyrimuose nagrinėjami įvairūs tyrimų klausimai, įskaitant fluorescencinį jutimą, ląstelių mirties mechanizmus, paveldimą medžiagų apykaitos ligą, kolorimetrinį kiekybinį nustatymą ir vaizdo zondo kūrimą. Daugumoje šių tyrimų buvo matuojamas endogeninis GSH arba GSH buvo naudojamas kaip analitinis taikinys, o ne iš išorės tiekiama glutationo medžiaga. Todėl rezultatai, gauti naudojant H9C2 ląsteles, PDAC modelius, ASL trūkumą turinčius asmenis ar peles, analitinius serumo mėginius ir vaizdo modelius, nėra tiesiogiai sukeičiami [1–5].
Sumažintas glutationas yra cheminė medžiaga, PubChem identifikuota kaip CID 124886.[6] Eksperimentinės išvados nurodytoje literatūroje nepatvirtina atskirai pateiktos tyrimo medžiagos tapatumo, grynumo, saugumo ar klinikinio veikimo. Aiškinimas turėtų likti susietas su tiksliu modeliu, analizės metodu ir medžiaga, aprašyta kiekviename šaltinyje.
COCER Peptides pristato glutationą tik laboratoriniams tyrimams ir analitiniam naudojimui. Jis nėra skirtas žmonėms ar veterinarams. Aukščiau aprašytas tyrimas apibendrina trečiųjų šalių leidiniuose pateiktus duomenis ir nėra klinikinio veiksmingumo, saugumo, diagnozės, gydymo, profilaktikos teiginys ar naudojimo instrukcija.
