Sa pamamagitan ng Cocer Peptides        25 araw ang nakalipas.

Abstract

Ang peptide purification ay isang pang-eksperimentong paghihiwalay na ang tagumpay ay dapat ipakita sa materyal na nakuhang muli. Ang isang mahusay na nalutas na analytical chromatogram ay maaaring gumabay sa pagbuo, ngunit ang paghahanda sa pag-load, timing ng koleksyon at kasunod na paghawak ay tumutukoy kung aling mga bahagi ang makakarating sa huling pool. Inilalarawan ng artikulong ito ang isang diskarte sa laboratoryo sa reversed-phase chromatographic purification, simula sa kahulugan ng target at nagtatapos sa independiyenteng pagsusuri ng nakuhang materyal. Sinusuri nito ang selectivity, pag-load ng mga pag-aaral, gradient transfer, pagkolekta ng fraction at mga desisyon sa pooling. Ang partikular na atensyon ay ibinibigay sa pagkakaiba sa pagitan ng porsyento ng chromatographic area, target na pagbawi ng peptide at nilalaman ng peptide. Ang mga pamamaraang tinalakay ay nagbibigay ng balangkas para sa pagbuo ng pamamaraan; mga kondisyon sa pagpapatakbo at pamantayan sa pagtanggap ay dapat na maitatag para sa partikular na sample at kagamitan.

Tukuyin ang layunin ng paglilinis

Magsimula sa pamamagitan ng pagtukoy sa pagkakasunud-sunod ng peptide, mga pagbabago sa terminal at iba pang mga tampok na istruktura na kinakailangan upang matukoy ang nilalayong bahagi. Ilarawan ang panimulang materyal, ang batch nito at ang halagang magagamit para sa pagpapaunlad. Ang layunin ay dapat magsaad kung aling mga dumi ang dapat paghiwalayin at kung anong ebidensya ang kakailanganin para tanggapin ang nakuhang materyal para sa nilalayong eksperimento sa laboratoryo nito. Tinutukoy ng mga kinakailangang ito ang mga kinakailangang pamamaraan ng analitikal bago magsimula ang gawaing paghahanda.

Tukuyin ang dami ng krudong materyal na naproseso mula sa dami ng target na peptide na nakuhang muli. Ang isang masaganang pangunahing peak ay maaaring magkakasamang mabuhay na may malapit na pag-aalis ng karumihan na kumokontrol sa kapaki-pakinabang na agwat ng koleksyon. Sinuri ni Streuli at mga kasamahan ang isang tinukoy na library ng mga variant ng peptide at ipinakita na ang paghihiwalay at paglipat ng pamamaraan ay nakasalalay sa parehong mga parameter ng chromatographic at instrumentation. Sinusuportahan ng kanilang pag-aaral ang tahasang pagsusuri sa mahirap na mga pares ng karumihan, sa halip na ituring ang pangkalahatang hitsura ng chromatogram bilang sapat na ebidensya. [1]

Magtakda ng pansamantalang pamantayan para sa profile ng karumihan at pagbawi, kasama ang mga praktikal na limitasyon sa pagkonsumo ng solvent, oras ng pagtakbo at pagkakalantad ng sample. Baguhin lamang ang mga pamantayang ito nang may naitalang pang-agham na katwiran. Ginagawa nitong maa-assess ang panghuling pagpili ng pamamaraan laban sa orihinal na pang-eksperimentong pangangailangan.

Pumili ng mga kundisyon na lumulutas sa mga kritikal na dumi

I-screen ang isang maliit na hanay ng mga kundisyon na naiiba sa kemikal gamit ang analytical na dami ng crude sample. Kasama sa mga nauugnay na variable ang stationary-phase chemistry, mobile-phase modifier at pH sa loob ng pinapayagang operating range ng column. Ihambing ang target sa pinakamalapit na nauugnay na dumi nito sa ilalim ng bawat kundisyon. Ang pagbabago sa bawat oras ng pagpapanatili ay hindi mismo nagpapakita ng pagpapabuti sa pagpili.

Ang mobile-phase additive ay nakikilahok sa paghihiwalay. Ipinakita ni Shibue at mga kasamahan, gamit ang mga peptide ng modelo, na binago ng hydrophobicity at konsentrasyon ng mga anionic ion-pairing reagents ang pagpapanatili at paghihiwalay ng peptide. Ang isang additive na pagbabago ay maaaring baguhin ang mga relatibong posisyon ng target at impurity peak. Muling suriin ang kanilang mga takdang-aralin pagkatapos ng naturang pagbabago, at suriin kung ang additive ay tugma sa nakaplanong detector at mga kasunod na hakbang sa paghihiwalay. [2]

Itala ang eksaktong pagkakakilanlan ng reagent at ang batayan ng bawat nakasaad na konsentrasyon. Kinikilala ng PubChem ang trifluoroacetic acid bilang CID 6422 at kinikilala ang acid mula sa conjugate base nito, trifluoroacetate. Mahalaga ang pagkakaibang ito kapag inilalarawan ang isang mobile-phase reagent at ang counterion na nauugnay sa isang nakahiwalay na peptide. Sinusuportahan ng mga identifier ng database ang dokumentasyong kemikal; Ang mga talaan ng reagent grade, lot at paghahanda ay nananatiling mga responsibilidad sa laboratoryo. [3]

Magtatag ng sample handling at loading conditions

Suriin ang sample sa iminungkahing paglo-load ng solvent sa nilalayong konsentrasyon. Ang solubility sa paghahanda ng sisidlan ay hindi nagtatag ng pagiging tugma sa unang bahagi ng mobile. Maaaring baguhin ng paghahalo ang lakas ng solvent o pH at magdulot ng precipitation bago maabot ng sample ang nakatigil na yugto. Suriin ang anumang hakbang ng pagbabanto, paglilinaw o pagsasala sa pamamagitan ng paghahambing ng dami at profile ng peptide bago at pagkatapos ng operasyong iyon. Panatilihin ang isang aliquot ng orihinal na paghahanda para sa paghahambing.

Pumili ng mga sisidlan ng pagkolekta at maglipat ng mga materyales sa pamamagitan ng mga eksperimento sa pagbawi na may kaugnayan sa sample na konsentrasyon at komposisyon ng solvent. Nalaman ni Goebel-Stengel at ng mga kasamahan na ang pagbawi ng peptide ay iba-iba sa peptide at sa nakontak na ibabaw. Ang praktikal na implikasyon ay upang i-verify ang napiling materyal sa ilalim ng mga kondisyon sa pagtatrabaho; alinman sa salamin o isang partikular na plastik ay hindi angkop sa pangkalahatan. [4]

Paghiwalayin ang mass loading mula sa volume loading sa panahon ng development. Dagdagan ang konsentrasyon sa isang nakapirming dami ng iniksyon ng instrumento upang suriin ang epekto ng masa, pagkatapos ay ihambing ang angkop na mga volume sa isang nakapirming masa kung saan posible. Subaybayan ang overlap ng karumihan, i-target ang pamamahagi sa mga fraction at na-recover na halaga. Itala ang anumang pagbabago sa komposisyon ng solvent dahil maaari nitong malito ang paghahambing. Suriin din ang inaasahang panahon ng paghahanda at paghawak ng koleksyon: Naobserbahan ni Erckes at mga kasamahan ang mga pagbabago sa kemikal na umaasa sa kondisyon sa mga peptide ng modelo sa panahon ng paghawak ng analytical at purification-related. [5]

Pinuhin ang gradient sa nilalayong pagkarga

Gumamit ng paunang scouting run upang mahanap ang target at ang mga lugar ng karumihan sa magkabilang panig. Bumuo ng isang mas mababaw na gradient sa buong rehiyon na naglilimita sa paghihiwalay, habang pinapanatili ang sapat na mga hakbang sa paglo-load, paghuhugas, at muling pagbalanse. Kumpirmahin ang resulta sa mga unti-unting nauugnay na pag-load. Ang isang gradient na nagre-resolve ng dilute analytical sample ay maaaring mag-iwan ng hindi sapat na paghihiwalay para sa kapaki-pakinabang na koleksyon kapag mas maraming materyal ang ipinakilala.

Sinuri ni Chen at ng mga kasamahan ang isang slow-gradient preparative separation sa iba't ibang diameter ng column at sample load. Ang distribusyon ng katanggap-tanggap na produkto sa mga fraction ay nakadepende sa mga kundisyon ng paghihiwalay, na naglalarawan kung bakit dapat masuri ang pagganap ng paghahanda sa pamamagitan ng pagsusuri ng fraction. Ang kanilang mga resulta ay ebidensya para sa pinag-aralan na sistema, hindi isang unibersal na kapasidad sa paglo-load o garantisadong pagbawi para sa iba pang mga peptide. [6]

Ipahayag ang mga pagbabago sa gradient na nauugnay sa volume ng column kapag naghahambing ng mga scale, at sabihin kung paano tinukoy ang volume na iyon. Inilalarawan ng Waters ang paggamit ng isang nakatutok na gradient at sinusukat na dami ng system sa peptide isolation. Ang diskarte na ito ay nakakatulong na ilagay ang mababaw na segment kung saan ang target ay aktwal na elute. Ang labis na pagpapahaba ng gradient ay maaaring magpapataas ng paggamit ng solvent at ang oras na nananatili sa solusyon ang nakolektang materyal; panatilihin lamang ang extension kapag pinahusay nito ang nauugnay na paghihiwalay. [7]

Ilipat ang paraan na may tahasang pagpapalagay ng scaling

Ang paglipat ay nagsisimula sa isang paghahambing ng chemistry ng column, haba, panloob na diameter, laki ng butil at mga katangian ng pag-iimpake. Ang pagtaas ng diameter habang pinapanatili ang maihahambing na pag-iimpake ay nagbibigay-daan sa isang paunang pagtatantya batay sa pantay na mababaw na linear na bilis. Para sa volumetric flow rate F at column internal diameter d, ang geometric na relasyon ay:

F₂ = F₁ × (d₂ / d₁)²

Tinutukoy ng mga subscript ang orihinal at tumatanggap na mga column. Ang ugnayang ito ay nagpapanatili ng daloy ng bawat unit na cross-sectional area; hindi ito nagtatag ng katumbas na kahusayan o pinahihintulutang presyon. Kung ang laki ng butil, lagkit o haba ng haligi ay nagbabago, suriin ang resultang presyon at paghihiwalay sa eksperimentong paraan. Ang Menke at mga kasamahan ay naglalarawan ng analytical-to-preparative workflow na sinusuri ang laki at paglo-load ng particle bago tumaas ang diameter ng column. [8]

Ang tagal ng gradient ay dapat isaalang-alang sa pamamagitan ng dami ng solvent na inihatid kaugnay sa isang tuluy-tuloy na tinukoy na dami ng column V _c . Sa patuloy na daloy, ang walang sukat na ratio F × t _G / V _c ay nagbibigay ng bilang ng mga volume ng column na inihatid sa panahon ng gradient ng tagal t _G . Ang pagpapanatili ng ratio na ito at ang mga solvent na endpoint na maihahambing ay nagbibigay ng panimulang punto para sa paglipat. Ito ay nananatiling kinakailangan upang suriin ang gradient na umabot sa haligi. [7]

Sukatin o kung hindi man ay itatag ang gradient dwell volume para sa bawat naka-configure na instrumento. Ang pagkaantala nito ay nauuna sa column at naiiba sa pagkaantala sa pagitan ng pagtuklas at pagkolekta ng fraction. Maaaring baguhin ng mga pagkakaiba sa gradient formation at dispersion ang inilipat na paghihiwalay kahit na ang naka-program na talahanayan ay lilitaw na katumbas. Kumpirmahin ang retention at impurity separation sa receiving system na may limitadong sample bago ibigay ang natitirang materyal. [1]

Mangolekta ng mga fraction na may na-verify na timing

Ang paraan ng pagkolekta ay dapat ikonekta ang bawat sisidlan sa isang tinukoy na bahagi ng eluting band. I-verify ang pagkaantala mula sa punto ng pagtuklas hanggang sa koleksyon gamit ang aktwal na landas ng daloy at nauugnay na rate ng daloy. Suriin muli pagkatapos ng mga pagbabago sa tubing, valves o flow splitter. Tinutukoy ng Waters ang pagkakalibrate na ito kung kinakailangan upang ihanay ang signal ng detector sa materyal na dumarating sa kolektor. Maaaring itapon ng maling pagkaantala ang bahagi ng target o mangolekta ng materyal mula sa isang katabing peak. [9]

Pumili ng mga laki ng fraction na nagpapahintulot sa nangungunang gilid, gitnang rehiyon at trailing na gilid ng target na banda na masuri nang hiwalay. Ang napakalaking fraction ay maaaring pagsamahin kung hindi man ay mapaghihiwalay na mga rehiyon, samantalang ang napakaliit na fraction ay nagpapataas ng analytical na gawain at paghawak. Itakda ang mga threshold ng koleksyon na may reference sa naobserbahang pag-uugali ng baseline at pagtugon ng detector sa paghahandang konsentrasyon. Ang isang detektor na tumatakbo nang lampas sa kapaki-pakinabang na hanay ng pagtugon nito ay hindi makakasuporta sa mga mapagkakatiwalaang desisyon tungkol sa peak na hugis.

Maaaring iugnay ng mass-directed collection ang isang collection event sa mga piling peptide ions. Ipinakita nina Moritz at O'Reilly ang diskarteng ito para sa mga krudo na sintetikong peptide, kabilang ang atensyon sa pagtugon ng detector at pagkaantala sa koleksyon. Gayunpaman, ang isang mass trigger ay hindi nagbubukod ng isang coeluting impurity o nagtatatag ng ganap na pagkakakilanlan sa istruktura. Kumpirmahin ang naaangkop na mga pagtatalaga ng estado ng pagsingil at suriin ang mga nakolektang fraction nang independyente bago tumanggap ng pool. [10]

Base pooling decisions sa fraction analysis

Magtalaga ng natatanging identifier sa bawat fraction at panatilihin ang agwat ng koleksyon nito, sinusukat na dami at kasaysayan ng pangangasiwa. Suriin ang mga kinatawan ng aliquot gamit ang isang paraan na may kakayahang makita ang mga kritikal na impurities. Ang paghahalo at pagsa-sample ay dapat isaalang-alang ang buong bahagi; Ang pagsusuri ng isang malinaw na supernatant lamang ang maaaring makaligtaan ng materyal na namuo. Panatilihing hiwalay ang mga fraction sa gilid hanggang sa maunawaan ang kanilang kontribusyon sa iminungkahing pool. [9]

Tukuyin ang pooling rule bago pagsamahin ang materyal. Tayahin kung ang pagdaragdag ng isang fraction ay nagpapabuti sa target na pagbawi habang pinapanatili ang kinakailangang profile ng karumihan. Huwag mag-average ng mga porsyento ng bahagi ng fraction sa aritmetika: maaaring magkaiba ang mga fraction sa parehong konsentrasyon at volume. Ang isang pagkalkula ay nangangailangan ng isang karaniwang batayan ng pagsukat, at ang nagreresultang pinagsamang pool ay nangangailangan pa rin ng direktang pagsusuri. Kung iminungkahi ang pangalawang paglilinis, ihambing ang inaasahang benepisyo sa paghihiwalay sa karagdagang paghawak at pagkawala ng pagbawi.

8 Iulat ang kadalisayan at pagbawi sa magkahiwalay na base

Ang porsyento ng chromatographic area ay naglalarawan sa proporsyon ng kasamang tugon ng detector na itinalaga sa target sa ilalim ng isang tinukoy na paraan ng pagsusuri. Ito ay hindi awtomatikong ang mass fraction ng peptide sa nakahiwalay na solid. Gumamit si Wang at mga kasamahan ng mass-balance approach na isinasaalang-alang ang mga impurities na nauugnay sa peptide kasama ng tubig, counterion at mga inorganic na constituent. Inilalarawan ng kanilang trabaho ang mga karagdagang sukat na kailangan upang ilarawan ang komposisyon ng materyal na lampas sa isang chromatographic profile. [11]

Para sa isang pagkalkula ng pagbawi, tukuyin ang mga hangganan ng proseso at tumyak ng dami ng parehong target na species sa parehong mga hangganan. Kung ang m _loaded ay ang sinusukat na masa ng target na ipinasok sa purification at ang m _pool ay ang sinusukat na masa ng target sa tinatanggap na pool, kung gayon:

Target na pagbawi (%) = 100 × m _pool / m _{na na-load}

Gumamit ng mga katugmang pagkakalibrate at mga base ng konsentrasyon, isaalang-alang ang mga aliquot at dilution, at isama ang mga volume ng sinusukat na fraction kung kinakailangan. Kung ang denominator ay ang target lamang na makikita sa mga nakolektang fraction, lagyan ng label ang resulta bilang pagbawi kaugnay ng nakolektang target. Hindi nito maibubunyag ang mga pagkalugi bago ang koleksyon. Katulad nito, ang pagbawi na sinusukat bago ang pagpapatuyo ay hindi nagtatatag ng pagbawi ng panghuling solid. Panatilihin ang mga tinanggihang fraction at maghugas ng sapat na katagalan upang siyasatin ang hindi maipaliwanag na kakulangan.

Suriin ang pag-alis ng solvent at komposisyon ng counterion

Ang konsentrasyon, pagpapalit ng solvent at pagpapatuyo ay mga karagdagang hakbang sa proseso. Ihambing ang tinatanggap na pool sa na-recover na materyal upang matukoy kung binago ng mga operasyong ito ang impurity profile o nare-recover na halaga ng peptide. Panatilihin ang lumipas na oras at kundisyon para sa bawat hakbang. Kung saan posible ang pagbabago ng kemikal, suriin ang naaangkop na kontrol na hawak sa parehong solusyon nang walang operasyon ng paghihiwalay. Nakakatulong ito na makilala ang isang epekto ng paghawak mula sa isang nauugnay sa paghihiwalay mismo. [5]

Ang isang pabagu-bago ng isip na libreng acid ay hindi nagpapahiwatig ng kumpletong pag-alis ng counterion nito mula sa isang paghahanda ng peptide. Inihambing ni Roux at ng mga kasamahan ang mga pamamaraan para sa pagpapalitan ng trifluoroacetate at sinukat ang resultang komposisyon gamit ang mga pantulong na pamamaraan ng analytical. Ang palitan samakatuwid ay dapat ituring bilang isang sinusukat na pagbabago ng materyal, na may hiwalay na pagsusuri ng integridad ng peptide. Nagpakita sina Kaiser at Rohrer ng ion chromatography para sa natitirang trifluoroacetate sa mga nauugnay na sample matrice. Ang malinis na peptide chromatogram o ang matagumpay na pagpapatuyo lamang ay hindi nagtatatag ng pagkakakilanlan o dami ng counterion. [12,13]

Ang talahanayan 1 ay nagbubuod ng mga paghahambing na maaaring maging gabay sa pag-unlad. Tinutukoy ng bawat hilera ang ebidensyang kokolektahin bago baguhin ang paraan; ang mga obserbasyon lamang ay hindi nagtatatag ng kanilang dahilan.

Talahanayan 1 Mga pang-eksperimentong desisyon sa panahon ng paglilinis ng peptide

Magtatag ng reproducibility at panatilihin ang ebidensya

Ulitin ang napiling daloy ng trabaho na may mga bahaging independyenteng inihanda na sapat upang masuri ang pagkakaiba-iba na nauugnay sa layunin. Ihambing ang tinatanggap na profile ng pool, target na pagbawi at ang lokasyon ng mga kritikal na dumi. Ang mga pagbabago sa komposisyon ng krudo na batch ay maaaring mangailangan ng karagdagang pag-unlad kahit na ang nominal na pagkakakilanlan ng peptide ay hindi nagbabago. Magtatag ng mga praktikal na limitasyon para sa mga variable ng pamamaraan na ipinapakita upang maimpluwensyahan ang mga kinalabasan na ito.

Panatilihin ang crude sample characterization, mga pamamaraan ng instrumento, mga talaan ng column at reagent, pag-load ng mga pag-aaral, koleksyon ng mapa at analytical data para sa mga indibidwal na fraction at huling materyal. Idokumento ang mga pagbubukod sa pagsasama-sama at isaalang-alang ang na-reprocess na materyal. Ang huling ulat ay dapat magsaad ng kemikal na anyo na aktwal na nasusukat, ang batayan ng bawat kadalisayan at resulta ng pagbawi, at hindi nalutas na mga limitasyon sa pagsusuri. Ang mga talaang ito ay nagtatatag kung ano ang nakamit ng paglilinis at ang mga kondisyon kung saan ang konklusyong iyon ay maaaring kopyahin.

Saklaw ng pananaliksik. Ang artikulong ito ay may kinalaman sa paglilinis ng laboratoryo at pagsusuri ng analytical ng mga peptide na materyales. Hindi ito nagbibigay ng mga tagubilin para sa paggamit ng tao o beterinaryo at hindi gumagawa ng claim tungkol sa biological efficacy, pagiging angkop sa klinikal o pag-apruba sa regulasyon. Dapat itatag ng laboratoryo ang pagiging angkop ng bawat pamamaraan para sa sample at kagamitan nito.

Mga sanggunian

[1] Streuli A, Erckes V, Nardone B, et al. Pagpapabuti ng pagsusuri at paglipat sa peptide purification: Mula sa HPLC hanggang FPLC at bumalik muli. Journal ng Peptide Science. 2026;32(3):e70090. doi: 10.1002/psc.70090

[2] Shibue M, Mant CT, Hodges RS. Epekto ng anionic ion-pairing reagent hydrophobicity sa selectivity ng peptide separation sa pamamagitan ng reversed-phase liquid chromatography. Journal of Chromatography A. 2005;1080(1):68–75. doi: 10.1016/j.chroma.2005.03.035

[3] National Center for Biotechnology Information. PubChem Compound Summary para sa CID 6422, Trifluoroacetic Acid. Na-access noong Nobyembre 2, 2026. Pinagmulan ng dokumento

[4] Goebel-Stengel M, Stengel A, Taché Y, Reeve JR Jr. Ang kahalagahan ng paggamit ng pinakamainam na plasticware at babasagin sa mga pag-aaral na kinasasangkutan ng mga peptide. Analytical Biochemistry. 2011;414(1):38–46. doi: 10.1016/j.ab.2011.02.009

[5] Erckes V, Chamera Rendueles L, Misiek A, Steuer C. Nagpapakita ng deamidation at pagbuo ng isoaspartate sa panahon ng pagsusuri, paglilinis at pag-iimbak ng peptide sa pamamagitan ng tandem mass spectrometry. RSC Medicinal Chemistry. 2026;17(2):1144–1154. doi: 10.1039/D5MD01025J

[6] Chen Y, Mant CT, Hodges RS. Preparative reversed-phase high-performance liquid chromatography collection efficiency para sa isang antimicrobial peptide sa mga column na may iba't ibang diameter (1 mm hanggang 9.4 mm ID). Journal of Chromatography A. 2007;1140(1–2):112–120. doi: 10.1016/j.chroma.2006.11.052

[7] Waters Corporation. Mga Pagsasaalang-alang sa Pagbuo ng Paraan. Mga Praktikal na Pamamaraan sa Pagbubukod ng Peptide. Na-access noong Nobyembre 2, 2026. Pinagmulan ng dokumento

[8] Menke J, Krop U, Greco G. Systematic at mahusay na paraan ng scale-up para sa peptide purification. KNAUER application note VBS0084. Bersyon 1; Hulyo 2024. Pinagmulan ng dokumento

[9] Waters Corporation. Paghihiwalay ng Purified Product. Preparative Liquid Chromatography Primer. Na-access noong Nobyembre 2, 2026. Pinagmulan ng dokumento

[10] Moritz R, O'Reilly N. Mass-based na fraction na koleksyon ng krudo synthetic peptides sa analytical at preparative scale. Journal ng Biomolecular Techniques. 2003;14(2):136–142. PMID 14676312. Pinagmulan ng dokumento

[11] Wang X, Zhang F, Li H, et al. Pagpapasiya ng kadalisayan ng sintetikong glucagon gamit ang diskarte sa balanse ng masa. Mga Ulat sa Siyentipiko. 2020;10:4423. doi: 10.1038/s41598-020-61109-9

[12] Roux S, Zékri E, Rousseau B, et al. Pag-aalis at pagpapalitan ng trifluoroacetate counter-ion mula sa cationic peptides: Isang kritikal na pagsusuri ng iba't ibang mga diskarte. Journal ng Peptide Science. 2008;14(3):354–359. doi: 10.1002/psc.951

[13] Kaiser E, Rohrer J. Pagpapasiya ng natitirang trifluoroacetate sa mga buffer ng paglilinis ng protina at paghahanda ng peptide sa pamamagitan ng ion chromatography. Journal of Chromatography A. 2004;1039(1–2):113–117. doi: 10.1016/j.chroma.2004.03.044

LAHAT NG ARTIKULO AT IMPORMASYON NG PRODUKTO NA IBINIGAY SA WEBSITE NA ITO AY PARA LAMANG SA PAGPAPALALAG NG IMPORMASYON AT MGA LAYUNIN NG EDUKASYON.

Ang mga produktong ibinigay sa website na ito ay inilaan lamang para sa in vitro na pananaliksik. Ang in vitro research (Latin: *in glass*, meaning in glassware) ay isinasagawa sa labas ng katawan ng tao. Ang mga produktong ito ay hindi mga pharmaceutical, hindi inaprubahan ng US Food and Drug Administration (FDA), at hindi dapat gamitin para maiwasan, gamutin, o pagalingin ang anumang kondisyong medikal, sakit, o karamdaman. Mahigpit na ipinagbabawal ng batas na ipasok ang mga produktong ito sa katawan ng tao o hayop sa anumang anyo.