Sa pamamagitan ng Cocer Peptides          26 araw ang nakalipas.

Abstract

Ang isang quantitative peptide na resulta ay nangangailangan ng isang tinukoy na chemical species, isang naaangkop na pagkakalibrate na batayan at ebidensya na ang sample handling ay nagpapanatili sa dami ng sinusukat. Ang masa ng pulbos, porsyento ng chromatographic area at target na konsentrasyon ng peptide ay naglalarawan ng iba't ibang katangian. Ang pagtrato sa kanila bilang mapagpapalit ay maaaring magpakilala ng isang error bago gawin ang unang pagsukat. Sinusuri ng artikulong ito ang pagsusuri ng amino acid, pagsipsip ng ultraviolet, naka-calibrate na liquid chromatography, isotope dilution mass spectrometry at quantitative nuclear magnetic resonance bilang mga diskarte sa peptide quantification. Ipinapaliwanag nito ang impormasyong ibinibigay ng bawat pamamaraan, ang mga pagpapalagay na kinakailangan upang i-convert ang signal nito sa isang halaga, at ang mga kontrol na kailangan para sa isang maipaliwanag na resulta. Ang talakayan ay may kinalaman sa mga materyales sa laboratoryo at analytical na solusyon. Nagbibigay ito ng balangkas para sa pagpili at pagtatasa ng isang pamamaraan ng pagsukat, nang hindi nagrereseta ng mga pangkalahatang kondisyon sa pagpapatakbo o mga limitasyon sa pagtanggap.

Tukuyin ang dami na susukatin

Tukuyin ang panukat, ibig sabihin ang dami na nilalayong sukatin, bago pumili ng instrumento. Kasama sa mga halimbawa ang dami ng isang buo na peptide sa isang aliquot, ang mass concentration nito sa isang inihandang solusyon, o ang mass fraction nito sa isang solidong sample bilang natanggap. Tukuyin ang pagkakasunud-sunod, mga pangkat ng terminal at mga nauugnay na pagbabago. Sabihin kung ang iniulat na masa ay may kasamang mga counterion o naglalarawan sa peptide moiety lamang. Ang resulta ay nangangailangan din ng isang tinukoy na sample na hangganan: ang natunaw na bahagi, ang buong paghahanda o materyal na nakuhang muli pagkatapos ng isang tinukoy na operasyon.

Ang isang weighed solid ay maaaring maglaman ng tubig, mga counterion, mga natitirang solvents at iba pang mga bahagi. Hindi sinusukat ng malaking target na peak sa isang ultraviolet chromatogram ang lahat ng mga nasasakupan na ito. Nagpakita si Wang at mga kasamahan ng mass-balance na diskarte na pinagsama ang mga sukat ng ilang klase ng karumihan upang makilala ang isang synthetic na peptide na materyal. Inilalarawan nito kung bakit hindi maaaring awtomatikong palitan ang porsyento ng chromatographic area para sa peptide mass fraction kapag naghahanda ng quantitative standard. [1]

Itatag ang batayan ng pagkakalibrate

Ang isang calibrator ay nangangailangan ng isang nakatalagang dami na naaangkop sa pagsukat, kasama ang kawalan ng katiyakan nito at ang mga kondisyon kung saan nalalapat ang pagtatalagang iyon. Suriin ang sertipiko para sa eksaktong lote, anyo ng kemikal, batayan ng halaga at mga tagubilin sa paghawak. Ang isang label na nagsasaad ng chromatographic purity lamang ay hindi nagbibigay ng target na konsentrasyon. Inilalarawan ng Bunk at Lowenthal ang paggamit ng isotope dilution amino acid analysis sa NIST upang suportahan ang mga pagtatalaga ng konsentrasyon para sa peptide at mga materyal na sangguniang protina. Ang nasabing pagtatalaga ay nangangailangan ng isang dokumentadong pamamaraan ng pagsukat, sa halip na isang maliit na timbang ng pulbos. [2]

Para sa isang solusyon na inihanda nang dami mula sa isang materyal na may itinatag na target na mass fraction, ang mass concentration ay:

ρ = m × w / V

Dito, ang m ay ang masa ng materyal na natimbang, ang w ay ang target na peptide mass fraction nito sa parehong batayan, at ang V ay ang panghuling dami ng solusyon. Kung ang m ay nasa milligrams, w sa milligrams bawat milligram at V sa mililitro, ang ρ ay nasa milligrams bawat mililitro. Ipinapalagay ng kalkulasyon ang kumpletong paglusaw at paglipat. Hindi nito bini-verify ang mga operasyong iyon. Ang pag-convert sa dami ng konsentrasyon ay nangangailangan ng molar mass ng tahasang tinukoy na kemikal na species.

Maghanda ng isang independiyenteng solusyon sa pagsusuri kapag posible. Ang mga pamantayan sa pagkakalibrate at mga tseke na nagmula sa isang maling naitalagang stock ay maaaring magkasundo sa isa't isa habang may parehong error. Panatilihin ang mga rekord ng paghahanda ng stock at pagbabanto upang ang pinagmulan ng bawat nakatalagang konsentrasyon ay maaaring mabuo muli.

Pumili ng isang paraan na may sapat na chemical selectivity

Piliin ang paraan ayon sa sample na komposisyon, inaasahang konsentrasyon at kawalan ng katiyakan na kailangan para sa eksperimento. Ang isang medyo dalisay na materyal na sanggunian at isang halo na naglalaman ng ilang nauugnay na mga peptide ay nagpapakita ng iba't ibang mga problema sa pagsukat. Inihahambing ng Talahanayan 1 ang mga pangunahing opsyon na tinalakay sa ibaba. Ang tanong na naglilimita ay kung ang nasusukat na tugon ay maaaring maiugnay sa tinukoy na target nang may sapat na kumpiyansa.

Talahanayan 1 Mga opsyon sa pagsukat at ang kanilang mga pangunahing limitasyon

Iugnay ang mga sukat ng amino acid sa dami ng peptide

Ang pagsusuri ng amino acid ay unang nagko-convert ng isang peptide sa nasusukat na mga constituent amino acid. Para sa isang nalalabi na nagaganap ν _i beses sa pagkakasunud-sunod, ang isang naobserbahang halaga n _i ay tumutugma sa isang peptide na halaga n _i / ν _i kung kumpleto ang paglabas at walang ibang pinagmulan ang nag-ambag sa amino acid na iyon. Ihambing ang mga pagtatantya mula sa ilang angkop na nalalabi kung saan pinahihintulutan ng pagkakasunud-sunod. Ang hindi pagkakasundo ay maaaring magbunyag ng isang problema na kung hindi man ay itatago ng pag-average.

Dapat ilabas ng hydrolysis ang mga napiling residues nang walang hindi katanggap-tanggap na pagkawala o conversion ng mga nasusukat na amino acid. Binibigyang-diin ng Bunk at Lowenthal na ang mga kundisyong ito ay nangangailangan ng pagpapatunay para sa bawat analyte. Sinuri ni Muñoz at mga kasamahan ang ilang mga amino acid kapag binibilang ang mga calibrant ng protina sa pamamagitan ng isotope dilution, na nagbibigay ng isang pang-eksperimentong halimbawa ng paggamit ng kasunduan sa mga pagtatantya na nakabatay sa nalalabi upang masuri ang hydrolysis. Ang mga kondisyong itinatag para sa isang materyal ay hindi dapat ipagpalagay na sapat para sa ibang peptide. [2,3]

Ang mga libreng amino acid at iba pang peptides ay maaaring mag-ambag sa hydrolysate. Dahil dito, ang pagsusuri ng amino acid lamang ay maaaring magtatag ng kabuuang nilalamang nauugnay sa komposisyon nang hindi pinipiling binibilang ang nilalayon na buo na pagkakasunud-sunod. Isama ang angkop na mga blangko sa hydrolysis at imbestigahan ang mga kontribusyong ito bago magtalaga ng target na halaga. Gamitin ang kemikal na pagkakakilanlan at anyo ng libreng amino acid kapag kinakalkula ang mga halaga ng calibrator. Halimbawa, kinikilala ng PubChem ang glycine bilang CID 750; sinusuportahan ng rekord ng database ang pagsuri ng pagkakakilanlan ngunit hindi pinatutunayan ang nilalaman ng isang materyal na sangguniang amino acid. [4]

Bigyang-kahulugan ang mga pagsukat ng ultraviolet sa pamamagitan ng pagkakasunud-sunod

Para sa isang homogenous na solusyon sa loob ng naaangkop na hanay ng instrumental, ang relasyong Beer–Lambert A = εlc ay nagkokonekta ng blank-corrected absorbance A na may molar absorptivity ε, optical path length l at amount concentration c. Ang pagsipsip ay dapat tumutugma sa peptide, wavelength at mga kondisyon ng pagsukat. Ang pagsipsip na malapit sa 280 nm ay lubos na nakadepende sa mga aromatic residues at hindi maaaring magsilbi bilang pangkalahatang pagsukat ng konsentrasyon para sa bawat peptide. Si Anthi at Clore ay bumuo ng isang sequence-based na diskarte sa 205 nm, na nagpapakita ng halaga ng accounting para sa komposisyon sa halip na mag-apply ng iisang conversion factor. [5]

Sa mas maiikling wavelength, maaaring maging limitado ang solvent at buffer absorption. Gumamit ng blankong tugma sa komposisyon, suriin ang magagamit na optical range, at ihambing ang mga angkop na dilution. Ang labo o isang sumisipsip na karumihan ay maaaring magdulot ng maliwanag na pagbabago sa konsentrasyon na hindi nauugnay sa target. Samakatuwid, ang isang direktang resulta ng pagsipsip ay dapat magdala ng mga pagpapalagay tungkol sa komposisyon ng sample kung saan ito nakasalalay.

Maaaring mapabuti ng chromatographic separation ang selectivity bago ang pagsukat ng UV, ngunit ang isang quantitative LC assay ay nangangailangan pa rin ng naaangkop na relasyon sa pagtugon. Sinusukat ng Kuipers at Gruppen ang magkakaibang kontribusyon ng mga amino acid at peptide bond sa pagsipsip sa 214 nm. Ipinapaliwanag ng kanilang mga natuklasan kung bakit ang mga pantay na lugar ng peak mula sa iba't ibang mga peptide ay hindi kailangang kumatawan ng pantay na halaga. Para sa target na quantification, ihambing ang nalutas na target na tugon sa angkop na mga itinalagang pamantayan at i-verify ang pagkakalibrate sa ilalim ng aktwal na analytical na mga kundisyon. [6]

Tayahin ang panloob na pamantayan sa isotope dilution LC–MS

Sa isotope dilution LC-MS, ang tugon ng target ay inihambing sa isang idinagdag na isotopically labeled na katapat sa pamamagitan ng isang tinukoy na modelo ng pagkakalibrate. Kumpirmahin ang pagkakakilanlan, itinalagang halaga at isotopic na komposisyon ng pamantayang iyon. Suriin ang chromatographic correspondence, nauugnay na mga channel ng ion at posibleng kontribusyon ng walang label na materyal sa target na channel. Inilarawan ni Stoyanov at mga kasamahan kung paano maaaring i-bias ng hindi natukoy na heterogeneity sa mga panloob na pamantayan ng peptide ang resultang target na konsentrasyon. Ang pag-label lamang ay hindi nagtatag ng isang maaasahang sanggunian sa dami. [7]

Idagdag ang panloob na pamantayan sa isang yugto na naaangkop sa mga pagkalugi na nilayon nitong subaybayan, at itatag na ito ay kumikilos nang sapat tulad ng analyte. Ang isang pamantayang ipinakilala pagkatapos ng isang pagkuha ay hindi maaaring itama ang mga pagkalugi na naganap sa panahon ng pagkuha na iyon. Kahit na ang isang maagang karagdagan ay nangangailangan ng sapat na paghahalo at maihahambing na pag-uugali. Panatilihin ang parehong ganap na mga tugon at ang kanilang ratio: ang isang matatag na ratio ay maaaring magtago ng malalaking pagbabago sa pagiging sensitibo o sample na paghawak na nararapat sa pagsisiyasat.

Pumili ng mga transition o mga na-extract na-ion na signal na makikitang angkop para sa target sa sample matrix. Ang isang katugmang mass-to-charge na halaga ay hindi, sa pamamagitan ng sarili, patunay na ang isang nakakasagabal na bahagi ay wala. Ang isang buo na resulta ng peptide ay hindi rin dapat ma-convert sa isang pangunahing konsentrasyon ng protina nang hindi hiwalay na nagtatatag ng mga relasyon sa panunaw at pagbawi.

Gumamit ng quantitative NMR na may mga nakatalagang signal at reference

Iniuugnay ng quantitative proton NMR ang pinagsamang signal ng isang nakatalagang resonance sa bilang ng nag-aambag na nuclei at isang quantitative reference. Para sa isang internal-reference na eksperimento, ang halaga ng relasyon ay maaaring ipahayag bilang:

n _x = n _r × ( I _x / N _x ) / ( I _r / N _r )

Ang mga subscript na x at r ay tumutukoy sa analyte at reference. I ay ang pinagsamang signal at N ang bilang ng mga proton na kinakatawan ng signal na iyon; n _r ay ang nakatalagang halaga ng sanggunian. Ipinapalagay ng expression ang quantitatively comparable signal response at tamang peak assignment. Ang pag-convert ng resulta sa peptide mass ay nangangailangan ng molar mass sa nakasaad na batayan ng pag-uulat.

Inihambing ni Li at mga kasamahan ang qNMR, pagsusuri ng amino acid at naka-calibrate na HPLC sa isang collaborative na pag-aaral ng isang peptide reference material. Ipinakita ng gawain ang praktikal na paggamit ng qNMR at ipinakita rin na ang mga paghahambing ng pamamaraan ay nakasalalay sa kung paano tinatrato ang mga pamantayan at kawalan ng katiyakan. Ang mga natuklasan nito ay hindi nagtatag ng isang unibersal na ranggo para sa lahat ng mga sample ng peptide. [8]

Lutasin ang napiling analyte at reference signal mula sa mga impurities, solvent at isa't isa. Magtatag ng angkop na mga kondisyon ng pulso at pagpapahinga, signal-to-ingay at mga hangganan ng pagsasama. Ipinapaliwanag ng patnubay ng BIPM kung bakit kailangang tasahin ang pagpapahinga para sa mga signal sa aktwal na timpla. Ang isang chemical-shift reference ay hindi awtomatikong isang quantitative standard. Ang malapit na nauugnay na mga dumi na nagbabahagi ng pinagsamang resonance ay maaaring mag-ambag sa nasusukat na halaga kahit na ang integral ay lubos na nauulit. [9]

8 Ipakita ang hanay ng pagkakalibrate

Maghanda ng mga antas ng pagkakalibrate na sumasaklaw sa inilaan na sample na tugon at tasahin ang napiling modelo ng tugon. Suriin ang mga nalalabi at ang mga konsentrasyon na kinakalkula pabalik mula sa curve. Ang mataas na koepisyent ng determinasyon, R², ay hindi mismo makapagtatag ng katanggap-tanggap na pagkakalibrate, lalo na malapit sa ibabang dulo ng hanay. Inirerekomenda ng Eurachem na suriin ang pag-uugali ng regression at isaalang-alang ang pagtimbang kung saan nagbabago ang pagkakaiba-iba ng tugon sa konsentrasyon. Piliin ang modelo gamit ang pang-eksperimentong ebidensya sa halip na ang hitsura ng isang naka-plot na linya. [10]

Gumamit ng mga independiyenteng inihandang kontrol upang masuri ang pagganap sa loob ng saklaw. Itatag ang pinakamababang konsentrasyon kung saan maaaring suportahan ang kinakailangang katumpakan at bias; hindi sapat ang pagtuklas ng signal lamang. Para sa mga sample na nangangailangan ng dilution, ipakita na ang dilution ay nagpapanatili ng wastong resulta. Itala ang pamantayan sa pagtanggap bago suriin ang sample sequence at panatilihin ang dahilan para sa anumang ibinukod na punto ng pagkakalibrate. Ilapat ang pamantayang angkop sa layunin ng pagsusuri, nang hindi nag-i-import ng mga limitasyon sa numero mula sa hindi nauugnay na assay.

Paghiwalayin ang mga pagkalugi sa paghawak sa mga epekto ng matrix

Suriin ang paglusaw, paglilipat at mga panahon ng paghawak sa mga konsentrasyon na ginamit para sa pagsukat. Ipinakita ni Goebel-Stengel at mga kasamahan na ang pagbawi ng peptide ay maaaring depende sa nakontak na surface. Ang mga independiyenteng sample na paghahanda ay nakakatulong na ipakita ang kontribusyon na ito, samantalang ang paulit-ulit na mga sukat ng instrumento mula sa parehong vial ay hindi maaaring magparami ng mas maagang pagkawala ng paghahanda. Paghambingin ang naaangkop na sariwa at hawak na aliquot at imbestigahan ang pagbawi pagkatapos ng anumang pagsasala o paglilinis. [11]

Para sa LC-MS, ang isang pagbabago sa tugon ay maaaring magpakita ng pagbabago sa ionization na dulot ng coeluting sample constituents. Inilarawan ni Matuszewski at mga kasamahan ang mga eksperimento na nakikilala ang mga epekto ng matrix mula sa pagbawi ng pagkuha. Inilapat sa isang paraan ng peptide, ang mga paghahambing sa mga maayos na pamantayan, ang mga blangkong extract na pinatibay pagkatapos ng pagkuha at ang mga sample na pinatibay bago ang pagkuha ay maaaring makatulong sa paghiwalayin ang mga impluwensyang ito, sa kondisyon na ang mga konsentrasyon, volume at mga endogenous na kontribusyon ay patuloy na pinangangasiwaan. Suriin ang internal-standard-normalized na tugon pati na rin ang mga indibidwal na signal. [12]

Isama ang mga blangko na sumasagot sa mga partikular na tanong. Sinusuri ng blangko ng reagent ang ipinakilalang background; isang blangko pagkatapos suriin ng isang puro sample ang carryover. Kung ang isang tunay na blangko na sample matrix ay hindi magagamit, idokumento ang alternatibong disenyo at ang mga limitasyon nito. Tinatasa ng isang spike experiment ang pagbawi ng idinagdag na materyal sa ilalim ng mga nasubok na kondisyon; hindi nito pinatutunayan na ang isang orihinal na kasalukuyang analyte ay ganap na nakuhang muli o walang panghihimasok.

Iulat ang resulta kasama ang kawalan ng katiyakan at saklaw nito

Ang pagtatasa ng kawalan ng katiyakan ay dapat sumunod sa modelo ng pagsukat at isama ang mga maimpluwensyang kontribusyon. Ang mga ito ay maaaring lumabas mula sa pagtatalaga ng halaga ng calibrator, pagtimbang at pagbabanto, pagbawi ng paghahanda, pagkakalibrate at pag-uulit. Account para sa mga nakabahaging input at ugnayan kung saan may kaugnayan. Ang JCGM Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement ay nagbibigay ng balangkas para sa pagsasama-sama ng naturang impormasyon at pag-uulat ng resulta. Ang isang maliit na karaniwang paglihis mula sa paulit-ulit na mga sukat ay naglalarawan lamang ng pagkakaiba-iba na kinakatawan ng mga sukat na iyon. [13]

Iulat ang sample at batch identifier, tinukoy na peptide species, sinusukat na dami, unit, bersyon ng pamamaraan at batayan ng pagkakalibrate. Sabihin ang bilang at uri ng mga independiyenteng paghahanda at kung paano inilapat ang anumang dilution o recovery correction. Kung iniuulat ang pinalawak na kawalan ng katiyakan, tukuyin ang salik sa saklaw at ang interpretasyong nabibigyang katwiran ng pagsusuri. Panatilihin ang pinagbabatayan na mga chromatogram o spectra, mga desisyon sa pagsasama at mga resulta ng kontrol.

Kapag hindi sumasang-ayon ang mga pamamaraan, ihambing muna ang kanilang pagkapili sa kemikal at mga base sa pag-uulat. Ang pagtatantya na batay sa hydrolysate, isang nalutas na intact-peptide assay at isang masa ng pulbos ay maaaring sumangguni sa iba't ibang dami. Resolbahin ang pagkakaibang iyon bago i-attribute ang hindi pagkakasundo sa performance ng instrumento. Ang kapaki-pakinabang na resulta ay isang dami na nakatali sa isang tinukoy na sample at sinusuportahan ng isang bakas na rekord na pang-eksperimento.

Saklaw ng pananaliksik. Ang artikulong ito ay may kinalaman sa analytical quantification ng mga peptide na materyales sa mga sample ng laboratoryo. Hindi ito nagbibigay ng mga tagubilin para sa paggamit ng tao o beterinaryo at hindi gumagawa ng claim tungkol sa biological efficacy, pagiging angkop sa klinikal o pag-apruba sa regulasyon. Ang bawat pamamaraan ng pagsukat ay nangangailangan ng pagtatasa para sa inilaan na sample at layunin ng laboratoryo.

Mga sanggunian

[1] Wang X, Zhang F, Li H, et al. Pagtukoy sa kadalisayan ng sintetikong glucagon gamit ang diskarte sa mass balance. Mga Ulat sa Siyentipiko. 2020;10:4423. doi: 10.1038/s41598-020-61109-9

[2] Bunk DM, Lowenthal MS. Isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry para sa quantitative amino acid analysis. Sa: Pagsusuri ng Amino Acid: Mga Paraan at Protokol. 2nd ed. Mga Pamamaraan sa Molecular Biology. 2019;2030. Kabanata 12. doi: 10.1007/978-1-4939-9639-1_12

[3] Muñoz A, Kral R, Schimmel H. Quantification ng mga calibrant ng protina sa pamamagitan ng pagsusuri ng amino acid gamit ang isotope dilution mass spectrometry. Analytical Biochemistry. 2011;408(1):124–131. doi: 10.1016/j.ab.2010.08.037

[4] National Center for Biotechnology Information. PubChem Compound Summary para sa CID 750, Glycine. Na-access noong Nobyembre 2, 2026. Pinagmulan ng dokumento

[5] Anthis NJ, Clore GM. Sequence-specific na pagpapasiya ng mga konsentrasyon ng protina at peptide sa pamamagitan ng pagsipsip sa 205 nm. Agham ng protina. 2013;22(6):851–858. doi: 10.1002/pro.2253

[6] Kuipers BJH, Gruppen H. Prediction ng molar extinction coefficients ng mga protina at peptides gamit ang UV absorption ng constituent amino acids sa 214 nm upang paganahin ang quantitative reverse phase high-performance liquid chromatography-mass spectrometry analysis. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2007;55(14):5445–5451. doi: 10.1021/jf070337l

[7] Stoyanov AV, Rogatsky E, Stein D, et al. Isotope dilution assay sa peptide quantification: Ang hamon ng microheterogeneity ng panloob na pamantayan. Mga Aplikasyon sa Klinikal na Proteomics. 2013;7(11–12):825–828. doi: 10.1002/prca.201200130

[8] Li C, Bhavaraju S, Melanson JE, et al. Survey ng peptide quantification method at paghahambing ng kanilang reproducibility: Isang case study gamit ang oxytocin. Journal ng Pharmaceutical at Biomedical Analysis. 2019;166:105–112. doi: 10.1016/j.jpba.2018.12.028

[9] Westwood S, Stoppacher N, Martos G, et al. Panloob na Standard Reference Data para sa qNMR: 3,5-Bis(trifluoromethyl)benzoic Acid. Pakikipag-ugnayan BIPM-2019/02, ISRD-05. Bersyon 1.0; 13 Marso 2019. Seksyon 3. Pinagmulan ng dokumento

[10] Cantwell H, ed. Ang Kaangkupan para sa Layunin ng Analytical Methods: Isang Laboratory Guide sa Method Validation at Mga Kaugnay na Paksa. ika-3 ed. Eurachem; 2025. Mga Seksyon 5.2–5.4. Pinagmulan ng dokumento

[11] Goebel-Stengel M, Stengel A, Taché Y, Reeve JR Jr. Ang kahalagahan ng paggamit ng pinakamainam na plasticware at babasagin sa mga pag-aaral na kinasasangkutan ng mga peptide. Analytical Biochemistry. 2011;414(1):38–46. doi: 10.1016/j.ab.2011.02.009

[12] Matuszewski BK, Constanzer ML, Chavez-Eng CM. Mga diskarte para sa pagtatasa ng epekto ng matrix sa dami ng bioanalytical na pamamaraan batay sa HPLC-MS/MS. Analytical Chemistry. 2003;75(13):3019–3030. doi: 10.1021/ac020361s

[13] Pinagsamang Komite para sa Mga Gabay sa Metrology. Pagsusuri ng Data ng Pagsukat: Gabay sa Pagpapahayag ng Kawalang-katiyakan sa Pagsukat. JCGM 100:2008. Nawastong bersyon 2010. Mga Seksyon 4–7. Pinagmulan ng dokumento

LAHAT NG ARTIKULO AT IMPORMASYON NG PRODUKTO NA IBINIGAY SA WEBSITE NA ITO AY PARA LAMANG SA PAGPAPALALAG NG IMPORMASYON AT MGA LAYUNIN NG EDUKASYON.

Ang mga produktong ibinigay sa website na ito ay inilaan lamang para sa in vitro na pananaliksik. Ang in vitro research (Latin: *in glass*, meaning in glassware) ay isinasagawa sa labas ng katawan ng tao. Ang mga produktong ito ay hindi mga pharmaceutical, hindi inaprubahan ng US Food and Drug Administration (FDA), at hindi dapat gamitin para maiwasan, gamutin, o pagalingin ang anumang kondisyong medikal, sakit, o karamdaman. Mahigpit na ipinagbabawal ng batas na ipasok ang mga produktong ito sa katawan ng tao o hayop sa anumang anyo.