Cocer Peptides tomonidan          26 kun oldin.

Abstrakt

Peptidning miqdoriy natijasi aniqlangan kimyoviy turni, tegishli kalibrlash asosini va namuna bilan ishlashda o'lchanayotgan miqdorni saqlab qolishini tasdiqlovchi dalillarni talab qiladi. Kukun massasi, xromatografik maydon foizi va maqsadli peptid konsentratsiyasi turli xususiyatlarni tavsiflaydi. Ularni bir-birining o'rnini bosadigan deb hisoblash birinchi o'lchovni amalga oshirishdan oldin xatolikka olib kelishi mumkin. Ushbu maqolada peptid miqdorini aniqlashga yondashuv sifatida aminokislotalar tahlili, ultrabinafsha nurlanishi, kalibrlangan suyuqlik xromatografiyasi, izotop suyultirish massa spektrometriyasi va miqdoriy yadro magnit rezonansi ko'rib chiqiladi. U har bir usul taqdim etadigan ma'lumotni, uning signalini miqdorga aylantirish uchun zarur bo'lgan taxminlarni va talqin qilinadigan natija uchun zarur bo'lgan boshqaruv elementlarini tushuntiradi. Muhokama laboratoriya materiallari va analitik yechimlarga tegishli. U universal ish sharoitlarini yoki qabul qilish chegaralarini belgilamasdan, o'lchov tartibini tanlash va baholash uchun asos yaratadi.

O'lchanadigan miqdorni aniqlang

Asbobni tanlashdan oldin o'lchanadigan miqdorni, ya'ni o'lchanadigan miqdorni belgilang. Misollar alikvotdagi buzilmagan peptid miqdori, tayyorlangan eritmadagi massa kontsentratsiyasi yoki qabul qilingan qattiq namunadagi massa ulushini o'z ichiga oladi. Ketma-ketlikni, terminal guruhlarini va tegishli o'zgartirishlarni aniqlang. Xabar qilingan massaga qarama-qarshi ionlar kiradimi yoki faqat peptid qismini tavsiflaydi. Natija, shuningdek, aniqlangan namuna chegarasini talab qiladi: erigan qism, butun preparat yoki belgilangan operatsiyadan keyin tiklangan material.

O'lchangan qattiq moddada suv, qarshi ionlar, qoldiq erituvchilar va boshqa komponentlar bo'lishi mumkin. Ultraviyole xromatogrammadagi katta maqsadli cho'qqi bu tarkibiy qismlarning barchasini o'lchamaydi. Vang va uning hamkasblari sintetik peptid materialini tavsiflash uchun bir nechta nopoklik sinflarining o'lchovlarini birlashtirgan massa balansi yondashuvini namoyish etdilar. Bu miqdoriy standartni tayyorlashda nima uchun xromatografik maydon foizini peptid massa ulushi bilan avtomatik ravishda almashtirib bo'lmasligini ko'rsatadi. [1]

Kalibrlash asosini o'rnating

Kalibrator o'lchovga mos keladigan tayinlangan miqdorga, uning noaniqligi va ushbu tayinlash qo'llaniladigan shartlarga muhtoj. Sertifikatda aniq lot, kimyoviy shakl, qiymat asosi va foydalanish bo'yicha ko'rsatmalarni tekshiring. Xromatografik tozalikni ko'rsatadigan yorliqning o'zi maqsadli konsentratsiyani ta'minlamaydi. Bunk va Lowenthal NISTda peptid va oqsil ma'lumotnomalari uchun konsentratsiyalarni qo'llab-quvvatlash uchun izotop suyultiruvchi aminokislotalar tahlilidan foydalanishni tasvirlaydi. Bunday topshiriq nominal kukun og'irligi emas, balki hujjatlashtirilgan o'lchov tartibini talab qiladi. [2]

Belgilangan maqsadli massa ulushi bo'lgan materialdan miqdoriy ravishda tayyorlangan eritma uchun massa kontsentratsiyasi:

r = m × g / V

Bu erda m - tortilgan materialning massasi, w - xuddi shu asosda maqsadli peptid massa ulushi, V - oxirgi eritma hajmi. Agar m milligramda, w milligramda milligramda va V millilitrda, r milligramda milligramda. Hisoblash to'liq eritish va uzatishni nazarda tutadi. Bu operatsiyalarni tasdiqlamaydi. Miqdor kontsentratsiyasiga aylantirish aniq belgilangan kimyoviy turlarning molyar massasini talab qiladi.

Iloji bo'lsa, mustaqil tekshirish yechimini tayyorlang. Kalibrlash standartlari va bitta noto'g'ri tayinlangan zaxiradan olingan tekshiruvlar bir xil xatoga yo'l qo'ygan holda bir-biriga mos kelishi mumkin. Har bir tayinlangan kontsentratsiyaning manbasini qayta tiklash uchun zahiralarni tayyorlash va suyultirish yozuvlarini saqlang.

Etarli kimyoviy selektivlikka ega usulni tanlang

Namuna tarkibiga, kutilgan kontsentratsiyaga va tajriba uchun zarur bo'lgan noaniqlikka qarab usulni tanlang. Nisbatan toza mos yozuvlar materiali va bir nechta tegishli peptidlarni o'z ichiga olgan aralashma turli xil o'lchash muammolarini keltirib chiqaradi. 1-jadval quyida muhokama qilingan asosiy variantlarni taqqoslaydi. Cheklovchi savol - o'lchangan javobni belgilangan maqsadga etarlicha ishonch bilan bog'lash mumkinmi?

1-jadval O'lchov variantlari va ularning asosiy cheklovlari

Aminokislota o'lchovlarini peptid miqdori bilan bog'lang

Aminokislotalarni tahlil qilish birinchi navbatda peptidni o'lchanadigan tarkibiy aminokislotalarga aylantiradi. uchraydigan qoldiq uchun kuzatilgan n _{i marta} Ketma-ketlikda n _{i miqdori} peptid miqdori n _i / n _{i ga to'g'ri keladi} , agar bo'shatish to'liq bo'lsa va boshqa hech qanday manba bu aminokislotaga hissa qo'shmasa. Ketma-ketlik ruxsat bergan joyda bir nechta mos qoldiqlardan hisob-kitoblarni solishtiring. O'zaro kelishmovchilik o'rtacha hisobda yashiradigan muammoni ochib berishi mumkin.

Gidroliz tanlangan qoldiqlarni qabul qilib bo'lmaydigan yo'qotishsiz yoki o'lchangan aminokislotalarga aylantirmasdan chiqarishi kerak. Bunk va Lowenthal ta'kidlashicha, bu shartlar har bir tahlil qiluvchi uchun tekshirishni talab qiladi. Muñoz va uning hamkasblari izotop suyultirish orqali oqsil kalibrlovchilarining miqdorini aniqlashda bir nechta aminokislotalarni baholadilar, bu esa gidrolizni baholash uchun qoldiqlarga asoslangan hisob-kitoblar o'rtasidagi kelishuvdan foydalanishning eksperimental misolini taqdim etdi. Bitta material uchun o'rnatilgan shartlar boshqa peptid uchun etarli deb hisoblanmasligi kerak. [2,3]

Erkin aminokislotalar va boshqa peptidlar gidrolizatga hissa qo'shishi mumkin. Binobarin, faqat aminokislotalarni tahlil qilish mo'ljallangan buzilmagan ketma-ketlikni tanlab aniqlamasdan, umumiy tarkibga bog'liq tarkibni aniqlashi mumkin. Tegishli gidroliz blankalarini qo'shing va maqsadli qiymatni belgilashdan oldin ushbu hissalarni o'rganing. Kalibrator miqdorini hisoblashda erkin aminokislotalarning kimyoviy identifikatori va shaklidan foydalaning. Misol uchun, PubChem glisinni CID 750 sifatida belgilaydi; ma'lumotlar bazasi yozuvi identifikatsiyani tekshirishni qo'llab-quvvatlaydi, ammo aminokislota ma'lumotnomasi tarkibini tasdiqlamaydi. [4]

Ultraviyole o'lchovlarini ketma-ketlik orqali sharhlang

Tegishli instrumental diapazonda bir hil eritma uchun Pivo-Lambert munosabati A = elc bo'sh tuzatilgan absorbans A ni molyar yutilish e, optik yo'l uzunligi l va miqdor kontsentratsiyasi c bilan bog'laydi. Absorptivlik peptid, to'lqin uzunligi va o'lchash shartlariga mos kelishi kerak. 280 nm ga yaqin so'rilish aromatik qoldiqlarga kuchli bog'liq va har bir peptid uchun umumiy konsentratsiyani o'lchash vazifasini bajara olmaydi. Anthis va Clore 205 nm da ketma-ketlikka asoslangan yondashuvni ishlab chiqdi, bu bitta konversiya omilini qo'llashdan ko'ra kompozitsiyani hisobga olish qiymatini ko'rsatdi. [5]

Qisqa to'lqin uzunliklarida erituvchi va buferning yutilishi cheklovga aylanishi mumkin. Tarkibi mos keladigan blankdan foydalaning, foydalanish mumkin bo'lgan optik diapazonni tekshiring va mos suyultirishlarni solishtiring. Loyqalik yoki yutuvchi nopoklik maqsad bilan bog'liq bo'lmagan aniq konsentratsiya o'zgarishiga olib kelishi mumkin. Shuning uchun to'g'ridan-to'g'ri absorbsiya natijasi u bog'liq bo'lgan namuna tarkibi haqidagi taxminlarni o'z ichiga olishi kerak.

Xromatografik ajratish UV o'lchashdan oldin selektivlikni yaxshilashi mumkin, ammo miqdoriy LC tahlili hali ham tegishli javob munosabatini talab qiladi. Kuipers va Gruppen 214 nm da aminokislotalar va peptid bog'larining absorbsiyaga turli hissalarini o'lchadi. Ularning topilmalari nega turli peptidlarning teng tepalik joylari teng miqdorni bildirmasligi kerakligini tushuntiradi. Maqsadli miqdorni aniqlash uchun hal qilingan maqsadli javobni tegishli tayinlangan standartlar bilan solishtiring va haqiqiy analitik sharoitda kalibrlashni tekshiring. [6]

LC-MS izotoplarini suyultirishda ichki standartni baholang

LC-MS izotoplarini suyultirishda maqsadning javobi belgilangan kalibrlash modeli orqali qo'shilgan izotopik yorliqli hamkasbi bilan solishtiriladi. Ushbu standartning identifikatori, tayinlangan miqdori va izotopik tarkibini tasdiqlang. Xromatografik yozishmalarni, tegishli ion kanallarini va belgilanmagan materialning maqsadli kanalga qo'shilishi mumkin bo'lgan hissasini tekshiring. Stoyanov va uning hamkasblari peptidning ichki standartlaridagi hisobga olinmagan heterojenlik natijada maqsadli kontsentratsiyaga qanday ta'sir qilishi mumkinligini ko'rsatdi. Faqatgina yorliqlash ishonchli miqdoriy ma'lumotni o'rnatmaydi. [7]

Ichki standartni kuzatib borish uchun mo'ljallangan yo'qotishlarga mos keladigan bosqichga qo'shing va u o'zini tahlil qiluvchiga o'xshashligini aniqlang. Ekstraksiyadan so'ng joriy etilgan standart ushbu qazib olish paytida yuzaga kelgan yo'qotishlarni tuzata olmaydi. Hatto erta qo'shilish ham etarli aralashtirish va taqqoslanadigan xatti-harakatlarni talab qiladi. Mutlaq javoblarni ham, ularning nisbatlarini ham saqlang: barqaror nisbat sezgirlik yoki namunani qayta ishlashdagi tadqiqotga loyiq bo'lgan katta o'zgarishlarni yashirishi mumkin.

Namuna matritsasidagi maqsad uchun yaqqol mos keladigan o'tishlarni yoki ajratilgan ion signallarini tanlang. Massa-zaryadning mos keladigan qiymati, o'z-o'zidan, aralashuvchi komponent yo'qligini isbotlamaydi. Buzilmagan peptid natijasi, shuningdek, hazm qilish va tiklanish munosabatlarini alohida o'rnatmasdan, asosiy protein konsentratsiyasiga aylantirilmasligi kerak.

Belgilangan signallar va havolalar bilan miqdoriy NMR dan foydalaning

Miqdoriy proton NMR tayinlangan rezonansning integratsiyalashgan signalini hissa qo'shadigan yadrolar soni va miqdoriy ma'lumotnoma bilan bog'laydi. Ichki mos yozuvlar tajribasi uchun miqdor munosabati quyidagicha ifodalanishi mumkin:

n _x = n _r × ( I _x / N _x ) / ( I _r / N _r )

X va r pastki belgisi analit va havolani bildiradi. I birlashtirilgan signal va N - bu signal bilan ifodalangan protonlar soni; n _r - tayinlangan ma'lumotnoma miqdori. Ifoda miqdoriy jihatdan taqqoslanadigan signal javobi va to'g'ri tepalik tayinlanishini nazarda tutadi. Natijani peptid massasiga aylantirish uchun belgilangan hisobot asosida molyar massa talab qilinadi.

Li va uning hamkasblari peptid mos yozuvlar materialini birgalikda o'rganishda qNMR, aminokislotalar tahlili va kalibrlangan HPLC ni solishtirishdi. Ish qNMR dan amaliy foydalanishni ko'rsatdi va shuningdek, usullarni taqqoslash standartlar va noaniqliklarga qanday munosabatda bo'lishiga bog'liqligini ko'rsatdi. Uning topilmalari barcha peptid namunalari uchun universal reytingni o'rnatmaydi. [8]

Tanlangan analitni va aralashmalar, erituvchi va bir-biridan mos yozuvlar signallarini hal qiling. Tegishli impuls va dam olish sharoitlarini, signaldan shovqinga va integratsiya chegaralarini o'rnating. BIPM yo'riqnomasi nima uchun bo'shashishni haqiqiy aralashmadagi signallar uchun baholash kerakligini tushuntiradi. Kimyoviy siljish ma'lumotnomasi avtomatik ravishda miqdoriy standart emas. Integral rezonansga ega bo'lgan chambarchas bog'liq aralashmalar, hatto integral juda takrorlanadigan bo'lsa ham, o'lchangan miqdorga hissa qo'shishi mumkin. [9]

8 Kalibrlash diapazonini ko'rsating

Mo'ljallangan namuna javobini qamrab oluvchi kalibrlash darajalarini tayyorlang va tanlangan javob modelini baholang. Egri chiziqdan hisoblangan qoldiqlarni va konsentratsiyalarni tekshiring. Yuqori aniqlanish koeffitsienti, R² o'z-o'zidan maqbul kalibrlashni o'rnatolmaydi, ayniqsa diapazonning pastki qismiga yaqin. Eurachem regressiya xatti-harakatlarini baholashni va kontsentratsiyaga qarab javob dispersiyasi o'zgarib turadigan vaznni hisobga olishni tavsiya qiladi. Chizilgan chiziqning ko'rinishidan ko'ra eksperimental dalillardan foydalangan holda modelni tanlang. [10]

Diapazonda ishlashni baholash uchun mustaqil ravishda tayyorlangan boshqaruv vositalaridan foydalaning. Kerakli aniqlik va moyillikni qo'llab-quvvatlash mumkin bo'lgan eng past konsentratsiyani o'rnating; signalni aniqlashning o'zi etarli emas. Suyultirishni talab qiladigan namunalar uchun suyultirish to'g'ri natijani saqlab qolishini ko'rsating. Namuna ketma-ketligini baholashdan oldin qabul qilish mezonlarini yozib oling va har qanday istisno qilingan kalibrlash nuqtasining sababini saqlang. Aloqador bo'lmagan tahlildan raqamli chegaralarni import qilmasdan, analitik maqsadga mos mezonlarni qo'llang.

Ishlov berish yo'qotishlarini matritsa effektlaridan ajrating

O'lchash uchun ishlatiladigan kontsentratsiyalarda eritish, o'tkazish va saqlash muddatlarini baholang. Goebel-Stengel va uning hamkasblari peptidlarning tiklanishi aloqa yuzasiga bog'liq bo'lishi mumkinligini ko'rsatdi. Mustaqil namunali preparatlar ushbu hissani aniqlashga yordam beradi, holbuki bir flakondan takroriy asbob o'lchovlari preparatning oldingi yo'qotilishini takrorlay olmaydi. Tegishli yangi va ushlab turilgan alikotlarni solishtiring va har qanday filtrlash yoki tozalashdan keyin tiklanishni tekshiring. [11]

LC-MS uchun javobning o'zgarishi namuna tarkibiy qismlarining koelutatsiyasi natijasida kelib chiqqan ionlanishning o'zgarishini aks ettirishi mumkin. Matuszewski va uning hamkasblari ekstraktsiyani tiklashdan matritsa effektlarini ajratib turadigan tajribalarni tasvirlab berishdi. Peptid usulida qo'llaniladigan toza standartlar, ekstraktsiyadan keyin boyitilgan bo'sh ekstraktlar va ekstraktsiyadan oldin mustahkamlangan namunalar o'rtasidagi taqqoslash, konsentratsiyalar, hajmlar va endogen hissalar doimiy ravishda ko'rib chiqilsa, bu ta'sirlarni ajratishga yordam beradi. Ichki standart bilan normallashtirilgan javobni, shuningdek individual signallarni baholang. [12]

Muayyan savollarga javob beradigan bo'shliqlarni qo'shing. Reagent blankasi kiritilgan fonni tekshiradi; konsentrlangan namunadan keyin bo'sh joy o'tishni tekshiradi. Haqiqiy bo'sh namuna matritsasi mavjud bo'lmaganda, muqobil dizayn va uning cheklovlarini hujjatlashtiring. Spike tajribasi sinovdan o'tgan sharoitlarda qo'shilgan materialning tiklanishini baholaydi; u dastlab mavjud bo'lgan tahlil qiluvchi moddaning to'liq tiklanishini yoki aralashuvdan xoli ekanligini isbotlamaydi.

Natijani uning noaniqligi va ko'lami bilan xabar qiling

Noaniqlikni baholash o'lchov modeliga amal qilishi va ta'sirchan hissalarni o'z ichiga olishi kerak. Bular kalibrator qiymatini belgilash, tortish va suyultirish, preparatni qayta tiklash, kalibrlash va takrorlanishdan kelib chiqishi mumkin. Tegishli hollarda umumiy ma'lumotlar va korrelyatsiyalarni hisobga oling. JCGMning o'lchovdagi noaniqlikni ifodalash bo'yicha qo'llanmasi bunday ma'lumotlarni birlashtirish va natija haqida hisobot berish uchun asos yaratadi. Takroriy o'lchovlardan kichik standart og'ish faqat ushbu o'lchovlar bilan ifodalangan o'zgarishlarni tavsiflaydi. [13]

Namuna va partiya identifikatorlari, aniqlangan peptid turlari, o'lchangan miqdor, birlik, usul versiyasi va kalibrlash asosi haqida xabar bering. Mustaqil preparatlarning soni va turini hamda har qanday suyultirish yoki tiklashni tuzatish qanday qo'llanilganligini ayting. Agar kengaytirilgan noaniqlik haqida xabar berilsa, qamrov omilini va baholash bilan oqlangan talqinni aniqlang. Asosiy xromatogrammalar yoki spektrlarni, integratsiya qarorlarini va nazorat natijalarini saqlang.

Usullar bir-biriga mos kelmasa, avval ularning kimyoviy selektivligi va hisobot asoslarini solishtiring. Gidrolizat asosidagi taxmin, hal qilingan buzilmagan peptid tahlili va kukun massasi turli miqdorlarga tegishli bo'lishi mumkin. Asbobning ishlashiga kelishmovchilikni bildirishdan oldin bu farqni hal qiling. Foydali natija aniqlangan namunaga bog'langan va kuzatilishi mumkin bo'lgan eksperimental yozuv bilan tasdiqlangan miqdordir.

Tadqiqot doirasi. Ushbu maqola laboratoriya namunalarida peptid materiallarining analitik miqdorini aniqlashga tegishli. U inson yoki veterinariya uchun foydalanish bo'yicha hech qanday ko'rsatmalar bermaydi va biologik samaradorlik, klinik muvofiqlik yoki me'yoriy tasdiqlash haqida hech qanday da'vo qilmaydi. Har bir o'lchov jarayoni mo'ljallangan namuna va laboratoriya maqsadini baholashni talab qiladi.

Ma'lumotnomalar

[1] Vang X, Chjan F, Li H va boshqalar. Ommaviy muvozanat yondashuvidan foydalangan holda sintetik glyukagonning tozaligini aniqlash. Ilmiy hisobotlar. 2020;10:4423. doi: 10.1038/s41598-020-61109-9

[2] Bunk DM, Lowenthal MS. Aminokislotalarni miqdoriy tahlil qilish uchun izotop suyultiruvchi suyuqlik xromatografiyasi-tandem massa spektrometriyasi. In: Aminokislotalarni tahlil qilish: usullar va protokollar. 2-nashr. Molekulyar biologiyada metodlar. 2019; 2030. 12-bob. doi: 10.1007/978-1-4939-9639-1_12

[3] Muñoz A, Kral R, Schimmel H. Izotop suyultirish massa spektrometriyasidan foydalangan holda aminokislotalarni tahlil qilish orqali oqsil kalibrlovchilarining miqdorini aniqlash. Analitik biokimyo. 2011;408(1):124–131. doi: 10.1016/j.ab.2010.08.037

[4] Milliy Biotexnologiya Axborot Markazi. CID 750, Glitsin uchun PubChem birikmasi. 2026-yil 2-noyabrda kirish. Manba hujjati

[5] Anthis NJ, Clore GM. Protein va peptid kontsentratsiyasini 205 nm da absorbans orqali ketma-ketlikka xos aniqlash. Protein haqidagi fan. 2013;22(6):851–858. doi: 10.1002/pro.2253

[6] Kuipers BJH, Gruppen H. Miqdoriy teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi-mass-spektrometriya tahlilini amalga oshirish uchun tarkibiy aminokislotalarning 214 nm da ultrabinafsha nurlanishidan foydalangan holda oqsillar va peptidlarning molyar so'nish koeffitsientlarini bashorat qilish. Qishloq xo'jaligi va oziq-ovqat kimyosi jurnali. 2007;55(14):5445–5451. doi: 10.1021/jf070337l

[7] Stoyanov AV, Rogatskiy E, Stein D va boshqalar. Peptid miqdorini aniqlashda izotopni suyultirish tahlili: ichki standartning mikroheterojenligi muammosi. Proteomikaning klinik ilovalari. 2013;7(11–12):825–828. doi: 10.1002/prca.201200130

[8] Li C, Bhavaraju S, Melanson JE va boshqalar. Peptid miqdorini aniqlash usullarini o'rganish va ularning takrorlanishini taqqoslash: Oksitotsindan foydalangan holda vaziyatni o'rganish. Farmatsevtika va biotibbiyot tahlillari jurnali. 2019;166:105–112. doi: 10.1016/j.jpba.2018.12.028

[9] Westwood S, Stoppacher N, Martos G va boshqalar. qNMR uchun ichki standart ma'lumotnoma ma'lumotlari: 3,5-Bis(triflorometil)benzoy kislotasi. Hisobot BIPM-2019/02, ISRD-05. Versiya 1.0; 2019 yil 13 mart. 3-qism. Manba hujjati

[10] Cantwell H, ed. Analitik usullarning maqsadga muvofiqligi: usullarni tekshirish bo'yicha laboratoriya qo'llanmasi va tegishli mavzular. 3-nashr. Evrakem; 2025. 5.2–5.4-bo'limlar. Manba hujjati

[11] Goebel-Stengel M, Stengel A, Tache Y, Jr. Reeve Jr. Peptidlar bilan bog'liq tadqiqotlarda optimal plastmassa va shisha idishlardan foydalanishning ahamiyati. Analitik biokimyo. 2011;414(1):38–46. doi: 10.1016/j.ab.2011.02.009

[12] Matushzewski BK, Constanzer ML, Chavez-Eng CM. HPLC-MS/MS asosida kantitativ bioanalitik usullarda matritsa ta'sirini baholash strategiyalari. Analitik kimyo. 2003;75(13):3019–3030. doi: 10.1021/ac020361s

[13] Metrologiya boʻyicha qoʻllanmalar qoʻshma qoʻmitasi. O'lchov ma'lumotlarini baholash: o'lchovdagi noaniqlikni ifodalash bo'yicha qo'llanma. JCGM 100: 2008. Tuzatilgan versiya 2010. 4–7-bo'limlar. Manba hujjati

USHBU SAYTDA TAQDIM ETILGAN BARCHA MAQOLALAR VA MAHSULOT HAQIDAGI MA'LUMOTLAR FAQAT MA'LUMOTNI TARQATISH VA MA'LUMOT MAQSADLARIGA BO'LGAN.

Ushbu veb-saytda taqdim etilgan mahsulotlar faqat in vitro tadqiqot uchun mo'ljallangan. In vitro tadqiqot (lotincha: *shishada*, shisha idishda degan maʼnoni anglatadi) inson tanasidan tashqarida olib boriladi. Ushbu mahsulotlar farmatsevtika mahsulotlari emas, AQSh oziq-ovqat va farmatsevtika idorasi (FDA) tomonidan tasdiqlanmagan va har qanday tibbiy holat, kasallik yoki kasallikning oldini olish, davolash yoki davolash uchun ishlatilmasligi kerak. Ushbu mahsulotlarni inson yoki hayvon tanasiga har qanday shaklda kiritish qonun bilan qat'iyan man etiladi.