Ma ke kumu o kēlā me kēia kaʻina ola a me ka therapeutic synthetic hou e waiho nei i ka pilina peptide. Hoʻopili kēia hui covalent kumu i nā ʻakika amino e hana i nā molekala ola. ʻO ka neʻe ʻana i nā wehewehe puke i hala, ʻo ka haku ʻana i kēia pilina kemika e kuhikuhi pololei i ka kūleʻa pāʻoihana ma ka biotechnology. Hoʻohana maikaʻi ʻia ka synthesis protein kūlohelohe i loko o ka ribosome cellular, e loaʻa ana ka maikaʻi maikaʻi. ʻO ka mea ʻē aʻe, ʻo ka hoʻopili ʻana i kēia mau mea paʻa ma ka pālākiō e hoʻolauna i nā pilikia ʻenehana nui. ʻO ka hāʻule ʻana o ka hua, ka hoʻopaʻapaʻa maʻemaʻe, a me ka pau ʻole o ka paʻa ʻana e hoʻopilikia mau i nā hoʻonohonoho hale hana a me nā laina hana ʻoihana like. Pono ʻoe e hoʻomaopopo i ka ʻoiaʻiʻo kemika o ka hoʻokumu ʻana a me ka cleavage e loiloi pololei i nā ʻano synthesis. E ʻimi mākou i ka hopena o ka rigidity structural i ka hōʻoia analytical a me nā hoʻolālā hoʻolālā. ʻO ka hope loa, e alakaʻi kēia mau ʻike kūpono iā ʻoe i ke koho ʻana i nā hoa hana hana kūpono no ka maʻamau peptides.
Papa helu
Paʻa Paʻa: Hōʻike nā paʻa Peptide i kahi ʻano paʻa pālua ʻāpana, e kuhikuhi ana i ka paʻa a me ka hoʻohālikelike 3D o nā therapeutic synthetic a me nā reagents.
ʻO Synthesis Bottlenecks: ʻO nā hopena condensation i loko o nā kaiapuni keʻena (e like me SPPS) e koi i ka loiloi ikaika e pale i nā kaʻina oki a me ka hōʻuluʻulu ʻana.
Nā Manaʻo Analytical: Pono ka hoʻāʻo chromatographic a spectrometric ikaika i ka hōʻoia ʻana i ka pono paʻa (HPLC, MS) no ka hōʻoia ʻana i ka noiʻi a i ʻole ka maʻemaʻe maʻemaʻe.
Koho Hoa: ʻO ka neʻe ʻana mai ka manaʻo i ka hoʻolaha ʻana e koi ana i kahi hoa hana synthesis i loiloi ʻia ma ka scalability, QA/QC transparency, a me nā hoʻolālā hoʻēmi pilikia.
Hoʻokumu nā ʻōnaehana olaola i nā protein paʻakikī ma o ka hopena synthesis dehydration pololei. Hoʻopili pololei ka hui carboxyl o hoʻokahi amino acid i kēia kaʻina hana. Hoʻopili ia i ka hui amino o kahi amino acid pili. Hoʻokuʻu kēia ʻano hana kemika i kahi mole wai hoʻokahi ma ke ʻano he hopena. ʻO ka pilina covalent ka hopena o ka iwi kuamoʻo o nā mea a pau peptides . Hana ʻo ia ma ke ʻano he scaffold kumu kumu e paʻa ai ke ola. Kapa mākou i kēia loulou kikoʻī he paʻa amide. Ua aʻo ka poʻe kemika i kāna mau waiwai kūʻokoʻa no nā makahiki he nui e hoʻomaopopo i ka hoʻolālā lāʻau.
ʻO ka paʻa carbon-nitrogen ʻaʻole ia he paʻa hoʻokahi maʻalahi. Hoʻokaʻawale mau nā electrons ma o ka oxygen, carbon, a me nā ʻātoma nitrogen. Hoʻokumu kēia kaʻana like electron i kahi ʻano resonance ʻokoʻa. Loaʻa i ka palapala hoʻopaʻa kahi ʻano hoʻopaʻa pālua ʻāpana. ʻAʻole hiki ke kaʻa kaʻawale ma ke ākea. Hoʻopaʻa mau ʻia nā ʻātoma ʻeono i loko o kahi geometry paʻa. Ua makemake nui ʻia ka hoʻonohonoho Trans. Mālama kēia i nā paio steric koʻikoʻi ma waena o nā kaulahao ʻaoʻao nui. Hōʻike ʻia ʻo Proline i kahi ʻokoʻa loa kahi e kū ai nā hoʻonohonoho cis. ʻO kēia laka geometric ka mea e hoʻopaʻa pono ai i ka molecular flexibility.
No ke aha he mea nui loa kēia ʻano paʻakikī? Hoʻopili pololei ia i ka hoʻolālā a me ka kūleʻa o nā therapeutic synthetic. ʻO ka nele o ka hoʻololi ʻana e hoʻokō i nā conformation kikoʻī ʻekolu. ʻO kēia mau hiʻohiʻona hiki ke hoʻoholo i ka pili pili paʻa cell receptor. Mālama pū ka rigidity i ka iwi kuamoʻo mai ka hoʻohaʻahaʻa enzymatic wikiwiki. Hoʻonui ia i ke ola o ka hoʻohana ʻana o nā ʻano lāʻau lapaʻau kālepa. Ke hoʻolālā ka poʻe noiʻi i nā pūhui synthetic, hilinaʻi nui lākou i kēia geometry wānana. ʻO ke ʻano planar ka mea holoʻokoʻa i ka bioavailability vivo. Inā maʻalahi ka paʻa, ʻaʻole hiki i nā lāʻau lapaʻau ke hoʻopaʻa pololei ʻia i loko o nā mea hoʻopaʻa kelepona.
Hiʻona Biochemical |
Waiwai Kino |
Hualoaʻa Kalepa |
|---|---|---|
ʻO ka hoʻoneʻe ʻana o ka Resonance |
ʻAno paʻa pālua hapa |
Kāohi i ka hoʻololi ʻana i ka iwi kuamoʻo, e hoʻokō ana i ka paʻa o ka hale. |
Geometry Planar |
Hoʻonohonoho paʻa trans |
Hoʻemi i ka paio ʻaoʻao-chain, hoʻomaikaʻi i ka pili o ka mea hoʻokipa. |
ʻO ka hoʻoheheʻe wai |
Hoʻohui iwi kuamoʻo Covalent |
Pono ka hoʻokomo ikehu kikoʻī, hoʻopiʻi i ka scale-up synthetic. |
Hoʻohana maikaʻi ʻia ka unuhi ʻana olaola i ka ribosome pūnaewele. He maikaʻi loa kēia mīkini biological a hoʻoponopono nui ʻia. Hoʻopili ʻo ia i nā ʻakika amino me ka maʻalahi i nā kaiapuni wai. ʻOkoʻa loa ka hana ʻana o ka synthesis ma kahi hoʻonohonoho hoʻokolohua. Hana ʻia ʻo Solid-Phase Peptide Synthesis (SPPS) ma ke ʻano he kūlana pāʻoihana hou. Pono ia i nā reagents synthetic paʻakikī e like me HATU a i ʻole DIC. Pono mākou e pale i nā hui hana kūikawā ma mua. ʻO nā hui pale maʻamau ka Fmoc a i ʻole Boc chemistries. A laila, koho mākou i ka pale ʻana iā lākou me ka hoʻohana ʻana i nā kumu haʻahaʻa a i ʻole nā ʻakika. Hoʻomaka hou kēia pōʻai hoʻoikaika no kēlā me kēia waikawa amino i hoʻohui ʻia. ʻO ka ʻoiaʻiʻo kemika e kuhikuhi i nā mana kaiapuni anhydrous. Pono mākou e hoʻoikaika i ka ʻōnaehana ola kino e hana maʻamau.
Loaʻa nā nāwaliwali ʻoiai ke ʻano covalent ikaika. ʻO Cleavage, i alakaʻi pinepine ʻia e ka hydrolysis, e noho mau i ka hoʻoweliweli ʻoihana. ʻO kekahi mau kūlana kaiapuni e hoʻolalelale koke i kēia hoʻoemi kemika. Pono ʻoe e noʻonoʻo i kēia mau ala haʻihaʻi i ka wā o ka hoʻokumu ʻana.
Hoʻopilikia nā kaiapuni pH koʻikoʻi i nā kaulike electrostatic koʻikoʻi, e hoʻopale i ka hydrolysis wikiwiki.
Hoʻoikaika ikaika nā enzyme proteolytic a hoʻokaʻawale i nā kumu hoʻokaʻina amino acid.
Hoʻokomo ʻia ke koʻikoʻi wela kiʻekiʻe i ka ikehu kinetic ʻoi aku ka nui, e uhaʻi i nā loulou iwi kuamoʻo ma mua.
Hoʻokomo ka microbial contamination i ka hana enzymatic unregulated i loko o nā hana sterile.
Hoʻomaka ka nui o ka wai ambient i ka palaho hydrolytic i loko o nā pauka lyophilized i hoʻopaʻa pono ʻole ʻia.
ʻO ka loiloi ʻana i kēia mau palena kūpaʻa e pono ai nā pae hoʻohālikelike kiʻekiʻe. ʻAʻole hiki iā ʻoe ke hana makapō i nā huahana pāʻoihana. ʻO ka pilikia o Cleavage ke kuhikuhi nei i nā protocol mālama koʻikoʻi ma ka honua holoʻokoʻa. No ka laʻana, pono nā pauka lyophilized i nā mahana sub-zero mau. Ke koi aku nei nā ʻano wai wai i nā mea hoʻopuʻi kikoʻī loa. Pono nā mea hoʻopili e hoʻopaʻa ikaika i ka makū a me ke kukui UV. Hoʻopili pololei kēia mau kaohi paʻa i ka hiki ke kūʻai aku a me ka logistic hoʻouna. Inā haʻi mua ka paʻa iwi kuamoʻo, nalowale ka hopena o ka lāʻau lapaʻau holoʻokoʻa. Ke koi nei nā ʻoihana hoʻoponopono e like me ka FDA i ka ʻikepili paʻa mau makahiki. Pono ʻoe e hōʻoia i ka paʻa o ka iwi kuamoʻo i ka wā.
He paʻakikī koʻikoʻi ka mana o ka maikaʻi no ka hana molecular. Pono ʻoe e hōʻoia i ka pololei o ka hoʻolālā ma mua o kekahi noi. He mea paʻakikī loa ka hoʻokaʻawale ʻana i ka mole i hoʻopaʻa ʻia mai ka synthesis byproducts. Hoʻohālike kino nā kaʻina ʻoki i ka huahana i makemake ʻia. Hiki ke hūnā ʻia nā mea haumia holoi i loko o nā hui kemika paʻakikī. Hoʻopōʻino ke kaʻina holoʻokoʻa i kahi loulou nalo hoʻokahi. Pono ʻoe i nā ʻano analytical koʻikoʻi e hōʻoia i ka holomua.
Analytical Method |
Hana mua |
Ka palena hoʻoholo manaʻo |
Hōʻike Huakaʻi |
|---|---|---|---|
HPLC |
Hoʻokaʻawale Chromatographic |
Ka maʻemaʻe kaʻina holoʻokoʻa |
Kromatogram kiʻekiʻe |
ʻIkepili Nui |
Ion Mass Ana |
Kaumaha molekula pololei |
Kiʻikuhi nui-i-kau |
NMR Spectroscopy |
ʻO ke kiʻi hoʻopaneʻe magnetic |
ʻO ka hōʻoia ʻana o ke kūkulu lua |
ʻIkepili hoʻololi kemika |
FTIR Spectroscopy |
Hoʻopaʻa ʻia ʻo Infrared Light |
Aia ka pilina Amide |
ʻO nā kiʻekiʻe o ka absorption |
ʻO High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) e noho mau ana i ke kūlana gula honua. Hoʻokaʻawale ia i nā pūhui e pili ana i ka hydrophobicity. Hoʻokaʻawale ʻo HPLC i ka pahu hopu holoʻokoʻa mai nā haumia ʻoki pōkole. Hāʻawi ia iā ʻoe i kahi pākēneka maʻemaʻe akaka. Hōʻoia pololei ka Mass Spectrometry (MS) i ke kaumaha molekala pololei. ʻO ESI a me MALDI-TOF ka mea maʻamau i hoʻohana ʻia. Hāʻawi koke ʻo MS i ka hōʻoia ʻana i ke kaʻina koʻikoʻi. Hoʻopaʻa pono ʻia kēlā me kēia waikawa amino i ka wā synthesis. ʻIke ia i nā ʻokoʻa liʻiliʻi liʻiliʻi ma muli o ka nalowale ʻana o nā pūʻulu pale.
ʻO ka Nuclear Magnetic Resonance (NMR) a me Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR) e hōʻoia i nā mea hohonu. Hoʻopaʻa paʻa lākou i ka hiki ʻana o ka paʻa amide kikoʻī. Kōkua lākou i ka poʻe noiʻi e hoʻolālā pololei i nā hale lua. ʻIke kēia mau mea hana i nā alpha-helice a i ʻole nā pepa beta e hana ʻia ana i loko o ke kaulahao. He mea koʻikoʻi loa ka wehewehe ʻikepili no nā mea kūʻai aku. I ka nānā ʻana i ka palapala hōʻoia o ka mea hana hana (CoA), e nānā pono. E noi i nā chromatograms HPLC hiki ke hōʻoia ʻia e hōʻike ana i nā piko ʻoi. E hōʻoia i ka ʻikepili MS e like me ka theoretical i helu pono ʻia. Hōʻike ʻo Vague CoAs i nā hemahema o ka hana ʻana a i ʻole nā mea haumia huna. Pono ʻoe i ka hōʻoia empirical o ka maikaʻi o ka huahana ma mua o ka hoʻomau.
ʻO ka hoʻoulu ʻana i nā mea kemika e hoʻolauna i nā bottlenecks hale hana koʻikoʻi ma ka honua holoʻokoʻa. E hāʻule nui ka hua ma nā kaʻina lōʻihi loa. Hoʻopili koke nā hemahema o ka hui ʻana me kēlā me kēia waikawa amino i hoʻohui ʻia. ʻAʻole kala ʻia ka ʻoiaʻiʻo makemakika o ka synthesis sequential.
ʻO ka 99% ka hoʻopili pono ʻana i kēlā me kēia ʻanuʻu e hāʻawi ma kahi o 60% maʻemaʻe ma luna o 50 mau ʻanuʻu.
ʻO ka 95% maikaʻi e hāʻule i ka hopena holoʻokoʻa holoʻokoʻa i 7% wale nō.
ʻAʻole hiki ke hoʻokaʻawale ʻia nā kaulahao hāʻule i ʻoki ʻia mai ka nui o ka pahuhopu hope.
Hoʻonui nui nā kumukūʻai hoʻomaʻemaʻe i ka piʻi ʻana o ka lōʻihi ma mua o 30 koena.
Hoʻopili hou ka Steric hindrance i nā hoʻoikaika synthesis nui. Hoʻopaʻa kino nā kaulahao ʻaoʻao nui i ke kahua hoʻoikaika. Hoʻokomo pinepine ʻia ka hui ʻana i nā kaʻina hydrophobic kiʻekiʻe. Piʻi hope ke kaulahao kemika e ulu ana iā ia iho. Huna loa keia pelu ana i ka hui amino reactive. ʻAʻole hiki i nā reagents hoʻohui maʻamau ke komo i loko o ka nuipaʻa hōʻuluʻulu paʻa. No ka lanakila ʻana i kēia, hoʻohana nā chemists i nā mea hoʻoheheʻe organik kūikawā. Hoʻokomo lākou i nā mea hana chaotropic ikaika e hoʻopau i ka pilina hydrogen. I kekahi manawa, hoʻohana lākou i ka hoʻomehana microwave e hoʻokaʻawale i nā kaulahao. Hoʻololi pinepine ka poʻe noiʻi i nā pseudo-prolines i mea e pale ai i kēia pelupili mua ʻana.
Hoʻoikaika pū ka Scaling i nā hoʻoholo kālā paʻakikī. Ke kū nei ʻoe i nā kumu kūʻai maʻemaʻe i kēlā me kēia lā. ʻO ka loaʻa ʻana o ka maʻemaʻe kiʻekiʻe kiʻekiʻe he 99% pono e hoʻomaʻemaʻe HPLC nui. Hoʻopau kēia kaʻina hana i ka nui o nā mea hoʻoheheʻe weliweli. Hāʻawi pū ia i nā mea waiwai nui i ka wā kaʻawale. Ke koi nei nā noi noiʻi ma vivo i kēia hoʻomaʻemaʻe ikaika me ka ʻole. Ma ka ʻokoʻa, hiki i nā noi noiʻi in vitro ke ʻae i ka 85% maʻemaʻe me ka palekana. Pono ʻoe e hoʻohālikelike pono i nā ʻike kālā me nā koi hoʻokolohua koʻikoʻi. ʻO ke koho ʻana i ka papa maʻemaʻe hewa e hoʻopau i nā waihona kālā a hoʻololi i ka ʻikepili koʻikoʻi.
ʻO ka neʻe ʻana mai kahi manaʻo theoretical i ka ʻoihana kūʻai holoʻokoʻa e pono ai i nā hui hoʻolālā. Pono ʻoe e loiloi pono i nā hiki ʻenehana ma mua o kou kau inoa ʻana i nā ʻaelike. Hiki i ka mea kūʻai aku koho ke hoʻoponopono i nā kaʻina paʻakikī? E ʻimi i ka ʻike i hōʻoia ʻia me nā waikawa amino kūlohelohe. E nānā i ko lākou hiki kino ke synthesize i nā hana cyclic constrained. E hoʻoholo inā hoʻohana mua lākou i nā ʻano hana paʻa-paʻa a i ʻole wai-phase. ʻOi aku ka maikaʻi o ka LPPS no nā kaʻina kālepa pōkole loa. ʻOi aku ka maikaʻi o ka lawelawe ʻana o SPPS i nā kaʻina noiʻi paʻakikī. Pono ka mea kūʻai aku e hoʻohālikelike i kā lākou ʻenehana me kāu mole kikoʻī.
Hoʻokaʻawale ka hōʻoia maikaʻi i nā hoa kaulana mai nā labs synthesis kumu. He ʻokoʻa loa ka hana ʻana i ka hana noiʻi mai ka hoʻokō cGMP koʻikoʻi. Pono nā hana hana maikaʻi o kēia manawa i nā mana kaiapuni paʻa. Pono ka mea kūʻai aku e mālama mau i nā kaʻina hana Standard Operating Procedures (SOPs). Pono lākou i nā lumi hoʻomaʻemaʻe i mālama nui ʻia no ka hana ʻana. Pono e holo mau ka nānā ʻana i ka maikaʻi o ka ea me ke keakea ʻole. Pono ʻoe e noi i nā hōʻike hoʻokolokolo kūhelu e kikoʻī ana i kā lākou mau kūlana hoʻokō.
ʻAʻole hiki ke kūkākūkā ʻia ka ʻike ʻikepili no nā mea kūʻai koʻikoʻi. E hoʻokumu i nā manaʻolana hōʻike kumu mua i nā kūkākūkā. E koi i ka hōʻike analytical maka i hāʻawi ʻia me kēlā me kēia pūʻulu. Pono pono nā meheu HPLC i hōʻoia ʻia a me MS spectra. E noi i ka ʻikepili hōʻoia hōʻoia ma mua. Inā kānalua ka mea kūʻai aku e kaʻana like i ka ʻikepili analytical maka, e hele koke. Hōʻike maʻamau ia i ka hāʻule ʻana o ka mana maikaʻi ʻōnaehana.
E loiloi i nā hoʻolālā hoʻēmi pilikia a me nā manawa huli maʻamau. Loaʻa pinepine ka hāʻule ʻana o ka synthesis i ke kemika paʻakikī. Hoʻopuka koke kekahi hoa maikaʻi i kēia mau pilikia ʻenehana. Hoʻoikaika lākou i nā ʻanuʻu hoʻopili paʻakikī me ka wikiwiki ʻole. Hoʻoponopono lākou i nā protocol kūloko me ka ikaika e hoʻokō i nā palena manawa o ka papahana. Hoʻokō lākou i kēia me ka ʻole o ka mōhai ʻana i ka maʻemaʻe huahana hope loa. Ua wānana maikaʻi ka mōʻaukala mea kūʻai aku i ka hilinaʻi o ka wā e hiki mai ana. Pono ʻoe i kahi hoa kamaʻilio maikaʻi loa e hoʻokele akamai i nā pilikia kemika.
ʻO ka hoʻopaʻa ʻana i ka kemika kumu o ka paʻa peptide wale nō ke kumu hoʻomaka. ʻO ka unuhi ʻana i kēlā kemika maʻalahi i loko o ka hana hilinaʻi, hiki ke hoʻonui ʻia ke hōʻike ʻana i ka paʻakikī pāʻoihana maoli. Ua ʻimi mākou i ke ʻano o ka paʻa ʻana a me ka hana biological. Ua noʻonoʻo mākou i ke kumu e hoʻokomo ai ka synthesis sequential i ka hāʻule ʻana o ka makemakika hiki ʻole ke pale ʻia.
ʻO ka hōʻoia analytical paʻa ke kūpaʻa i kou pale ikaika loa i ka hoʻohaʻahaʻa a me ka hana ʻole o ka synthesis. ʻO ka hui pū ʻana o nā mea kūʻai aku e hoʻēmi i nā pilikia nui i loaʻa i ka hoʻonui ʻana i ke kemika. Ma ke ʻano he mea kūʻai ʻenehana a mea noiʻi paha, pono ʻoe e koi i ka ʻike maopopo loa. E hoʻopaʻa i kāu mau protocol synthesis e kūʻē i nā kūlana analytical hou. E noi i nā kūkākūkā ʻenehana kikoʻī no nā kaʻina i ʻoi aku ma mua o kanakolu koena. E noʻonoʻo pono i ka laʻana CoAs ma mua o ka hana ʻana i nā ʻaelike hana maʻamau nui.
A: ʻOiai ʻo nā mea paʻa peptide āpau he mau paʻa amide ʻenehana, aia lākou i loko o ka pōʻaiapili olaola o nā waikawa alpha-amino. Hoʻopili lākou i ka pūʻulu alpha-carboxyl o kahi amino acid i ka pūʻulu alpha-amino o kekahi. Hoʻokumu kēia hoʻonohonoho biological kikoʻī i ka hoʻopaʻa ʻana o ka resonance, e koi ana i kahi geometry paʻa pono no ka pelu ʻana i ka protein.
A: ʻO ka hydrolysis ke kumu nui o ka hoʻohaʻahaʻa ʻana i ka hale. Hana ʻia ka wai ma ke ʻano he catalyst, e ʻoki ana i ka pilina covalent. Hoʻonui nui ʻia kēia hopena i ka wā o ka piʻi ʻana o ka pH, ka ʻike ʻana i nā wela kiʻekiʻe, a i ʻole ka hoʻokomo ʻana o ka microbial contamination i nā enzyme proteolytic unregulated i loko o ke kaiapuni mālama.
A: Pono ka Synthesis i ka hoʻohui pū. Inā holo kēlā me kēia kaʻina hoʻohui i ka 99% ka maikaʻi, ʻo ka 1% ka helu hāʻule e hui pū ʻia me ka makemakika. Ma luna o 50 mau ʻanuʻu, hāʻule ka hopena holoʻokoʻa ma kahi o 60%. Hoʻopaʻa hou ʻia ka hoʻopaʻa ʻana o ke kaulahao a me ke kaulahao i nā wahi hana, e hōʻoiaʻiʻo ana i ka pau ʻole o ka hoʻohui ʻana i ke kaulahao i ka lōʻihi o ke kaulahao.
A: Pono ʻoe e koi i kahi palapala hōʻoia e hōʻike ana i nā hōʻike analytical paid. E koi i nā chromatograms HPLC hoʻonā kiʻekiʻe e hōʻoia i ka maʻemaʻe o ka laʻana a ʻike i nā haumia i ʻoki ʻia. I ka manawa like, koi i ka ʻikepili Mass Spectrometry (MS) e hōʻoia i ke kaumaha molekala pololei, e hōʻoia i ka pololei o ke kaʻina a me ka hoʻoneʻe ʻana i ka hui pale.
