lyophilized, an di cemidî de, peptîd ji nûvesaziyek pir rastîn hewce dike ku bi bandor bixebite. Desthilatdariya nerast bi gelemperî dibe sedema hilweşîna bilez, windakirina tam bandor, û veberhênanek winda di materyalên hêja de. Veavakirin pêvajoyek bingehîn e ku lêzêdekerek şil li tozek hişk lê zêde bike da ku çareseriyek domdar, bikêr were afirandin. Ev gav valahiya di navbera strukturên kîmyewî yên razayî û pêkhateyên biyolojîkî yên çalak de pir dike. Ger hûn vê protokolê bilezînin an jî çareserkerê xelet bikar bînin, hûn xeternak in ku bendên molekulî yên nazik bi domdarî hilweşînin berî ku ew bigihîjin qonaxa ceribandinê. Di vê rêberê berfireh de, hûn ê protokolên standardkirî yên rastîn ên ji bo bi ewlehî tevlihevkirin û hilanîna van pêkhateyan fêr bibin da ku dirêjahiya wan zêde bikin. Em her tiştî ji hilbijartina diluent û amadekirina sterîl bigire heya hesabên dozê yên rast vedigirin. Daxuyanî: Protokolên ku li jêr hatine destnîşan kirin tenê ji bo armancên serîlêdana laboratîfê yên perwerdehî, lêkolînî, an destnîşankirî ne.
Tabloya naverokê
Sterîlî bê danûstandin e: Bicîhanîna amadekariyên sterîl ên pola klînîkî pêşî li gemarî û mezinbûna bakteriyan digire.
Hilbijartina diluent zindîbûnê destnîşan dike: Ava bakteriostatîkî standard e, lê profîlên peptîdê yên taybetî (hîdrofîl û hîdrofobîk) dibe ku hewceyê ava sterîl, asîta acetîk, an DMSO bikin.
Zehfbûna mekanîkî: Peptîd li hember stresa rijandinê hesas in; qet şûşê nehejînin. Bi nermî bizivirin da ku girêdanên molekular biparêzin.
Hilberîna zincîra sar: Piştî ku ji nû ve hatî çêkirin, peptîd divê di sarincokê de (bi gelemperî 36°F heya 46°F) werin hilanîn û ji ronahiyê were parastin da ku yekrêziya strukturê biparêze.
Hilberîner herî zêde dişînin peptîd wekî tozek lyophilized. Ev pêvajoya zuwakirina cemidî dema ku avahîya wê ya asîda amînî ya tevlihev diparêze, avê ji berhevokê derdixe. Di rewşek hişk de, pêkhateyên kîmyewî aramiya demdirêj bi dest dixin. Ew dikarin bi hêsanî di guheztinên germahiyê de di dema derbasbûna gerdûnî de bijîn. Bêyî avê, hilweşîna enzîmatîk bi tevahî disekine. Toz razayî û pir bi îstîqrar dimîne heya ku hûn helawek şil bidin nasîn.
Ji nû ve avakirina vê tozê bi rengek rast xetereyên giran ên kîmyewî vedigire. Veavakirina nerast bi lez girêdanên nazik ên ku asîdên amînoyî bi hev re digirin ji holê radike. Dema ku ev girêdan bişkînin, pêkhatî bi tevahî zindîbûna xwe ya biyolojîkî winda dike. Wekî din, teknîka sterîl a nebaş gemarîbûna bakteriyan tîne. Bakterî di hawîrdorên şil de, nemaze çareseriyên bi proteîn de, pêşve diçin. Girtîbûn ne tenê jiyana refikê xera dike, lê di heman demê de ji bo serîlêdanên paşerojê xetereyên ewlehiyê yên giran jî çêdike. Desthilatdariya rast van xetereyan kêm dike û veberhênana we diparêze.
Em ji nû veavakirina serketî bi sê pîvanên cihêreng dipîvin. Pêşî, divê çareseriya dawî bi tevahî zelal be. Ewrbûn keriyên neheliyayî an reaksiyonek kîmyayî nîşan dide. Ya duyemîn, divê hûn ji destpêkê heya dawiyê jîngehek hişk a sterîl biparêzin. Di dawiyê de, pêdivî ye ku pêvajo rêjeyek hûrgelê ya rastîn bide. Heger hûn qebareya çareserkerê xelet hesab bikin, dozkirina rast ne gengaz e.
Hilbijartina diluentê rast biryarek krîtîk e. Şewra ku hûn hildibijêrin diyar dike ka toz çiqas baş dihele û çiqasî çareserî zindî dimîne. Ava bakterîostatîk, bi gelemperî wekî ava BAC tê zanîn, wekî standarda pîşesaziyê kar dike. Ew ji %0,9 benzîl alkol heye. Ev giraniya alkolê ya taybetî bi rengek çalak pêşî li mezinbûna bakteriyan di hundurê şûşeyê de digire. Bi astengkirina bakteriyan, ava BAC heyama rafê ya çareseriyên ji nû ve hatî çêkirin heya 28 rojan dirêj dike. Lekolînwan ji ber taybetmendiyên wê yên parastinê yên pêbawer, hema hema ji bo hemî serîlêdanên laboratîfên gelemperî wê tercîh dikin.
Avê sterîl ji bo derzîlêdanê (SWFI) alternatîfek pêşkêşî dike, lê ew sînorên girîng digire. Berevajî ava BAC, SWFI bê guman parêzvanan nagire. Ji ava paqij û steril pêk tê. Ji ber ku ew alkola benzîl kêm e, divê hûn wê wekî hilberek yek-kar bikar bînin. Ger hûn fîşekek ku di SWFI de ji nû ve hatî çêkirin hilînin, hûn di nav 24 demjimêran de bi xetereyek pir mezin a qirêjiya bakterî re rû bi rû dimînin. Divê hûn tenê SWFI-ê ji bo serîlêdanên yekser, yek-car bikar bînin.
Formulên pir tevlihev an hîdrofobîk pêdivî bi solavên taybetî hene. Hîdrofobîk tê vê wateyê ku zincîra kîmyewî bi rengek çalak avê vedigerîne. Di van rewşan de, ava standard dê kekê tozê hilweşîne. Teknîsyenên laboratîfê rêzika amino asîdên taybetî dinirxînin da ku nêzîkatiya çêtirîn diyar bikin. Ew bi gelemperî Dimethyl Sulfoxide (DMSO) an asîda acetîk a pir rijandin bikar tînin. Van solavên taybetî astengên molekular ên serhişk dişkînin. Dema ku di nav mîqdarek piçûk a DMSO de were hilweşandin, hûn dikarin bi gelemperî tevliheviyê bi karanîna ava standard BAC-ê bêtir hûr bikin.
Tîpa Diluent |
Preservative Included |
Doza Bikaranîna Seretayî |
Jiyana Refê ya texmînkirî |
|---|---|---|---|
Ava Bakteryostatîk (BAC) |
0,9% Benzyl Alkol |
Standard pîşesaziya giştî |
Heta 28 rojan |
Ava Sterîl (SWFI) |
Netû |
Serlêdanên yekser yek-karanîna |
Di bin 24 saetan de |
DMSO / Asîda acetîk |
Li gorî tevliheviyê diguhere |
Zincên hîdrofobîk an tevlihev |
Bi rijandina duyemîn ve girêdayî ye |
Hûn nikarin li ser kalîteya amûreyê tawîz bidin. Komkirina amûrên rast pêvajoyek nerm û sterîl peyda dike. Beriya ku fîşekan bi dest bixin her gav cîhê xebata xwe amade bikin. Cihê bê rêxistin metirsiya gemariyê zêde dike. Piştrast bikin ku we pêdiviyên krîtîk ên jêrîn li ser rûyek paqij amade ne:
Yek şûşeyek peptîdê lyophilized morkirî
Diluentê bijartî (bi gelemperî ava BAC)
Swabên alkolê 70% îzopropîl-pola bijîjkî
Sirincek tevlihevkirinê ya sterîl a Luer-lock (bi gelemperî kapasîteya 3 ml heya 5 ml)
Şirincên pîvandinê yên standard (1ml/100-yekîneyek)
Protokola paqijiya xwe bi şuştina destên xwe bi baldarî dest pê bikin. Destikên pola klînîkî li xwe bikin. Tevahiya rûbera xweya xebatê bi karanîna dezinfektantek paqij bikin. Dûv re, kepçeyên plastîk hem ji şûşeya diluent û hem jî ji şûşeya tozê vekin. Swabek alkolê ya nû hildin û her du bendikên lastîkî bi tundî paqij bikin. Bihêlin ku alkol bi tevahî hewa hişk bibe. Li rawestgehan nefeqin, ji ber ku bêhna mirov bêhejmar bakteriyan hildigire.
Di qonaxa veguheztinê de rastbûn pêşî li zirara molekulê digire. Pêdivî ye ku hûn herikîna şilê bi baldarî kontrol bikin. Van gavên lihevhatî bişopînin da ku karanîna ewle ewle bikin:
Hewaya hawirdorê bikişîne nav sirinca xweya tevlihevkirinê bi qasî qebareya diluentê ku hûn plan dikin ku derxin.
Tîpa şûşeya diluentê qul bikin û hewayê bixin hundur. Ev zextê wekhev dike û kişandina şilê hêsantir dike.
Fîşkeyê bizivirînin û hêjmara tam hesabkirî ya şirînê bikşînin nav şiringa xwe. Derziyê rakin.
Bi baldarî bendika lastîkî ya şûşeya tozê qul bikin.
Bandora valahiya tavilê çareser bikin. Gelek şûşeyên lyophilized valahiya navxweyî ya bihêz dihewîne. Bila ev valahiya şirînê bi xwezayî ji şiringa we derxe.
Herikîna şilekê ber bi dîwarê cama hundurê şûşê ve bişînin. Tu carî şilê rasterast neavêjin ser kekê toza nazik.
Rêvekirina herikê li jêr dîwarê camê qaîdeyek bicîhkirinê ya girîng e. Ew nahêle ku toz bi travmaya laşî ya tundûtûjî re rû bi rû bimîne. Vexwar dê li binî kom bibe û bi nermî tevlêbûna zuwa bihelîne.
Hilberîna xetereyê di qonaxa hilweşandinê de lûtkeyan dike. Divê hûn bi eşkere xwe ji hejandina şûşê dûr bixin. Hejandin stresa rijandinê ya giran tîne. Ew bilbilên hewayê di nav tevliheviyê de dihêle û dikare bi fîzîkî zincîrên asîda amînî ji hev biqetîne. Di şûna wê de, şûşê bi nermî bigirin. Hêdî hêdî di navbera kefa destên xwe de bizivirînin. Wekî din, tevgerek zivirînek pir hêdî, domdar bikar bînin.
Piştî çend hûrdeman zivirîna nerm, kontrolek dîtbarî bikin. Fîşkê li ber çavkaniyek ronahiyê bigire. Divê çareseriya dawîn 100% zelal be. Pêdivî ye ku hûn çu perçeyên herikîn, ewrbûn, an kulîlkên jelatînî nebînin. Ger şilav bi tevahî zelal bimîne, pêvajoya nûavakirinê serketî bû. Naha hûn dikarin li ser hesabkirina pîvanên xwe yên taybetî biçin.
Serwerkirina hesabên berhevdanê xeletiyên xeternak ên dozkirinê ji holê radike. Pêdivî ye ku hûn bi rastî fêm bikin ka çiqas pêkhateya çalak di her milîlîtreya çareseriya weya nû ya tevlihev de heye. Em vê yekê bi karanîna pîvanek nirxandina rasterast diyar dikin. Formula bingehîn hewce dike ku girseya tevayî ya tozê bi hêjeya tevhev a solvan ve dabeş bike.
Formula bingehîn: Tevahiya mg Peptîd / Tevahiya ml ya Diluent = Tevliheviya per ml.
Berî sepandina formulê, hûn hewceyê bingehek veguherînek zexm in. Vîal naveroka xwe bi milîgram (mg) navnîş dikin. Sirinc bi gelemperî dozên bi mîkrogram (mcg) dipîvin. Divê hûn van yekîneyên rast veguherînin. Standarda gerdûnî destnîşan dike ku 1 milîgram dibe 1000 mîkrogram. Veguheztina vê veguheztinê ji bo bîranînê pêşî li xeletiyên pîvandina laboratîfê yên herî gelemperî digire.
Ka em senaryoyek mînakek pratîkî bikolin. Bifikirin ku we şûşeyek heye ku tê de 5 mg toza lyophilized heye. Hûn biryar didin ku wê bi 2 ml ava BAC tevlihev bikin. Sepandina formula bingehîn: 5 mg bi 2 ml ve tê dabeş kirin, her 1 ml 2.5 mg e. Dûv re em encamê diguherînin mîkrogram. 2.5mg bi 1000 zêde bikin. Naha hûn dizanin ku çareseriya we di her milîlîreyekê de 2500mcg pêkhateya çalak dihewîne.
Dûv re, divê hûn vê konsantasyonê bi nîşaneyên sirincê wergerînin. Şîrincek standard a 1 ml ya bi şêwaza însulînê 100 yekîneyên (nîşanên tikandinê) dihewîne. Her yekîneyek 0,01 ml şilek temsîl dike. Heke 1ml 2500mcg digire, em 2500 bi 100 yekîneyên dabeş dikin. Ev tê vê wateyê ku her nîşanek kesane ya li ser sirincê tam 25 mcg ji pêkhateyê vedihewîne. Ger protokola we serîlêdanek 250 mcg hewce dike, hûn ê şilavê heya nîşana 10-yekîneyê bikişînin.
Yekeyên Sîringê (1ml/100U) |
Hêjmara Derketî (ml) |
Doz (5 mg tevlihev di 2 ml de) |
Doz (10 mg tevlihev di 2 ml de) |
|---|---|---|---|
10 yekîneyên |
0,1 ml |
250 mcg |
500 mcg |
20 yekîneyên |
0,2 ml |
500 mcg |
1000 mcg |
50 yekîneyên |
0,5 ml |
1250 mcg |
2500 mcg |
Matematîka destan cîh ji xeletiya mirovî re dihêle. Em bi tundî pêşniyar dikin ku hesabên serhêl ên verastkirî yên ku bi taybetî ji bo van pêkhateyan hatine çêkirin bikar bînin. Mezinahiya şûşeya xwe, qebareya diluent, û mîqdara mîkrograma xwestî binivîsin. Amûr dê jimareya yekîneya tam a hewce derxe. Bikaranîna hesabkerek dîjîtal ji bo du-kontrolkirina matematîkê ya desta xwe nêzîkatiyek ewledar a ji protokolên lêkolînê re xurt dike.
Faktorên jîngehê jiyana refikê destnîşan dikin. Pêdivî ye ku hûn protokolên germahiyê yên hişk bicîh bînin da ku depoya xwe biparêzin. Hilberîna pêş-avakirinê bi dema we ve girêdayî ye. Ji bo hilanîna demdirêj a çend mehan, fîşekên lyophilized di sarincek kûr de li -20°C bihêlin. Ji bo hilanîna kurt a di bin çend hefteyan de, sarincokek standard di 2°C heta 8°C de bêkêmasî dixebite. Lêbelê, qaîdeyên piştî nûavakirinê bi tevahî têne guhertin. Dema ku şil dikeve şûşeyê, divê çareserî bi hişkî di sarincokê de di 2°C heta 8°C de bimîne. Çareseriyên şil necemidin.
Ronahî û oksîdasyon ji bo yekbûna molekular xetereyên mezin çêdike. Ronahiya ultraviyole bi wêne-oksîdasyonê bi lez girêdanên kîmyewî yên tevlihev dişikîne. Divê hûn her gav fîşekan di konteynerên ronahiyê de biparêzin. Heke hûn nebûna konteynirên pispor hene, wan li hawîrdorek bi tevahî tarî, mîna quncika paşîn a doşekek sarincokê hilînin. Di pêvajoya veguheztinê de bi qasî ku gengaz dibe ronahiya jûreya hawîrdorê wan bisînor bikin.
Fêmkirina rastiyên jiyana refikê pêşî li karanîna bêserûber a pêkhateyên hilweşandî digire. Delîlên klînîkî ji bo bidawîbûnê bingehek zelal peyda dike. Zêdeyî peptîdên ku bi karanîna ava BAC ji nû ve têne çêkirin bi qasî 3 heya 4 hefte aramiya pezê diparêzin. Piştî roja 28, benzîl alkol hêza xwe ya parastinê winda dike. Tevlîhev bi xwe dest bi hilweşandinê dike, bi lez bandora xwe winda dike. Her gav fîşekên xwe bi dîroka rast a ji nû ve avabûnê bi nav bikin. Pêdivî ye ku hûn bêyî ku tarîx bin, çareserîyek ku ewrbûn, rengbûn, an perçeyên herikîn nîşan didin tavilê ji holê rakin.
Damezrandina serketî bi tevahî li ser sê stûnên bingehîn ve girêdayî ye: steriliya bêkêmasî, hesabên matematîkî yên rastîn, û destwerdana bêhempa ya nerm. Di yek ji van deveran de têkçûn yekparebûna avahîsaziya pêkhateyê têk dide. Bi têgihîştina bandora valahiya û rêzgirtina şikestiya tozên lyophilized, hûn hem ewlehî û hem jî bandorkeriyê zêde dikin. Hilbijartina diluent bi giranî bandorê li dirêjbûnê dike, ku ava BAC ji bo karanîna dirêjkirî ya laboratîf standardek bêhempa dike.
Pêngavên paşerojê yên weya tavilê kontrolkirina kelûpelên laboratûara weya heyî hene. Her diluent an fîşekên gumanbar ên ku dema wan derbas bûye bavêjin. Çavkaniya ava bakteriostatîkî ya kalîteya bilind, ya sêyemîn ji firoşkarên navdar. Di dawiyê de, berî ku hûn bi protokolên nû yên tevlihevkirinê re tevbigerin, amûrên pîvandinê yên rast û hesabkerên dîjîtal bikar bînin. Amadekirina rast her carê encamên pêbawer, dubarekirî garantî dike.
A: Ewrbûn bi gelemperî hilweşîna bêkêmasî, hilbijartina nerast a diluent, an qalîteya têkçûyî nîşan dide. Avahiyên hîdrofobîk bi gelemperî ava standard red dikin û dibin şîr. Alternatîf, guheztinên giran ên germahiyê di dema barkirinê de dibe ku zirarê bide tozê. Ger zivirîna nerm piştî sîh hûrdeman şilê paqij neke, şûşê bi tevahî bavêje. Çareseriyên cloudy ji bo serîlêdanê nebawer û ne ewle ne.
A: Na. Divê hûn bi hişkî xwe ji cemidandina çareseriyên şilî dûr bixin. Çêleka cemidî-germkirinê dibe sedem ku molekulên avê bi tundî berbelav bibin û girêbidin. Ev berfirehbûna fizîkî krîstalên qeşayê yên mîkroskopî çêdike. Van krîstal girêdanên asîda amînî yên nazik diherikînin, û dibin sedema zirara strukturî ya giran. Her dem fîşekên ji nû ve hatî çêkirin di nav 36°F û 46°F de di sarincê de bihêlin.
A: Hejdan stresa şiddetê vedike û dibe sedema kefbûna bilez di hundurê şûşeyê de. Ev travmaya mekanîkî dikare girêdanên proteîn hilweşîne, ku bibe sedema windabûna domdar a bandorbûnê. Ger hûn bi xeletî wê bihejînin, tavilê şûşeyê têxin sarincê. Bila 24 saetan bêçare bimîne. Di dema nirxandinên we de windabûna bandoriya potansiyel binihêrin.
A: Li gorî rêwerzên klînîkî yên standard, ava bakteriostatîkî 28 rojan piştî qulandinê ewle dimîne. 0,9% alkola benzîl bi demê re li ser rûdana hewa û gemarên hawîrdorê hilweşe. Piştî çar hefteyan, ew êdî nikare pêşîlêgirtina mezinbûna bakteriyan garantî bike. Her gav di roja 29-an de ava BAC-a vekirî biavêjin.
