Lyophilized, na maina mangatsiaka, Ny peptides dia mila fanavaozana tena marina mba hiasa tsara. Ny fikarakarana tsy araka ny tokony ho izy dia matetika mitarika ho amin'ny fahasimbana haingana, fahaverezan'ny fahombiazana tanteraka ary fampiasam-bola very maina amin'ny fitaovana sarobidy. Ny famerenana indray dia dingana tena ilaina amin'ny fampidirana ranon-javatra mandoro amin'ny vovoka maina mba hamoronana vahaolana azo antoka sy azo ampiasaina. Ity dingana ity dia mamehy ny elanelana misy eo amin'ireo rafitra simika matory sy ireo singa biolojika mavitrika. Raha maimaika ity protocol ity ianao na mampiasa solvent diso, dia mety hanimba tanteraka ny fatorana molekiola marefo alohan'ny hahatongavany amin'ny dingana fitsapana. Ao amin'ity torolàlana feno ity dia hianatra ireo protocole manara-penitra marina ianao amin'ny fampifangaroana sy fitehirizana ireo fitambarana ireo mba hanamafisana ny faharetany. Manarona ny zava-drehetra izahay manomboka amin'ny fisafidianana diluent sy ny fanomanana sterile ka hatramin'ny kajy fatrany marina. Disclaimer: Ny protocols voalaza etsy ambany dia natao ho an'ny fanabeazana, fikarohana, na tanjona fampiharana amin'ny laboratoara.
Fizahan-takelaka
Tsy azo ifampiraharahana ny tsy fahampian-tsakafo: Misoroka ny fandotoana sy ny fitomboan'ny bakteria ny fampiharana ny fanomanana sterile kilasy klinika.
Ny fifantenana diluent dia mamaritra ny fahafaha-miaina: Ny rano bacteriostatic no fenitra, fa ny mombamomba ny peptide manokana (hydrophilic vs. hydrophobic) dia mety mitaky rano maloto, asidra acetika, na DMSO.
Fragility mekanika: Ny peptides dia mora mora amin'ny fihenjanana; aza manozongozona ny vial. Mihodikodina moramora mba hitahiry ny fatorana molekiola.
Fitehirizana rojo mangatsiaka: Rehefa vita indray ny peptides dia tsy maintsy tazonina ao anaty vata fampangatsiahana (matetika 36 ° F hatramin'ny 46 ° F) ary arovan'ny hazavana mba hihazonana ny fahamendrehana ara-drafitra.
Ny mpanamboatra dia mandefa ny ankamaroany peptides toy ny vovoka lyophilized. Ity dingana fanamainana mangatsiaka ity dia manala ny rano ao amin'ilay fitambarana sady mitahiry ny firafitry ny asidra amine sarotra. Amin'ny toe-javatra maina, ny fitambarana simika dia mahatratra fitoniana maharitra. Afaka miaina mora foana amin'ny fiovaovan'ny maripana izy ireo mandritra ny fitaterana eran-tany. Raha tsy misy rano dia mijanona tanteraka ny fahasimban'ny enzymatic. Ny vovony dia mijanona ho matory ary tena marin-toerana mandra-pidiranao solvent iray.
Ny tsy fandrafetana tsara an'io vovoka io dia miteraka risika simika mahery vaika. Ny fanamboarana tsy mety dia mamadika haingana ny fatorana marefo mampiray ny asidra amino. Rehefa tapaka ireo fatorana ireo dia very tanteraka ny maha-biolojika azy. Ankoatr'izay, ny teknika tsy misy sterile dia mampiditra fandotoana bakteria. Ny bakteria dia miroborobo amin'ny tontolo misy rano, indrindra fa ny vahaolana manankarena proteinina. Ny fandotoana dia tsy vitan'ny hoe manimba ny androm-piainan'ny talantalana fa mampidi-doza ho an'ny fiarovana amin'ny fampiharana manaraka. Ny fikarakarana tsara dia manamaivana ireo loza ireo ary miaro ny fampiasam-bola.
Mandrefy ny famerenana amin'ny laoniny mahomby isika amin'ny fampiasana fepetra telo miavaka. Voalohany, ny vahaolana farany dia tsy maintsy mazava tsara. Ny rahona dia manondro poti-javatra tsy levona na fanehoan-kevitra simika. Faharoa, tsy maintsy mitazona tontolo iainana tsy misy dikany ianao hatramin'ny voalohany ka hatramin'ny farany. Farany, ny fomba fiasa dia tsy maintsy manome ny tahan'ny fifantohana marina. Tsy azo atao ny fatrany marina raha diso kajy ny habetsahan'ny solvent ianao.
Fanapahan-kevitra manan-danja ny fisafidianana ny diluent marina. Ny solvent nofidinao no mamaritra hoe hatraiza ny famongorana ny vovoka sy ny faharetan'ny vahaolana. Ny rano bakteria, fantatra amin'ny anarana hoe rano BAC, no fenitra indostrialy. Misy 0,9% benzyl alcohol. Ity fatran'ny alikaola manokana ity dia manakana ny fitomboan'ny bakteria ao anaty vial. Amin'ny alàlan'ny fanakanana ny bakteria, ny rano BAC dia manitatra ny androm-piainan'ny vahaolana averina hatramin'ny 28 andro. Tian'ny mpikaroka ho an'ny fampiharana amin'ny laboratoara amin'ny ankapobeny izy io noho ny toetra azo antoka azo antoka.
Ny rano sterile ho an'ny tsindrona (SWFI) dia manolotra safidy hafa, saingy misy fetrany. Tsy toy ny rano BAC, ny SWFI dia tsy misy preservative mihitsy. Izy io dia ahitana rano madio sy sterile. Satria tsy misy alikaola benzyl, dia tsy maintsy ampiasaina ho toy ny diluent ampiasaina tokana. Raha mitahiry vial namboarina ao amin'ny SWFI ianao, dia atahorana ho voan'ny bakteria ao anatin'ny 24 ora. Tokony hampiasa SWFI ho an'ny fampiharana eo no ho eo indray mandeha ianao.
Ny formulas complex na hydrophobic dia mila solvents manokana. Ny hydrophobic dia midika fa ny rojo simika dia mamindra ny rano. Amin'ireny tranga ireny, ny rano mahazatra dia tsy handrava ny mofomamy vovoka. Ny teknisianina laboratoara dia manombana ny filaharan'ny asidra amino manokana mba hamaritana ny fomba fiasa tsara indrindra. Matetika izy ireo dia mampiasa Dimethyl Sulfoxide (DMSO) na asidra acetika be dia be. Ireo solvents manokana ireo dia manimba ny sakana molekiola mafy loha. Rehefa levona ao anaty DMSO kely dia azonao atao ny manalefaka ny fangaro amin'ny alàlan'ny rano BAC mahazatra.
Karazana diluent |
Anisan'izany ny preservative |
Fampiasana voalohany |
Tombanana ny fiainana talantalana |
|---|---|---|---|
Rano bakteria (BAC) |
0,9% Benzyl Alcohol |
Fenitry ny indostria ankapobeny |
Hatramin'ny 28 andro |
Rano sterile (SWFI) |
tsy misy |
Fampiharana avy hatrany ampiasaina tokana |
Latsaky ny 24 ora |
DMSO / asidra asidra |
Miovaova arakaraka ny fangaro |
Hydrophobic na rojo sarotra |
Miankina amin'ny dilution faharoa |
Tsy afaka mandefitra ny kalitaon'ny fitaovana ianao. Ny fanangonana ny fitaovana marina dia miantoka ny fandehanana milamina sy tsy misy dikany. Omano foana ny toeram-piasanao alohan'ny hikarakarana ny vials. Ny toerana tsy voalamina dia mampitombo ny mety hisian'ny loto. Ataovy azo antoka fa efa vonona amin'ny tany madio ireto fitaovana ilaina ireto:
Vial peptide lyophilized iray voaisy tombo-kase
Ny diluent nofidinao (rano BAC matetika)
Fitsaboana ara-pahasalamana 70% isopropyl alcohol swab
Syringe fampifangaroana Luer-lock (matetika 3ml hatramin'ny 5ml)
Syringe fandrefesana mahazatra (1ml/100-unit)
Atombohy amin'ny fanasan-tànana tsara ny protocole fidiovana. Manaova fonon-tanana ara-pitsaboana. Fafao ny faritra miasa manontolo amin'ny fampiasana otrikaretina. Aorian'izay, esory ny satroka plastika avy amin'ny vial diluent sy ny vial vovoka. Makà swab toaka vaovao ary fafao mafy ny fingotra fingotra roa. Avela ho maina tanteraka ny alikaola. Aza mitsoka ny fanakanana, satria mitondra bakteria tsy tambo isaina ny fofon'olombelona.
Misoroka ny fahasimban'ny molekiola ny fahitsiana mandritra ny dingana famindrana. Tsy maintsy mifehy tsara ny fikorianan'ny ranon-javatra ianao. Araho ireto dingana manaraka ireto mba hiantohana ny fikarakarana azo antoka:
Sariho ny rivotra manodidina ao anatin'ny syringe fangaronao mitovy amin'ny habetsahan'ny diluent kasainao alaina.
Atsipazo ny fitoeran'ny vial diluent ary atosika ny rivotra ao anatiny. Mampitovy ny tsindry izany ary manamora ny fisarihana ilay ranon-javatra.
Avereno ny vial ary alaivo ao amin'ny syringe ny habetsahan'ny rano kajy marina. Esory ny fanjaitra.
Tsofy am-pitandremana ny fingotra fingotra amin'ny tavoahangy vovoka.
Alefaso avy hatrany ny vokatry ny banga. Ny vials lyophilized maro dia misy banga anatiny matanjaka. Avelao io banga io hisintona ho azy ny ranon-javatra avy amin'ny syringe anao.
Ampitahao amin'ny rindrin'ny fitaratra ao anaty vial ny ranon-javatra. Aza tifirina mivantana eo amin'ilay mofomamy vovoka marefo ilay ranoka.
Ny fitarihana ny renirano midina amin'ny rindrina fitaratra dia fitsipika fampiharana tena ilaina. Izy io dia manakana ny vovoka tsy hiaina trauma ara-batana mahery vaika. Ny solvent dia hiangona eny amin'ny farany ambany ary hitroka moramora ilay fitambarana maina.
Ny fiatrehana ny tampon'ny risika mandritra ny dingan'ny fandravana. Tsy maintsy misoroka mazava ny fanozongozonana ny vial ianao. Ny fihozongozonana dia miteraka adin-tsaina mahery vaika. Manery rivotra miboiboika hiditra ao anatin'ilay fangaro izy io ary afaka manapaka ara-batana ny rojo asidra amino. Tazony moramora kosa ilay vial. Ahodino moramora eo anelanelan’ny felatananao. Raha tsy izany, ampiasao ny fihetsika mihodinkodina miadana be.
Aorian'ny minitra vitsivitsy mihodinkodina malefaka dia manaova fanaraha-maso maso. Tazony hatrany amin'ny loharano maivana ilay vial. Ny vahaolana farany dia tokony ho mangarahara 100%. Tsy tokony hahita zavatra mitsingevana, rahona, na gelatinous clumps ianao. Raha mbola madio tanteraka ny ranon-javatra, dia nahomby ny dingana fanarenana. Azonao atao izao ny miroso amin'ny kajy ny fandrefesanao manokana.
Ny fifehezana ny kajy fifantohana dia manafoana ny fahadisoana mampidi-doza amin'ny fatra. Tokony ho azonao tsara hoe ohatrinona ny fitambarana mavitrika misy ao anatin'ny milliliter ny vahaolana vao nafangaronao. Famaritanay izany amin'ny fampiasana refy fanombanana mahitsy. Ny raikipohy fototra dia mitaky ny fizarana ny totalin'ny vovony amin'ny totalin'ny solvent.
The Core Formula: Total mg of Peptide / Total ml of Diluent = Concentration isaky ny ml.
Alohan'ny hampiharana ny formula dia mila fototra fiovam-po mafy ianao. Ny vials dia mitanisa ny ao anatiny ao anaty miligrama (mg). Matetika ny syringe dia mandrefy fatra amin'ny micrograms (mcg). Tsy maintsy mamadika marina ireo singa ireo ianao. Ny fenitra iraisam-pirenena dia milaza fa ny 1 miligrama dia mitovy amin'ny 1000 micrograms. Ny fanaovana io fiovam-po ho fahatsiarovana io dia manakana ny fahadisoana fandrefesana mahazatra indrindra amin'ny laboratoara.
Andeha isika handinika ohatra azo ampiharina. Alaivo sary an-tsaina hoe manana vial misy vovoka lyophilized 5mg ianao. Manapa-kevitra ny hampifangaro azy amin'ny fampiasana rano BAC 2ml ianao. Fampiharana ny raikipohy fototra: 5mg zaraina amin'ny 2ml mitovy amin'ny 2.5mg isaky ny 1ml. Avy eo dia mamadika ny vokatra ho micrograms izahay. Ampitomboy ny 2.5mg amin'ny 1000. Fantatrao izao fa misy 2500mcg of active compound isaky ny milliliter ny vahaolana anananao.
Avy eo, tsy maintsy adikao amin'ny mari-pamantarana syringe io fifantohana io. Ny syringe 1ml mahazatra amin'ny insuline dia misy singa 100 (marika marika). Ny singa tsirairay dia maneho rano 0.01ml. Raha manana 2500mcg ny 1ml dia mizara 2500 amin'ny singa 100 isika. Midika izany fa misy marika 25mcg amin'ny fitambarana ny marika tsirairay amin'ny syringe. Raha mitaky fampiharana 250mcg ny protocol anao dia azonao atao ny misintona ilay ranoka ho amin'ny marika 10.
Fitaovan'ny Syringe (1ml/100U) |
Vola nalaina (ml) |
Dose (5mg mifangaro amin'ny 2ml) |
Dose (10mg mifangaro amin'ny 2ml) |
|---|---|---|---|
10 Units |
0,1 ml |
250 mcg |
500 mcg |
20 Units |
0,2 ml |
500 mcg |
1000 mcg |
50 Units |
0,5 ml |
1250 mcg |
2500 mcg |
Ny matematika manual dia mamela toerana ho an'ny fahadisoan'ny olombelona. Manoro hevitra mafy izahay hampiasa kajy an-tserasera azo hamarinina natao manokana ho an'ireo fitambarana ireo. Ampidiro ny haben'ny vial, ny habetsahan'ny diluent ary ny habetsaky ny microgram tianao. Ny fitaovana dia hamoaka ny isan'ny singa tena ilaina. Ny fampiasana kajy dizitaly hanamarinana indroa ny matematika an-tananao dia manamafy ny fomba tsy mahomby amin'ny protocols fikarohana.
Ny antony ara-tontolo iainana no mibaiko ny faharetan'ny fitahirizana. Tsy maintsy mampihatra ireo protocoles henjana momba ny mari-pana ianao mba hiarovana ny rakitrao. Ny fitehirizana mialoha ny fanamboarana dia miankina amin'ny fandaharam-potoananao. Ho an'ny fitehirizana maharitra mandritra ny volana maromaro, tehirizo ao anaty vata fampangatsiahana lalina amin'ny -20°C ny vials lyophilized. Ho an'ny fitehirizana fohy ao anatin'ny herinandro vitsivitsy, ny vata fampangatsiahana mahazatra amin'ny 2 ° C hatramin'ny 8 ° C dia miasa tsara. Na izany aza, miova tanteraka ny fitsipika taorian'ny fanavaozana. Rehefa tafiditra ao anaty vial ny ranon-javatra, dia tsy maintsy mijanona ao anaty vata fampangatsiahana amin'ny 2°C hatramin'ny 8°C ny vahaolana. Aza atao mangatsiatsiaka vahaolana ranoka.
Ny hazavana sy ny oxidation dia miteraka risika goavana amin'ny fahamendrehan'ny molekiola. Ny taratra ultraviolet dia manimba haingana ny fatorana simika sarotra amin'ny alàlan'ny photo-oxidation. Tokony hotehirizina ao anaty fitoeran-jiro tsy misy hazavana foana ny vials. Raha tsy ampy kaontenera manokana ianao dia tehirizo ao anaty tontolo maizina tanteraka, toy ny zoro aoriana amin'ny vata fampangatsiahana. Fehezo araka izay azo atao ny fiparitahan'izy ireo amin'ny hazavana ao amin'ny efitrano mandritra ny famindrana.
Ny fahatakarana ny zava-misy iainan'ny talantalana dia manakana ny fampiasana tsy nahy ireo kapoaky ny simba. Ny porofo klinika dia manome fototra mazava ho an'ny lany daty. TENA Ny peptides naverina tamin'ny fampiasana rano BAC dia mitazona ny fitoniana faratampony mandritra ny 3 ka hatramin'ny 4 herinandro. Aorian'ny andro faha-28 dia very ny hery fiarovana ny alikaola benzyl. Manomboka rava ilay fitambarana, ary very haingana ny heriny. Asio anarana foana ny vilianao miaraka amin'ny daty marina hamerenana azy. Tsy maintsy arianao avy hatrany izay vahaolana maneho ny rahona, ny fiovan'ny loko, na ny singa mitsingevana, na inona na inona daty.
Miankina tanteraka amin'ny andry telo fototra ny fanarenana mahomby: ny tsy fahampiana tanteraka, ny kajikajy matematika marina ary ny fikarakarana malefaka. Ny tsy fahombiazana amin'ny iray amin'ireo faritra ireo dia mampandefitra ny fahamendrehan'ny rafitra. Amin'ny fahatakarana ny fiantraikan'ny banga sy ny fanajana ny faharefoan'ny vovoka lyophilized, dia mampitombo ny fiarovana sy ny fahombiazany ianao. Ny safidy diluent dia misy fiantraikany lehibe amin'ny faharetan'ny fiainana, mahatonga ny rano BAC ho fenitra tsy iadian-kevitra amin'ny fampiasana laboratoara maharitra.
Ny dingana manaraka avy hatrany dia ny fanaraha-maso ny kojakoja laboratoara misy anao ankehitriny. Ario izay diluent lany daty na vials mampiahiahy. Loharano rano bacteriostatic voasedra amin'ny kalitao avo lenta avy amin'ny mpivarotra malaza. Farany, ampiasao fitaovana fandrefesana marina sy kajy nomerika alohan'ny hirosoana amin'ny protocole fampifangaroana vaovao. Ny fanomanana araka ny tokony ho izy dia miantoka vokatra azo antoka sy azo averina isaky ny mandeha.
A: Ny rahona matetika dia manondro ny tsy fahatomombanana tanteraka, ny fifantenana ny diluent diso, na ny kalitaon'ny simba. Ny rafitra hydrophobic matetika dia mandà ny rano mahazatra ary mivadika ho ronono. Raha tsy izany, ny fiovaovan'ny mari-pana mafy nandritra ny fandefasana dia mety nanimba ny vovoka. Raha toa ka tsy manala ny ranon-javatra rehefa afaka telopolo minitra ny fanodinkodinana malefaka dia ario tanteraka ny vial. Ny vahaolana rahona dia tsy azo vinaniana ary tsy azo antoka ho an'ny fampiharana.
A: Tsia. Tokony hiala amin'ny vahaolana mangatsiaka mangatsiaka ianao. Ny tsingerin'ny fampangatsiahana dia mahatonga ny molekiolan'ny rano hivelatra sy hihena. Ity fanitarana ara-batana ity dia mamorona kristaly ranomandry mikroskopika. Ireo kristaly ireo dia manety ny fatorana asidra amine marefo, ka miteraka fahasimbana goavana. Tehirizo foana ao anaty vata fampangatsiahana eo anelanelan'ny 36°F sy 46°F ny vilia efa namboarina.
A: Ny fihozongozonana dia mampiditra tsindrin-tsofina mahery vaika ary miteraka vinaingitra haingana ao anaty vial. Ity trauma mekanika ity dia afaka manafoana ny fatorana proteinina, mitarika amin'ny fahaverezan'ny fahombiazany. Raha tsy nahy ianao dia apetraho ao anaty vata fampangatsiahana avy hatrany ny vial. Avela hipetraka tsy hikorontana mandritra ny 24 ora. Mariho ny mety ho fahaverezan'ny fahombiazana mandritra ny fanombanana.
A: Araka ny torolalana ara-pitsaboana mahazatra, ny rano bacteriostatic dia mijanona ho azo antoka mandritra ny 28 andro aorian'ny fanindronana. Ny alikaola benzyl 0,9% dia mihasimba rehefa mandeha ny fotoana rehefa tratran'ny rivotra sy ny loto manodidina. Rehefa afaka efatra herinandro, dia tsy afaka miantoka intsony ny fisorohana ny fitomboan'ny bakteria. Ario foana ny rano BAC misokatra amin'ny andro faha-29.