Lyophilized, ma ọ bụ akpọnwụwo, peptides chọrọ nhazigharị ziri ezi nke ukwuu iji rụọ ọrụ nke ọma. Ijikwa na-ezighi ezi na-ebutekarị nbibi ngwa ngwa, na-efunahụ arụmọrụ zuru oke, na itinye ego n'iyi na ihe bara uru. Nhazigharị bụ usoro dị mkpa nke ịgbakwụnye mmiri mmiri na-ekpo ọkụ na ntụ ntụ iji mepụta ngwọta kwụsiri ike, nke a na-eji eme ihe. Nzọụkwụ a na-eme ka ọdịiche dị n'etiti ihe owuwu kemịkal na-ehi ụra na ogige ihe ndị dị ndụ na-arụ ọrụ. Ọ bụrụ na ị na-eme ngwa ngwa usoro a ma ọ bụ jiri ihe mgbaze na-ezighi ezi, ị nwere ike ibibi agbụ molekụla siri ike kpamkpam tupu ha erute n'oge ule. N'ime ntuziaka a zuru oke, ị ga-amụta usoro ụkpụrụ ahaziri ahazi maka ịgwakọta na ịchekwa ogige ndị a n'enweghị nsogbu iji bulie ogologo ndụ ha. Anyị na-ekpuchi ihe niile site na nhọrọ diluent na nkwadebe adịghị mma ruo ngụkọ dosing ziri ezi. Disclaimer: Protocol edepụtara n'okpuru bụ nke ọma maka ebumnuche nkuzi, nyocha ma ọ bụ naanị ebumnuche ụlọ nyocha edepụtara.
Tebulu ọdịnaya
A naghị akparịta ụka gbasara ịmụ nwa: Ime ihe nrịbama ọkwa ụlọ ọgwụ na-egbochi mmetọ na uto nje.
Nhọrọ diluent na-egosi ịdị mma: Mmiri mmiri bacteriostatic bụ ọkọlọtọ, mana profaịlụ peptide kpọmkwem (hydrophilic vs. hydrophobic) nwere ike ịchọ mmiri na-adịghị mma, acetic acid, ma ọ bụ DMSO.
Mechanical fragility: Peptides na-enwe mmetụta maka nrụgide shiee; emela ka ọ maa jijiji ahụ. Mee nwayọọ nwayọọ iji chekwaa njikọ molekụla.
Nchekwa yinye oyi: Ozugbo emezigharịrị, a ga-edobe peptides n'ime friji (nke na-adịkarị 36°F ruo 46°F) ma chebe ya pụọ na ìhè iji nọgide na-eguzosi ike n'ezi ihe.
Ndị nrụpụta ụgbọ mmiri kacha peptides dị ka ntụ ntụ lyophilized. Usoro ịkpọ nkụ a na-ewepụ mmiri n'ime ogige ahụ ma na-echekwa usoro amino acid dị mgbagwoju anya ya. N'ọnọdụ akọrọ, ogige kemịkalụ na-enweta nkwụsi ike ogologo oge. Ha nwere ike ịlanarị ngbanwe ọnọdụ okpomọkụ n'oge njem zuru ụwa ọnụ. Enweghị mmiri, mmebi nke enzymatic na-akwụsị kpamkpam. Ntụ ntụ na-anọgide na-ehi ụra ma kwụsie ike ruo mgbe ị webatara ihe mgbaze mmiri mmiri.
Ịghara ịmegharị ntụ ntụ a n'ụzọ ziri ezi na-ebu nnukwu ihe egwu kemịkal. Nhazigharị na-ezighi ezi ngwa ngwa na-ewepụ njikọ ndị na-emebi emebi na-ejikọta amino acid ọnụ. Mgbe agbụ ndị a mebiri, ogige ahụ na-efunahụ ike ndụ ya kpamkpam. Ọzọkwa, usoro ọgwụgwọ adịghị mma na-ebute nje bacteria. Bakteria na-eto eto na gburugburu mmiri mmiri, ọkachasị ihe ngwọta nwere protein. Ọbụghị naanị mmetọ na-emebi ndụ nchekwa mana ọ na-ebutekwa nnukwu ihe egwu nchekwa maka ngwa ọ bụla na-esote. Ijikwa nke ọma na-ebelata ihe egwu ndị a ma na-echebe itinye ego gị.
Anyị na-eji njirisi atọ dị iche tụọ nrụzigharị nke ọma. Nke mbụ, ngwọta ikpeazụ ga-abụrịrị nke doro anya. Igwe ojii na-egosi ụmụ irighiri ihe agbazebeghị ma ọ bụ mmeghachi omume kemịkal. Nke abụọ, ị ga-edoberịrị ebe na-adịghị mma site na mmalite ruo n'isi. N'ikpeazụ, usoro a ga-enwerịrị oke ntinye uche ziri ezi. Usoro ọgwụgwọ ziri ezi agaghị ekwe omume ma ọ bụrụ na ị gụgharịa olu mgbaze.
Ịhọrọ diluent ziri ezi bụ mkpebi siri ike. Ihe mgbaze ị na-ahọrọ na-ekpebi otú ntụ ntụ si agbaze nke ọma na ogologo oge ngwọta ahụ ga-adịgide. Mmiri bacteriostatic, nke a na-akpọkarị mmiri BAC, na-eje ozi dị ka ọkọlọtọ ụlọ ọrụ. Ọ nwere 0.9% mmanya benzyl. Ntinye mmanya a kapịrị ọnụ na-egbochi uto nje n'ime vial. Site n'igbochi nje bacteria, mmiri BAC na-agbatị ndụ nchekwa nke ngwọta edozigharịrị ruo ụbọchị 28. Ndị na-eme nchọpụta na-ahọrọ ya maka ihe fọrọ nke nta ka ọ bụrụ ngwa ụlọ nyocha n'ozuzu n'ihi àgwà nchekwa ya a pụrụ ịdabere na ya.
Mmiri Sterile maka Injection (SWFI) na-enye ụzọ ọzọ, mana ọ nwere oke oke. N'adịghị ka mmiri BAC, SWFI enweghị ihe nchekwa. Ọ nwere mmiri dị ọcha, nke na-adịghị ọcha. N'ihi na ọ nweghị mmanya benzyl, ị ga-eji ya dị ka ihe mgbaze na-eme otu ihe. Ọ bụrụ na ị na-echekwa vial arụgharịrị na SWFI, ị ga-enwe nnukwu ihe ize ndụ nke nje nje n'ime awa 24. Ị ga-eji SWFI naanị maka ngwa ozugbo, otu oge.
Usoro dị mgbagwoju anya ma ọ bụ hydrophobic chọrọ ihe mgbaze pụrụ iche. Hydrophobic pụtara kemịkalụ yinye na-achugharị mmiri nke ọma. N'okwu ndị a, mmiri ọkọlọtọ agaghị agbaze achicha ntụ ntụ. Ndị na-ahụ maka ụlọ nyocha na-enyocha usoro amino acid dị iche iche iji chọpụta ụzọ kacha mma. Ha na-ejikarị Dimethyl Sulfoxide (DMSO) ma ọ bụ acetic acid diluted nke ukwuu. Ihe mgbaze ndị a pụrụ iche na-akụda ihe mgbochi molekụla ndị isi ike. Ozugbo agbazere n'ime obere DMSO, ị nwere ike na-emegharị ngwakọta ahụ n'ihu site na iji mmiri BAC ọkọlọtọ.
Ụdị ihe mgbaze |
Ihe nchekwa gụnyere |
Akpa ojiji nke izizi |
Ndụ shelf echere |
|---|---|---|---|
Mmiri Bacteriostatic (BAC) |
0.9% mmanya mmanya benzyl |
Ụkpụrụ ụlọ ọrụ izugbe |
Ruo ụbọchị 28 |
Mmiri na-adịghị mma (SWFI) |
Ọ dịghị |
Ngwa ngwa ngwa eji otu otu |
N'okpuru awa 24 |
DMSO / acetic acid |
Na-adịgasị iche site na ngwakọta |
Hydrophobic ma ọ bụ agbụ siri ike |
Na-adabere na dilution nke abụọ |
Ị nweghị ike imebi àgwà akụrụngwa. Ịchịkọta ngwaọrụ ndị ziri ezi na-eme ka usoro dị nro, adịghị mma. Kwadebe ebe ọrụ gị mgbe niile tupu ijikwa vial. Oghere adịghị ahazi na-abawanye ohere nke mmetọ. Gbaa mbọ hụ na ị nwere ihe ndị a dị mkpa dị njikere n'elu elu dị ọcha:
Otu vial peptide lyophilized mechiri emechi
Ihe mgbaze ị họọrọ (nke bụ mmiri BAC)
Medical-ọkwa 70% isopropyl mmanya swabs
sirinji na-agwakọta mkpọchi Luer na-adịghị ọcha (na-abụkarị ikike 3ml ruo 5ml)
sirinji nha ọkọlọtọ (1ml/100-unit)
Malite ụkpụrụ ịdị ọcha gị site n'ịsacha aka gị nke ọma. Tinye na ụlọ ọgwụ-ọkwa gloves. Jiri ọgwụ na-egbu egbu hichapụ elu gị niile na-arụ ọrụ. Na-esote, gbapụ okpu plastik na ma vial diluent na vial ntụ ntụ. Were mmanya mmanya ọhụrụ wee hichapụ ihe mgbochi rọba abụọ ahụ nke ọma. Kwe ka mmanya na-aba n'anya kpochaa kpamkpam. Afụla ihe nkwụsị, n'ihi na ume mmadụ na-ebu nje bacteria na-enweghị atụ.
Nkenkenke n'oge oge mbufe na-egbochi mmebi molekụla. Ị ga-ejikwa nke ọma chịkwaa mmiri na-asọ. Soro usoro ndị a dị n'usoro iji hụ na njikwa adịghị mma:
Dụnye ikuku gburugburu n'ime sirinji agwakọta gị nha nha nha nke mmiri ọgwụ ị na-eme atụmatụ iwepụta.
Gbuo ihe mgbochi vial diluent wee kwaba ikuku n'ime. Nke a na-eme ka nrụgide na-eme ka ọ dị mfe ịbịaru mmiri mmiri.
Tụgharịa vial ahụ wee see kpọmkwem olu mmiri mmiri gbakọrọ n'ime sirinji gị. Wepu agịga ahụ.
Jiri nlezianya dụpuo ihe mgbochi rọba nke vial ntụ ntụ.
Gwa mmetụta agụụ ozugbo. Ọtụtụ vial lyophilized nwere oghere dị n'ime siri ike. Mee ka oghere a dọpụta mmiri mmiri na sirinji gị nke ọma.
Dezie iyi mmiri na-aga n'ihu mgbidi iko dị n'ime nke vial ahụ. Agbapụla mmiri mmiri ozugbo na achicha ntụ ntụ na-emebi emebi.
Iduzi iyi na ala mgbidi iko bụ iwu mmejuputa iwu dị oke mkpa. Ọ na-egbochi ntụ ntụ na-enwe mmerụ anụ ahụ na-eme ihe ike. Ihe mgbaze ahụ ga-egwu mmiri na ala ma jiri nwayọọ banye ngwakọta akọrọ.
Ijikwa ọnụ ahịa ihe egwu n'oge oge mgbasa. Ị ga-ezere ịma jijiji vial nke ọma. Ịma jijiji na-ewebata nrụgide siri ike nke shiee. Ọ na-amanye ikuku ikuku n'ime ngwakọta ma nwee ike ịdọwa agbụ amino acid n'anụ ahụ. Kama, jide vial ahụ nke ọma. Bugharịa ya nwayọọ nwayọọ n'etiti ọbụ aka gị. N'aka nke ọzọ, jiri nwayọ nwayọ, na-efegharị na-aga n'ihu.
Mgbe nkeji ole na ole nke iji nwayọọ nwayọọ megharịa, mee nlele anya. Jido vial ahụ ka ọ bụrụ ìhè. Ngwọta ikpeazụ kwesịrị ịbụ 100% uzo. I kwesịghị ịhụ ihe na-ese n'elu mmiri, ígwé ojii, ma ọ bụ mkpọ gelatinous. Ọ bụrụ na mmiri mmiri na-anọgide na-apụ apụ kpamkpam, usoro nhazigharị ahụ gara nke ọma. Ị nwere ike ịga n'ihu na ịgbakọ nha gị kpọmkwem.
Ịme mgbakọ ịta ahụhụ na-ewepụ njehie dosing dị ize ndụ. Ị ga-aghọta nke ọma ole ngwakọta na-arụ ọrụ dị na milliliter ọ bụla nke ngwọta agwakọta ọhụrụ gị. Anyị na-ekpebi nke a site na iji nha nleba anya kwụ ọtọ. Usoro bụ isi na-achọ ikewa mkpokọta ntụ ntụ site na mkpokọta ihe mgbaze.
Usoro Isi: Ngụkọta mg nke Peptide / Mkpokọta ml nke ihe mgbaze = Ntinye n'otu ml.
Tupu itinye usoro a, ị ga-achọ usoro ntụgharị siri ike. Mpempe akwụkwọ na-edepụta ọdịnaya ha na milligrams (mg). Syringes na-atụkarị dose na micrograms (mcg). Ị ga-atụgharịrịrị nkeji ndị a nke ọma. Ụkpụrụ zuru ụwa ọnụ na-ekwu na 1 milligram hà nhata 1000 micrograms. Ime mgbanwe a na ebe nchekwa na-egbochi mperi nha ụlọ nyocha a na-ahụkarị.
Ka anyị nyochaa ihe atụ bara uru. Were ya na ị nwere vial nwere 5mg nke ntụ ntụ lyophilized. Ị kpebie iji 2ml nke mmiri BAC gwakọta ya. Itinye usoro isi ihe: 5mg kewara site na 2ml ha nhata 2.5mg kwa 1ml. Anyị na-atụgharị nsonaazụ ka ọ bụrụ microgram. Ịba ụba 2.5mg site na 1000. Ị mara ugbu a ngwọta gị nwere 2500mcg nke ihe na-arụ ọrụ n'ime otu milliliter ọ bụla.
Na-esote, ị ga-atụgharịrịrị ntụgharị uche a ka ọ bụrụ akara akọrọ sirinji. Ọkọlọtọ sirinji ụdị insulin 1ml nwere nkeji 100 (akara akara). Nke ọ bụla na-anọchi anya 0.01ml nke mmiri mmiri. Ọ bụrụ na 1ml na-ejide 2500mcg, anyị na-eke 2500 site na 100 nkeji. Nke a pụtara na akara akara onye ọ bụla na sirinji nwere kpọmkwem 25mcg nke ogige ahụ. Ọ bụrụ na protocol gị chọrọ ngwa 250mcg, ị ga-adọta mmiri mmiri ahụ ruo akara nkeji iri.
Nkeji sirinji (1ml/100U) |
Mpịakọta nke ewepụtara (ml) |
Ọgwụ (5 mg agwakọta na 2ml) |
dose (10mg agwakọta na 2ml) |
|---|---|---|---|
Nkeji 10 |
0,1 ml |
250 mg |
500 mg |
Nkeji 20 |
0,2 ml |
500 mg |
1000 mg |
nkeji 50 |
0,5 ml |
1250 mcg |
2500 mcg |
Math akwụkwọ ntuziaka na-ahapụ ohere maka njehie mmadụ. Anyị na-akwadosi ike iji ihe mgbako ịntanetị nwere ike ịnwapụta nke ahaziri maka ogige ndị a. Tinye nha vial gị, olu ihe na-esi nri, na ọnụọgụ microgram nke ịchọrọ. Ngwá ọrụ ahụ ga-ewepụta ọnụ ọgụgụ nkeji kpọmkwem achọrọ. Iji mgbako dijitalụ iji lelee mgbakọ na mwepụ akwụkwọ ntuziaka gị ugboro abụọ na-ewusi ụzọ adịghị mma maka usoro nyocha.
Ihe na-akpata gburugburu ebe obibi na-ekpebi ndụ nchekwa. Ị ga-emerịrị usoro ikpo ọkụ siri ike iji chekwaa ngwa ahịa gị. Nchekwa tupu emegharịa dabere na usoro iheomume gị. Maka nchekwa ogologo oge na-ewe ọtụtụ ọnwa, debe vials lyophilized na friza miri emi na -20 Celsius. Maka nchekwa obere oge n'okpuru izu ole na ole, friji ọkọlọtọ na 2°C ruo 8°C na-arụ ọrụ nke ọma. Otú ọ dị, iwu nhazigharị ga-agbanwe kpamkpam. Ozugbo mmiri batara na vial, ihe ngwọta ahụ ga-adịrịrịrịrị na friji na 2 Celsius C ruo 8 Celsius. Akwụsịla ihe ngwọta mmiri mmiri.
Ìhè na oxidation na-ebute nnukwu ihe egwu na iguzosi ike n'ezi ihe molekụla. Ìhè ultraviolet na-akụda njikọ kemịkalụ dị mgbagwoju anya ngwa ngwa site na foto-oxidation. Ị ga-edobe vial mgbe niile n'ime akpa ndị na-enweghị ọkụ. Ọ bụrụ na ị nweghị arịa pụrụ iche, chekwaa ha na ebe gbara ọchịchịrị kpamkpam, dị ka akụkụ azụ nke drawer refrjiraeto. Machie ikpughe ha na ọkụ ụlọ ambient dị ka o kwere mee n'oge usoro mbufe.
Ịghọta ihe ndị dị adị na ndụ shelf na-egbochi iji ihe mgbagwoju anya eme ihe na mberede. Ihe akaebe nke ụlọ ọgwụ na-enye ntọala doro anya maka njedebe. Ọtụtụ peptides emegharịrị site na iji mmiri BAC na-ejigide nkwụsi ike kacha elu maka ihe dị ka izu 3 ruo 4. Mgbe ụbọchị 28 gachara, mmanya benzyl na-efunahụ ike nchebe ya. Ngwakọta ahụ n'onwe ya na-amalite ịkụda, na-efunahụ nrụpụta ngwa ngwa. Debe akara ngosi gị mgbe niile na ụbọchị nrụgharị. Ị ga-atụfu ihe ngwọta ọ bụla na-egosi ígwé ojii, mgbanwe agba, ma ọ bụ ihe na-ese n'elu mmiri ozugbo, n'agbanyeghị ụbọchị.
Nhazigharị nke na-aga nke ọma na-adabere kpamkpam na ogidi ntọala atọ: amụghị nwa zuru oke, mgbako mgbakọ na mwepụ, na ijikwa nwayọ na-enweghị atụ. Ọdịda n'akụkụ ọ bụla n'ime mpaghara ndị a na-emebi iguzosi ike n'ezi ihe nke ogige ahụ. Site n'ịghọta mmetụta agụụ na ịkwanyere adịghị ike nke powders lyophilized, ị na-ebuli ma nchekwa na ịdị irè. Nhọrọ diluent na-emetụta ogologo ndụ ogologo ndụ, na-eme ka mmiri BAC bụrụ ụkpụrụ na-enweghị mgbagha maka iji ụlọ nyocha ogologo oge.
Nzọụkwụ gị na-esote ozugbo gụnyere inyocha akụrụngwa ụlọ nyocha gị ugbu a. Tụfuo mmiri ọgwụ kubie ume ma ọ bụ vials ọ bụla a na-enyo enyo. Isi mmalite dị elu, mmiri bacteriostatic nke ndị ọzọ nwalere site n'aka ndị na-ere ahịa ama ama. N'ikpeazụ, jiri ngwaọrụ nha ziri ezi yana ihe mgbako dijitalụ tupu ị gaba n'ihu na usoro ngwakọta ọhụrụ ọ bụla. Nkwadebe nke ọma na-ekwe nkwa nsonaazụ a pụrụ ịdabere na ya, nke enwere ike imepụtaghachi n'oge ọ bụla.
A: Igwe ojii na-egosipụtakarị mgbasa ezughị oke, nhọrọ nzacha na-ezighi ezi, ma ọ bụ àgwà mebiri emebi. Ihe owuwu hydrophobic na-ajụkarị mmiri ọkọlọtọ wee tụgharịa mmiri ara ehi. N'aka nke ọzọ, nnukwu mgbanwe okpomọkụ n'oge mbupu nwere ike mebie ntụ ntụ. Ọ bụrụ na iji nwayọọ nwayọọ ewepụghị mmiri mmiri mgbe nkeji iri atọ gachara, tụfuo vial ahụ kpamkpam. Ngwọta igwe ojii enweghị atụ na enweghị nchekwa maka ngwa.
A: Mba. Ị kwesịrị ịkpachara anya zere kefriza mmiri mmiri ngwọta. Ọkpụkpụ ntu oyi na-eme ka ụmụ irighiri mmiri gbasaa ma na-agbakọta nke ukwuu. Mgbasawanye anụ ahụ a na-emepụta kristal akpụrụ akpụ. Kristal ndị a na-akpacha agbụ amino acid siri ike, na-akpata mmebi n'ụzọ siri ike. Debe vials arụgharịrị na friji mgbe niile n'etiti 36°F na 46°F.
A: Ịma jijiji na-ewebata nrụgide shiee ihe ike ma na-ebute ụfụfụ ngwa ngwa n'ime vial. Nke a n'ibu trauma nwere ike denature na protein agbụ, na-eduga na-adịgide adịgide mfu nke nrụpụta ọrụ. Ọ bụrụ na ị maa jijiji na mberede, tinye vial n'ime friji ozugbo. Hapụ ya n'enweghị mgbagha maka awa 24. Rịba ama mfu arụmọrụ nwere ike n'oge nyocha gị.
A: Dị ka ọkọlọtọ ụlọ ọgwụ ntuziaka, bacteriostatic mmiri na-anọgide na nchekwa maka 28 ụbọchị post-mkpọpu. Mmanya benzyl nke 0.9% na-agbada ka oge na-aga mgbe ikuku na ihe mmetọ gburugburu. Mgbe izu anọ gachara, ọ gaghịzi ekwe nkwa mgbochi nke uto nje. Tụfuo mmiri BAC mepere emepe na ụbọchị 29.
