▎ Výzkum PNC 27
Jaké jsou aplikace PNC-27?
1, Léčba leukémie:
PNC-27 je schopen vázat HDM-2 protein na membránu rakovinných buněk a indukovat tvorbu cytotoxických transmembránových pórů. Ve studii lidských buněčných linií akutní myeloidní leukémie bez kmenových buněk bylo zjištěno, že HDM-2 je vysoce exprimován v membránách buněk U937 (akutní monocytární leukémie), OCI-AML3 (akutní granulomonocytární leukémie) a HL60 (akutní promyelocytární leukemie na HD2 a indukuje membránu promyelocytární leukémie, PNC-2 indukuje membránu). nekroptóza a LDH (laktátdehydrogenáza) se uvolní do 4 hodin. (LDH) uvolnění do 4 hodin. Zacílení HDM-2 na buněčnou membránu může být potenciální strategií pro léčbu leukémie. PNC-27 vykazoval významnou antileukemickou aktivitu v několika leukemických buněčných liniích cílením na membránu HDM-2 [1].
2. Vyvolává lýzu nádorových buněk
Působí jako intaktní peptid:
Několik studií ukázalo, že PNC-27 indukuje lýzu nádorových buněk jako intaktní peptid spíše než jako fragment. Například ve studii buněk rakoviny prsu MCF-7 a netransformovaných buněk prsního epitelu MCF-10-2A byly buňky ošetřeny PNC-27 se zeleným fluorescenčně značeným amino-koncem a červeným fluorescenčně značeným karboxy-koncem. Výsledky ukázaly zřetelnou tečkovanou žlutou fluorescenci na membráně rakovinných buněk po 30 minutách, což naznačuje, že intaktní peptid byl přítomen na membráně rakovinné buňky a zvyšoval se s lýzou rakovinných buněk. Naproti tomu netransformované buňky MCF-10-2A zpočátku vykazovaly jednotnou žlutou membránovou fluorescenci, ale pak zmizely. Na rozdíl od rakovinných buněk zůstaly tyto netransformované buňky životaschopné. To naznačuje, že PNC-27 indukuje štěpení membrány v rakovinných buňkách tím, že působí jako celý peptid, spíše než jako fragment [2].
Vazba na HDM-2 za účelem vytvoření struktury pórů:
PNC-27 obsahuje strukturní doménu vázající HDM-2 a presekvenci peptidu pronikajícího do buněk (CPP), který indukuje tvorbu pórových struktur vazbou na HDM-2 na buněčné membráně, což vede k lýze a nekróze nádorových buněk. Výpočty konformační energie ukázaly, že PNC-27 tvoří komplex s HDM-2 v poměru 1:1, přičemž vedoucí sekvence směřuje pryč od komplexu. Studie imunoscanovací elektronové mikroskopie odhalily přítomnost více 6 nm a 15 nm značených zlatých částic v poměru přibližně 1:1 v pórech na povrchu rakovinných buněk ošetřených PNC-27, což naznačuje, že tyto komplexy jsou důležité pro strukturu pórů. Naproti tomu u kontrolních, netransformovaných fibroblastů ošetřených PNC-27 se nevytvořily žádné póry [3].
Rakovina slinivky:
Nový protirakovinný peptid PNC-27 indukuje nekrózu lidských rakovinných buněk pankreatu MiaPaCa-2 způsobem závislým na dávce, ale je netoxický pro normální buňky. Studie ukázaly, že PNC-27 v kombinaci s Gemzarem, chemoterapeutickým činidlem používaným k léčbě rakoviny slinivky břišní, má větší cytotoxický účinek na buňky MiaPaCa-2 než samotný Gemzar nebo PNC-27. To může být způsobeno tím, že póry indukované PNC-27 zvyšují propustnost rakovinných buněk pro Gemzar, což umožňuje více Gemzaru zacílit na rakovinné buňky [1].
Rakovina vaječníků:
V buněčných liniích rakoviny vaječníků SKOV-3 a OVCAR-3 je protein HDM-2 vysoce exprimován na buněčné membráně. PNC-27 se lokalizuje společně s HDM-2 na buněčné membráně, což vede k rychlé buněčné nekróze. Naproti tomu u netransformované kontrolní buněčné linie HUVEC nebyla pozorována společná lokalizace a cytotoxicita PNC-27 kvůli minimální membránové expresi HDM-2 [1].
Rakovina tlustého střeva:
PNC-27 selektivně zabíjí kmenové buňky rakoviny tlustého střeva. V šesti buněčných liniích rakoviny tlustého střeva se PNC-27 lokalizoval společně s membránou HDM-2 a způsobil buněčnou smrt (nekrózu nádorových buněk, vysoké uvolňování LDH, negativitu proteinu V spojeného s membránou a cysteinu 3) pouze v rakovinných buňkách. In vivo způsobuje PNC-27 nekrózu nádorových uzlů, ale neovlivňuje normální tkáň [1].
3. Zlepšená protinádorová účinnost
Vazba na Doxil:
Bylo zjištěno, že peptid PNC27 jako cílící ligand může významně zvýšit protinádorovou účinnost přípravku Doxil v HDM2-pozitivních rakovinných buňkách. Různá množství peptidu PNC27 byla vložena do Doxil a průtoková cytometrie a konfokální analýza byly provedeny na buňkách C26 rakoviny tlustého střeva (HDM2-pozitivní) a B16F0 melanomu (HDM2-negativní) buněk. Výsledky ukázaly, že PNC27-Doxil vykazoval významnou buněčnou absorpci a cytotoxicitu v buňkách C26, zatímco tyto výsledky nebyly pozorovány u buněk B16F0. Například PNC27-Doxil (100 PNC27 peptid) významně zvýšil terapeutickou účinnost přípravku Doxil, aniž by ovlivnil jeho biodistribuci v nádorech C26 [4].
4. Synergická léčba ovariálního karcinomu paklitaxelem
Paklitaxel je široce používán při léčbě gynekologických malignit, ale zaměřuje se na nádorové buňky v M fázi buněčného cyklu, přičemž buňky v jiných fázích přežívají a potenciálně vedou k recidivě nádoru. PNC-27 je peptid syntetizovaný z aminokyselin ve vazebné doméně P53-MDM-2, který zabíjí různé rakovinné buněčné linie způsobem závislým na dávce. Bylo zjištěno, že buňky ID8 rakoviny vaječníků vystavené paclitaxelu vykazují zvýšenou expresi MDM-2 a zvýšenou citlivost na PNC-27. Cytotoxický účinek PNC-27 je závislý na jeho vazbě na MDM-2 a blokování MDM-2 inhibuje zabíjející účinek PNC-27. Heteroléčivé obrazy kombinací dávek byly synergické, což naznačuje synergický účinek mezi PNC-27 a paclitaxelem [5] . V intraperitoneálním modelu rakoviny vaječníků (ID8) přidání PNC-27 k týdennímu podávání paclitaxelu významně snížilo růst nádoru. Tato data demonstrují synergický účinek mezi PNC-27 a paclitaxelem, přičemž PNC-27 se zaměřuje na paclitaxel přežívající buňky a zlepšuje jeho protinádorové účinky.
5. Léčba primárního epiteliálního karcinomu vaječníků
Studie vytvořila primární kultury čerstvě izolovaných epiteliálních buněk rakoviny vaječníků od pacientek s nově diagnostikovaným cystadenokarcinomem vaječníků. Jeden z nich byl z mucinózního cystadenokarcinomu a druhý byl z vysoce kvalitního papilárního plazmacytoidního karcinomu. Terapeutická účinnost PNC-27 byla kvantitativně hodnocena kvalitativním pozorováním světelným mikroskopem a testem proliferace buněk MTT, stejně jako měřením laktátdehydrogenázy (LDH). Výsledky ukázaly, že PNC-27 inhiboval růst lidských primárních rakovinných buněk čerstvě izolovaných ze dvou ovariálních epiteliálních karcinomů způsobem závislým na dávce a byl pro ně cytotoxický. Kontrolní peptid PNC-29 neměl žádný účinek na primární rakovinné buňky. Kromě toho je PNC-27 také cytotoxický pro dlouhodobě zavedené a na chemoterapii odolné buněčné linie lidského karcinomu vaječníků [6].
Stručně řečeno, PNC-27 jako nový protirakovinný peptid vykazuje významný potenciál pro aplikaci v různých terapiích rakoviny. V oblasti leukémie vykazoval PNC-27 selektivní zabíjející účinky na akutní myeloidní leukémii (např. buněčné linie U937, OCI-AML3 a HL60) a buňky K562 s deficitem p53 a dosáhl vysoce účinných protinádorových účinků indukcí buněčné nekrózy a uvolňováním laktátdehydrogenázy. Při léčbě rakoviny vaječníků vykázala kombinace PNC-27 a paclitaxelu synergický účinek, který by mohl významně inhibovat růst nádoru a stále mít zabíjející aktivitu proti buňkám rezistentním na chemoterapii. Kromě toho může kombinace PNC-27 s lipozomálními léčivy (např. Doxil) jako cílícím ligandem zvýšit specifické dodání a protinádorovou účinnost léčiva do HDM2-pozitivních nádorových buněk. Jeho inhibiční účinek na progenitorové buňky primárního epiteliálního karcinomu vaječníků dále potvrzuje klinickou translační hodnotu. V současné době PNC-27 vstoupil do fáze I klinických studií a je zapotřebí více klinických studií k ověření jeho bezpečnosti a dlouhodobé účinnosti, aby bylo možné jej propagovat jako inovativní řešení pro léčbu rakoviny.
O autorovi
Všechny výše uvedené materiály jsou zkoumány, upravovány a sestavovány společností Cocer Peptides.
Autor vědeckého časopisu
Sarafraz-Yazdi E je výzkumný pracovník spojený s několika organizacemi, včetně NomoCan, New York Blood Center, SUNY Downstate Health Sciences University a New York Harbor VA Med Ctr. Tyto vztahy zdůrazňují jeho zapojení do různých výzkumných a lékařských prostředí.
Jeho výzkumné zájmy pokrývají různé kategorie předmětů, jako je onkologie, lékařská laboratorní technologie, farmakologie a farmacie, biochemie a molekulární biologie a výzkum a experimentální medicína. Jeho práce v těchto oblastech odráží jeho široké odborné znalosti a odhodlání prohlubovat znalosti v těchto důležitých oblastech lékařské vědy a výzkumu. je uveden v odkazu na citaci [3].
