|
1 sæt (10 hætteglas)
| Mængde: | |
|---|---|
▎ Glutathionforskning
Molekylær baggrund
Glutathion (GSH), også kendt som L-γ-glutamyl-L-cysteinylglycin, er et tripeptid sammensat af glutamat, cystein og glycin. I modsætning til en konventionel a-peptidbinding er glutamatresten forbundet til cystein gennem dens y-carboxylgruppe. Molekylet indeholder en cysteinyl thiol (-SH), som er den vigtigste redox-aktive gruppe i dets struktur. PubChem lister reduceret glutathion under CID 124886 med molekylformlen C10H17N3O6S og en molekylvægt på 307,33 g/mol.[6]
Forskningsfremskridt
Zeng Jiayu og kolleger udviklede en mitokondrier-målrettet fluorescerende probe (MTTP), der er i stand til at skelne cystein og glutathion (GSH) gennem to forskellige emissionssignaler. Proben blev brugt til at overvåge ændringer i mitokondrielt cystein og GSH under ferroptose og dets hæmning. I en ilt-glukose deprivation/reoxygenation (OGD/R) model ved hjælp af H9C2 celler anvendte forfatterne MTTP til at visualisere ændringer i disse thioler under eksperimentelle forhold forbundet med myokardieiskæmi/reperfusionsskade.[1]
Fig1. Den grafiske mekanisme til overvågning af ferroptose i OGD/R-induceret MI/R-skade via MTTP [1].
Jiao Liu et al. undersøgte GSH's rolle i cuproptosis ved hjælp af pancreas ductal adenocarcinoma (PDAC) cellelinjer og musetumormodeller. Forfatterne rapporterede, at GSH chelerede kobber gennem sin thiolgruppe og reducerede mitokondrielle kobber-associeret proteotoksisk stress under de eksperimentelle forhold. Deres mekanistiske eksperimenter viste, at ES-Cu øgede NFE2L2-proteinstabilitet og opregulerede GSH-syntese-relaterede gener, mens SLC25A39 var involveret i transport af GSH ind i mitokondrier. Genetisk hæmning af NFE2L2-GSH-SLC25A39-vejen øgede cuproptose-associerede responser i de undersøgte celle- og musemodeller.[2]
Fig. 2. Forbedret NFE2L2-proteinstabilitet og aktivitet under cuproptosis [2].
(A, B) Western blot og qPCR-analyser af ekspressionen af NFE2L2 i PDAC-celler i helcelleekstrakter efter behandling med ES-Cu (100 nM, 1:1) i 6-24 timer (n = 3 biologisk uafhængige prøver, *P < 0,05 versus kontrol, ANOVA-test). (C) CHX-chase-assay af nedbrydningskinetikken af NFE2L2-protein i PANC1-celler efter behandling med CHX (50 µg/ml) i fravær eller tilstedeværelse af 100 nM ES-Cu eller 2 µM MG132 i 15-60 minutter (n = 3 biologisk uafhængige CH0X-prøver, *P < 0 VA-prøver, *P < 0 VA-prøver). ACTB blev brugt som belastningskontrol. (D) NFE2L2 transkriptionel aktivitetsanalyse af PDAC-celler efter behandling med ES-Cu (100 nM) i 6-24 timer (n = 3 biologisk uafhængige prøver, *P < 0,05 versus kontrol, ANOVA-test). (E) Billedanalyse af lokaliseringen af NFE2L2 i PANC1-celler efter behandling med ES-Cu i 24 timer. Bar = 15 μm.
Gurung et al. undersøgte glutathionmetabolisme i argininosuccinic aciduria (ASA) ved hjælp af målrettet metabolomics hos individer med ASL-mangel og i musemodeller. Forfatterne rapporterede glutathiondepletering sammen med ændret opstrøms cysteinudnyttelse og ændringer i antioxidantveje. I de prækliniske museundersøgelser forbedrede lipid-nanopartikel-indkapslet humant ASL-mRNA ASL-aktivitet, ureagenese og målte glutathion-metabolisme-endepunkter. Interventionen, der blev evalueret i denne undersøgelse, var ASL-mRNA-terapi snarere end administration af eksogen glutathion.[3]
Wang et al. fremstillede palladium nanokrystaller ved mikrobølgesyntese og udviklede en nanoenzym-baseret kolorimetrisk metode til GSH-bestemmelse. Analysen brugte interaktionen mellem GSH thiolgruppen og palladium nanokrystaller til at ændre den katalytiske farvereaktion. Forfatterne rapporterede lineære detektionsintervaller på 3-40 μM og 55-110 μM, med en detektionsgrænse på 0,14 μM. Metoden blev også evalueret i serumprøver med genfindingsværdier rapporteret i den oprindelige undersøgelse.[4]
Chen et al. udviklet en rhodamin-Gd(III)-baseret fluorescerende/magnetisk resonans dual-modal probe (RG) til GSH-detektion. I nærvær af GSH genererede proben koordinerede fluorescens- og magnetiske resonanssignalændringer. Forfatterne rapporterede en responstid på ca. 5 ms og en detektionsgrænse på 2,47 μM, og anvendte efterfølgende sonden til dobbeltmodal GSH-billeddannelse i en musemodel.[5]
Fig. 3. Designstrategi for probe RG til GSH-detektion.
Forskningsbegrænsninger
De undersøgelser, der er opsummeret ovenfor, adresserer forskellige forskningsspørgsmål, herunder fluorescerende sansning, celledødsmekanismer, arvelig stofskiftesygdom, kolorimetrisk kvantificering og udvikling af billeddannende probe. De fleste af disse undersøgelser målte endogent GSH eller brugte GSH som et analytisk mål i stedet for at evaluere et eksternt leveret glutathionmateriale. Resultater opnået i H9C2-celler, PDAC-modeller, ASL-mangelfulde forsøgspersoner eller mus, analytiske serumprøver og billeddannelsesmodeller er derfor ikke direkte udskiftelige.[1-5]
Reduceret glutathion er den kemiske enhed identificeret i PubChem som CID 124886.[6] Eksperimentelle resultater i den citerede litteratur fastslår ikke identiteten, renheden, sikkerheden eller den kliniske ydeevne af et separat leveret forskningsmateriale. Fortolkning bør forblive bundet til den nøjagtige model, analysemetode og materiale beskrevet i hver kilde.
COCER Peptides præsenterer Glutathion udelukkende til laboratorieforskning og analytisk brug. Det er ikke beregnet til human eller veterinær brug. Forskningen beskrevet ovenfor opsummerer resultater rapporteret i tredjepartspublikationer og er ikke en erklæring om klinisk effekt, sikkerhed, diagnose, behandling, forebyggelse eller en brugsanvisning.
