|
१ किट (१० शीशी)
| मात्रा: | |
|---|---|
▎ ग्लुटाथियोन अनुसन्धान
Glutathione को अनुसन्धान पृष्ठभूमि के हो?
ग्लुटाथियोनको खोज र संरचनात्मक निर्धारण: 1888 मा, ग्लुटाथियोन पहिलो पटक खमीरमा पत्ता लगाइएको थियो। 1921 मा, वैज्ञानिकहरूले थप यसको रासायनिक संरचना निर्धारण गरे। यो पेप्टाइड बन्डहरू मार्फत ग्लुटामिक एसिड, सिस्टीन, र ग्लाइसिनको संक्षेपण द्वारा बनाइएको ट्राइपेप्टाइड हो।
जीवित जीवहरूमा यसको महत्त्वपूर्ण भूमिकाहरूको पहिचान: 1930 को दशकदेखि, मानिसहरूले बिस्तारै पहिचान गरेका छन् कि ग्लुटाथियोनले जीवित जीवहरूमा विभिन्न प्रकारका महत्त्वपूर्ण कार्यहरू गर्दछ। यसले कोशिकाहरू भित्रको रेडक्स प्रतिक्रियाहरूमा भाग लिन्छ, इन्ट्रासेलुलर वातावरणको स्थिरता कायम राख्न र कोशिकाहरूलाई अक्सिडेटिभ क्षतिबाट जोगाउन महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ। एकै समयमा, यसले एमिनो एसिड यातायात र इन्जाइम गतिविधिको नियमन जस्ता शारीरिक प्रक्रियाहरूमा पनि महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ। यी खोजहरूले चिकित्सा क्षेत्रमा ग्लुटाथियोनको प्रयोगको लागि सैद्धान्तिक आधार तयार पारेको छ।
चिकित्सा अनुप्रयोग मागहरू द्वारा संचालित स्रोतहरूमा अनुसन्धान: ग्लुटाथियोनको शारीरिक कार्यहरूमा अनुसन्धानको गहिरोसँग, चिकित्सा क्षेत्रमा यसको सम्भावित अनुप्रयोग मूल्य बढ्दो रूपमा प्रमुख भएको छ। यो विभिन्न रोगहरु को उपचार को लागी प्रयोग गरिन्छ, जस्तै कलेजो रोगहरु र आँखा रोगहरु, र पनि एक एंटीओक्सिडेंट को रूप मा प्रयोग गर्न सकिन्छ। क्लिनिकल अनुप्रयोगहरूमा ग्लुटाथियोनको ठूलो माग पूरा गर्न, अनुसन्धानकर्ताहरूले ग्लुटाथियोनको कुशल र स्थिर स्रोतहरू अन्वेषण गर्न आफूलाई समर्पित गर्न थाले, जसले यसको स्रोतहरूमा गहिरो अनुसन्धानलाई बढावा दिएको छ।
Glutathione को कार्य को संयन्त्र के हो?
1. एन्टिअक्सिडेन्ट प्रभाव
Glutathione (GSH) एक प्रभावकारी एन्टिअक्सिडेन्ट हो जसले कोशिका भित्र एन्टिअक्सिडेन्ट प्रतिरक्षा प्रणालीमा भाग लिन्छ। यसले हाइड्रोजन पेरोक्साइड (H₂O₂) जस्ता प्रतिक्रियाशील अक्सिजन प्रजातिहरू (ROS) सँग प्रत्यक्ष रूपमा प्रतिक्रिया गर्न सक्छ र तिनीहरूलाई हानिकारक पदार्थहरूमा घटाउन सक्छ (रेड्डी वी एन. 1990; सिन्हा आर, 2018)। उदाहरणका लागि, ग्लुटाथियोन रेडक्स चक्र मार्फत, ग्लुटाथियोनले H₂O₂ सँग प्रतिक्रिया गर्छ र यसलाई पानीमा रूपान्तरण गर्छ, जसले गर्दा कोषहरूलाई अक्सिडेटिभ क्षतिबाट बचाउँछ। यस प्रक्रियामा, ग्लुटाथियोनलाई अक्सिडाइज्ड ग्लुटाथियोन (GSSG) मा अक्सिडाइज गरिएको छ, तर सेलमा रहेको ग्लुटाथियोन रिडक्टेजले GSSG लाई GSH मा घटाउन सक्छ, सेलको एन्टिअक्सिडेन्ट क्षमता कायम राख्छ।
ग्लुटाथियोनले कोशिका झिल्लीमा -एसएच समूहहरूलाई पनि सुरक्षित गर्न सक्छ, जसले केशन यातायात र झिल्ली पारगम्यतामा महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ। झिल्ली -SH समूहहरूको कम अवस्था कायम गरेर, ग्लुटाथियोनले कोशिका झिल्लीको स्थिरता र सामान्य कार्यलाई कायम राख्न मद्दत गर्दछ [१].
2. डिटोक्सिफिकेशन प्रभाव
Glutathione detoxification प्रक्रिया मा एक महत्वपूर्ण भूमिका खेल्छ। यसले विषाक्त पदार्थहरूलाई गैर-विषाक्त वा कम-विषाक्त यौगिकहरू बनाउन र शरीरबाट तिनीहरूको उत्सर्जनलाई बढावा दिन सक्छ। उदाहरणका लागि, कलेजोमा, ग्लुटाथियोन विभिन्न हानिकारक पदार्थहरूसँग बाँध्छ र पित्त वा पिसाबको माध्यमबाट शरीरबाट उत्सर्जित हुन्छ, कलेजोका कोशिकाहरूलाई विषाक्त पदार्थहरूको क्षतिबाट बचाउँछ। कलेजो मानव शरीरको मुख्य डिटोक्सिफिकेशन अंग हो, र यसमा ग्लुटाथियोनको भूमिका महत्त्वपूर्ण छ।
3. प्रतिरक्षा प्रणाली मा प्रभाव
ग्लुटाथियोनले प्रतिरक्षा कोशिकाहरूमा महत्त्वपूर्ण कार्य गर्दछ। म्याक्रोफेजहरूमा, प्राकृतिक हत्यारा कोशिकाहरू, र T कोशिकाहरू, उदाहरणका लागि, यसले सेल सक्रियता, चयापचय, उपयुक्त साइटोकाइन रिलीज, रेडक्स गतिविधि, र फ्री रेडिकल स्तरहरू विनियमित गर्न सक्छ [२] । प्रतिरक्षा कोशिकाहरूले रोगजनकहरूसँग लड्न र शरीरको स्वास्थ्य कायम राख्न महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छन्। ग्लुटाथियोनले यी कोशिकाहरूको कार्यलाई विनियमित गरेर शरीरको प्रतिरक्षा क्षमता बढाउँछ।
ग्लुटाथियोनले रेडक्स गतिविधिलाई स्थिर गर्न सक्छ, साइटोकाइन प्रोफाइललाई Th1-प्रकारको प्रतिक्रियामा सार्न सक्छ, र T लिम्फोसाइट्सको प्रकार्य बढाउन सक्छ, यसैले महत्त्वपूर्ण इम्युनोमोड्युलेटरी र एन्टिअक्सिडेन्ट भूमिका खेल्छ [२] । Th1-प्रकार साइटोकाइनहरू मुख्यतया भाइरस, ब्याक्टेरिया र ट्युमर सेलहरू जस्ता रोगजनकहरू विरुद्ध सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाहरूमा संलग्न हुन्छन्। ग्लुटाथियोनले साइटोकिन्सको सन्तुलनलाई विनियमित गरेर शरीरको प्रतिरक्षा प्रतिरक्षा क्षमतालाई बढाउँछ।
4. प्रजनन प्रणाली मा भूमिका
ग्लुटाथियोनले स्तनधारी जनावरहरूको पुरुष र महिला कीटाणु कोशिकाहरूमा साथै भ्रूण विकासको प्रारम्भिक चरणहरूमा महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ। पुरुष र महिला गेमेटहरूमा, GSH यी कोशिकाहरूलाई अक्सिडेटिभ क्षतिबाट जोगाउन संलग्न छ [3] । उदाहरण को लागी, शुक्राणुजनन को समयमा, glutathione को एकाग्रता बिस्तारै घट्दै जान्छ, र oocyte परिपक्वता को समयमा, glutathione को संश्लेषण gonadotropins द्वारा विनियमित हुन्छ, र यसको एकाग्रता पनि परिवर्तन हुन्छ। ग्लुटाथियोन पनि oocyte को meiotic स्पिन्डल को आकार विज्ञान को बनाए राखन संग सम्बन्धित छ। निषेचन पछि, यसले पुरुष प्रोनुक्लियसको निर्माण र ब्लास्टोसिस्ट चरणमा प्रारम्भिक भ्रूणको विकासमा सकारात्मक भूमिका खेल्छ। यसको अतिरिक्त, कम्युलस कोशिकाहरूले ग्लुटाथियोनको संश्लेषणमा पनि महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छन्।
Glutathione को आवेदन के हो?
1. मादक कलेजो रोग मा आवेदन
अल्कोहल लिभर रोग (ALD) एक गम्भीर रोग हो जुन गम्भीर अक्सिडेटिभ तनाव द्वारा विशेषता हो। पुरानो रक्सीको प्रयोगले अक्सिडेटिभ तनाव र सूजनलाई ट्रिगर गर्न सक्छ, कलेजो कोशिकाहरूलाई क्षति पुर्याउँछ। ग्लुटाथियोन (GSH), थायोल समूह भएको γ-glutamylcysteineylglycine बाट बनेको ट्राइपेप्टाइड, रेडक्स प्रतिक्रियाहरूमा भाग लिन्छ र कोशिकाहरू भित्रको मुख्य मुक्त रेडिकल स्क्याभेन्जर हो। कलेजोमा, GSH को एकाग्रता अपेक्षाकृत उच्च छ, तर ALD भएका बिरामीहरूमा, यसको अन्तर्जात स्तर घट्छ, अवस्थालाई बढाउँछ।
GSH को नसामा पूरकले ALD भएका बिरामीहरूमा राम्रो प्रभाव देखाएको छ, कलेजोको प्रकार्य सुधार गर्न र फाइब्रोसिस मार्करहरू कम गर्न सक्षम छ [४].
2. उमेर ढिलाइमा भूमिका
अनियमित, डबल-ब्लाइन्ड, प्लेसबो-नियन्त्रित, समानान्तर, स्वस्थ महिला विषयहरूको तीन-हातको अध्ययनमा, GSH वा GSSG लिने विषयहरूको अनुहार र हातहरूमा मेलानिन सूचकांक र पराबैंगनी धब्बाहरू प्रायः प्लेसबो समूहको तुलनामा कम थिए। केही क्षेत्रहरूमा, GSH लिने विषयहरूको झुर्रियाँ उल्लेखनीय रूपमा कम भएको थियो, र प्लेसबो समूहको तुलनामा, GSH र GSSG समूहहरूको छालाको लोच बढ्ने प्रवृत्ति देखायो। यस अध्ययनले संकेत गर्दछ कि ग्लुटाथियोनले छालाको उमेर ढिलो गर्नमा सकारात्मक प्रभाव पार्छ [५].
2. पार्किन्सन रोग मा आवेदन
पार्किन्सन रोग (PD) एक न्यूरोलॉजिकल विकार हो। अनुसन्धानले देखाउँछ कि ग्लुटाथियोन (GSH) ले PD मा निश्चित उपचारात्मक प्रभाव पार्न सक्छ। धेरै डाटाबेस र मेटा-विश्लेषण को व्यवस्थित खोज को माध्यम बाट, यो GSH र नियन्त्रण समूह बीच एकीकृत पार्किन्सन्स रोग रेटिंग स्केल (UPDRS) III मा एक सांख्यिकीय रूपमा महत्वपूर्ण भिन्नता थियो, र त्यहाँ glutathione peroxidase मा पनि एक महत्वपूर्ण भिन्नता थियो भनेर फेला पर्यो। यद्यपि, UPDRS I र UPDRS II स्कोर र साइड इफेक्टहरूमा दुई समूहहरू बीच कुनै सांख्यिकीय रूपमा महत्त्वपूर्ण भिन्नताहरू थिएनन्। थप रूपमा, उपसमूह विश्लेषणले देखायो कि खुराक (300mg बनाम 600mg) UPDRS III लाई असर गर्ने कारक थियो। यसले संकेत गर्दछ कि GSH ले प्रतिकूल घटनाहरूको घटनालाई नबढाई PD को मोटर स्कोरहरू थोरै सुधार गर्न सक्छ [6].
3. हृदय रोग मा आवेदन
कार्डियोभास्कुलर रोगहरूको रोकथाम: हृदय रोगहरूमा जस्तै कोरोनरी धमनी अवरोध, उच्च रक्तचाप, हृदय रोग, र स्ट्रोक, धेरै कार्डियोभास्कुलर प्याथोलोजीहरूले आफ्नो विकासको क्रममा अक्सिडेटिभ तनावको अवस्था उत्पन्न गर्दछ, जसले रोगीहरूको अवस्था बिग्रन्छ, जुन प्रतिक्रियाशील अक्सिजन र एनएसट्रोजनको उत्पादन (स्पेन्सिजन रिएक्टिभ)सँग सम्बन्धित छ। कम ग्लुटाथियोन (GSH), एक महत्त्वपूर्ण एन्टिअक्सिडेन्टको रूपमा, सक्रिय पदार्थहरूको ओक्सीकरण विरुद्ध लड्न भाग लिन सक्छ। GSH हृदय र कलेजोमा संश्लेषित गरिन्छ र हृदय रोगहरूमा हानिकारक ROS प्रभावहरू रोक्न वा कम गर्नको लागि ठूलो महत्त्व छ [७].
हृदय रोगहरूमा: कम परिसंचरण ग्लाइसिन स्तर हृदय रोग (CVD) संग सम्बन्धित छ। अध्ययनले पत्ता लगाएको छ कि ग्लाइसिनको कमीले एथेरोस्क्लेरोसिसको विकासलाई बढाउँछ, जबकि ग्लाइसिन पूरकले यसलाई कमजोर बनाउँछ। DT-109 डुअल लिपिड-लोयरिंग/ग्लुकोज-कम गर्ने गुणहरू भएको ग्लाइसिन-आधारित यौगिक हो र एथेरोस्क्लेरोसिस विरुद्ध महत्त्वपूर्ण सुरक्षात्मक प्रभाव छ। कोरोनरी हृदय रोग, एथेरोस्क्लेरोटिक मुसा, र म्याक्रोफेज भएका बिरामीहरूमा गरिएको अध्ययनले एथेरोस्क्लेरोसिसमा ग्लाइसिनको रोगजनक भूमिका रहेको देखाएको छ, र ग्लाइसिनमा आधारित उपचारले ग्लुटाथियोन बायोसिन्थेसिसको एन्टिअक्सिडेन्ट प्रभावमार्फत एथेरोस्क्लेरोसिसलाई कम गर्न सक्छ ।.
स्रोत: पबमेड [८]
4. आँखा रोग को रोकथाम र उपचार मा आवेदन
मोतिबिन्दुको रोकथाम र उपचार: नेत्रविज्ञानमा, ग्लुटाथियोन मोतियाबिन्दुको रोकथाम र उपचारको लागि प्रयोग गर्न सकिन्छ। अनुसन्धानले मोतिबिन्दुको घटना लेन्समा अक्सिडेटिभ क्षतिसँग नजिकको सम्बन्ध रहेको देखाउँछ। एन्टिअक्सिडेन्टको रूपमा, ग्लुटाथियोनले लेन्स कोशिकाहरूमा अक्सिडेटिभ क्षतिको प्रभावलाई कम गर्न र लेन्सको सामान्य कार्यलाई कायम राख्न सक्छ। उदाहरण को लागी, एक अध्ययन मा, ग्लुटाथियोन युक्त आँखा ड्रपहरू मोतियाबिन्दुका बिरामीहरूको उपचार गर्न प्रयोग गरियो, र यो देखियो कि बिरामीहरूको लेन्स अस्पष्टताको डिग्री कम भएको थियो, र उनीहरूको दृष्टि निश्चित हदसम्म सुधारिएको थियो ।.
रेटिनोप्याथीको रोकथाम र उपचार: रेटिनोप्याथी आँखाको सामान्य रोग हो, र यसको घटना अक्सिडेटिभ तनाव र सूजन प्रतिक्रिया जस्ता कारकहरूसँग सम्बन्धित छ। ग्लुटाथियोनले यसको एन्टिअक्सिडेन्ट प्रभावको माध्यमबाट, रेटिना तन्तुको अक्सिडेटिभ क्षतिलाई कम गर्न सक्छ, भडकाउने प्रतिक्रियालाई रोक्छ, र यसरी रेटिना कोशिकाहरूलाई बचाउन सक्छ। थप रूपमा, ग्लुटाथियोनले रेटिना कोशिकाहरूको चयापचय कार्यलाई पनि बढावा दिन सक्छ र रेटिनाको आत्म-मरम्मत क्षमता बढाउन सक्छ ।.
5. मल्टिपल स्क्लेरोसिसमा आवेदन
मल्टिपल स्क्लेरोसिसमा, न्यूरोनल डिजेनेरेशन अक्सिडेटिभ तनावसँग सम्बन्धित छ। Dimethyl fumarate (DMF) एक प्रभावकारी मौखिक उपचार विकल्प हो जुन रोगको गतिविधिलाई कम गर्न र रिल्याप्सिङ-रिमिटिङ मल्टिपल स्क्लेरोसिस भएका बिरामीहरूमा प्रगति गर्न प्रमाणित भएको छ। DMF ले ट्रान्सक्रिप्शन कारक आणविक कारक एरिथ्रोइड 2-सम्बन्धित कारक 2 (NRF2) सक्रिय गर्न सक्छ, जसले मुख्य सेलुलर एन्टिअक्सिडेन्ट ग्लुटाथियोन (GSH) को संश्लेषणमा वृद्धि गर्दछ, र भिट्रोमा महत्त्वपूर्ण न्यूरोप्रोटेक्टिभ प्रभाव छ। अध्ययनले पत्ता लगाएको छ कि DMF ले ग्लुटाथियोन रिडक्टेज (GSR) लाई प्रेरित गर्दछ, GSR प्रेरित गरेर ग्लुटाथियोनको रिसाइक्लिंग बढाउँछ।[१०] .
6. अल्जाइमर रोग मा आवेदन
अल्जाइमर रोग मा, amyloid β पेप्टाइड (Aβ) अल्जाइमर रोग (AD) को एक महत्वपूर्ण कारण मानिन्छ। फेरोप्टोसिस अक्सिडेटिभ सेल मृत्युको एक नयाँ मान्यता प्राप्त संयन्त्र हो जुन अत्यधिक एडीसँग सम्बन्धित छ। Tetrahydroxystilbene glucoside (TSG) एडी र वृद्ध माउस मोडेलहरूमा सिकाइ र स्मरणशक्ति कम गर्न लाभदायक छ। अध्ययनहरूले पत्ता लगाएको छ कि TSG ले APP/PS1 मुसामा फेरोप्टोसिस-सम्बन्धित प्रोटीन र इन्जाइमहरू विनियमित गरेर Aβ द्वारा हुने तंत्रिका कोशिकाहरूको न्यूरोटोक्सिक मृत्युको प्रतिरोध गर्दछ, सेलुलर अक्सिडेटिभ तनाव र भडकाउने क्षतिलाई कम गर्छ, र GSH/GPX4/ROS र Keap2/NArway साइन्सको सक्रियतालाई बढावा दिन्छ। थप रूपमा, TSG ले फेरोप्टोसिससँग सम्बन्धित मार्करहरूको अभिव्यक्तिलाई पनि कम गर्छ र अक्सिडेटिभ तनावको प्रतिरोध गर्ने क्षमता बढाउँछ [११].
7. श्वासप्रश्वाससम्बन्धी रोगहरूको सहायक उपचार
क्रोनिक अब्सट्रक्टिभ पल्मोनरी डिजिज (सीओपीडी) को सहायक उपचार: क्रोनिक अब्सट्रक्टिभ पल्मोनरी डिजिज भएका बिरामीहरूका लागि, श्वासनलीको सूजन र अक्सिडेटिभ तनाव रोगको प्रगतिको लागि प्रमुख कारकहरू हुन्। ग्लुटाथियोनले वायुमार्गको सूजनलाई कम गर्न सक्छ र यसको एन्टिअक्सिडेन्ट प्रभावको माध्यमबाट श्वासप्रश्वासको कार्यलाई सुधार गर्न सक्छ। यसले वायुमार्गमा फ्री रेडिकलहरू स्क्याभेन्ज गर्न सक्छ, वायुमार्गको उपकला कोशिकाहरूमा अक्सिडेटिभ तनावको क्षतिलाई कम गर्न सक्छ, र यसरी वायुमार्गको सूजनलाई कम गर्न सक्छ। थप रूपमा, ग्लुटाथियोनले प्रतिरक्षा कार्यलाई विनियमित गर्न र रोगजनकहरूको शरीरको प्रतिरोध बढाउन सक्छ [१२].
8. आइलेट रोगहरूमा आवेदन
ग्लुटाथियोन रिडक्टेज र ग्लुटाथियोन पेरोक्सिडेज आइलेट रोग र मधुमेह रोगीहरूको सीरममा मूल्याङ्कन गरियो। अनुसन्धानले देखाउँछ कि यस रोगमा, एन्टिअक्सिडेन्टसँग अक्सिडेन्टको अनुपातको असंतुलन अवस्थासँग सम्बन्धित हुन सक्छ, र विशिष्ट संयन्त्रको थप अध्ययन गर्न बाँकी छ [१३].
निष्कर्ष
ग्लुटामिक एसिड, सिस्टीन र ग्लाइसिनले बनेको ट्राइपेप्टाइड यौगिकको रूपमा, ग्लुटाथियोनले जीवित जीवहरूमा विभिन्न प्रकारको मुख्य भूमिका खेल्छ, जस्तै एन्टिअक्सिडेशन, डिटोक्सिफिकेशन, प्रतिरक्षा नियमन, र प्रजनन प्रणालीमा प्रभाव। यसको खोज पछि, अनुसन्धानको गहनता संग, चिकित्सा क्षेत्रमा यसको प्रयोग मूल्य लगातार हाइलाइट गरिएको छ, रक्सी कलेजो रोग, पार्किन्सन रोग, हृदय रोग, र आँखा रोगहरु जस्तै विभिन्न रोगहरु को उपचार वा रोकथाम मा सकारात्मक प्रभाव देखाउँदै। यद्यपि केही पक्षहरूमा प्रयोग गर्ने संयन्त्र र केही रोगहरूमा यसको भूमिकाहरूको विवरणहरू थप अन्वेषण गर्न बाँकी छ, ग्लुटाथियोनले शरीरको स्वास्थ्य कायम राख्न र रोगहरूको रोकथाम र उपचारमा ठूलो महत्त्व राख्छ।
लेखक को बारेमा
माथि उल्लेखित सामग्रीहरू सबै अनुसन्धान, सम्पादन र कोसर पेप्टाइड्स द्वारा संकलित छन्।
वैज्ञानिक जर्नल लेखक
रोम ओ धेरै प्रतिष्ठित संस्थाहरूसँग सम्बद्ध एक निपुण शोधकर्ता हो, जसमा लुइसियाना स्टेट युनिभर्सिटी हेल्थ साइंसेज सेन्टर श्रेभपोर्ट, लुइसियाना स्टेट युनिभर्सिटी सिस्टम, पिट्सबर्ग विश्वविद्यालय, र मिशिगन विश्वविद्यालय। उनको काम Lsuhs Shreveport र Michigan Med जस्ता उल्लेखनीय संस्थाहरूसँग सम्बन्धित छ, जसले महत्त्वपूर्ण शैक्षिक र चिकित्सा वातावरणमा उनको सक्रिय संलग्नतालाई प्रतिबिम्बित गर्दछ।
रोम ओ को अनुसन्धान रुचिहरु विषय कोटिहरु को एक विस्तृत सरणी मा फैलिएको छ। उनको विशेषज्ञता कार्डियोभास्कुलर प्रणाली र कार्डियोलोजी, हेमाटोलोजी, एन्डोक्राइनोलजी र मेटाबोलिज्म, बायोकेमिस्ट्री र आणविक जीवविज्ञान, र ग्यास्ट्रोएन्टेरोलजी र हेपाटोलोजीको क्षेत्रमा छ। अध्ययनका यी जटिल क्षेत्रहरूमा केन्द्रित क्यारियरको साथ, उहाँले चिकित्सा विज्ञानका यी महत्वपूर्ण शाखाहरूमा ज्ञान र समझको उन्नतिमा योगदान पुर्याएको छ। उद्धरणको सन्दर्भमा सूचीबद्ध छ [९]।
