|
1 комплект (10 флаконов)
| Количество: | |
|---|---|
▎ Исследования Весугена
Молекулярный фон
Весуген — это торговое обозначение, используемое в опубликованной литературе для синтетического трипептида Lys-Glu-Asp (KED). PubChem перечисляет лизилглутамиласпарагиновую кислоту под номером CID 87571363 с последовательностью KED, молекулярной формулой C15H26N4O8 и молекулярной массой примерно 390,39 г/моль. Опубликованные исследования изучали KED в системах клеточной культуры, животных и молекулярного моделирования; результаты остаются специфичными для экспериментальных условий, в которых они были получены.[9]
Прогресс исследований
В. Х. Хавинсон и его коллеги исследовали Весуген и пептид D-7 в тканеспецифичных клеточных культурах, полученных от молодых и старых животных, а также в культурах диссоциированных сосудистых эндотелиальных клеток. Авторы сообщили об увеличении экспрессии белка Ki-67, связанного с пролиферацией, после воздействия пептида. Анализ молекулярного докинга также использовался для моделирования возможных взаимодействий Весугена и D-7 с промоторной областью гена MKI67. В вычислительной модели оба пептида контактировали с последовательностью CATC в указанной области основного промотора. Поскольку этот компонент исследования был основан на молекулярном докинге, он поддерживает предложенную модель взаимодействия, а не прямую экспериментальную демонстрацию связывания пептидов с геномной ДНК в клетках.[2]
Владимир Хавинсон и его коллеги исследовали пептиды KED и EDR на мышиной модели 5xFAD и в связанных нейронных экспериментах. KED вводили внутрибрюшинно мышам 5xFAD в возрасте от 2 до 4 месяцев по протоколу исследования. Авторы сообщили, что KED имел тенденцию увеличивать нейропластичность гиппокампа и что KED и EDR были связаны с сохранением измерений дендритного позвоночника в экспериментальной модели. Молекулярное моделирование и стыковка пептида и ДНК были использованы для изучения возможных взаимодействий, зависящих от последовательности, в качестве предлагаемого механизма. Эти наблюдения были получены на модели генетически модифицированных мышей и вычислительных системах и не выявили эффектов у людей.[3]
Рис1. Измерения долговременной потенциации гиппокампа были зарегистрированы у мышей дикого типа и 5xFAD, подвергшихся воздействию физиологического раствора, EDR или KED в цитируемом исследовании.[3]
На исходном рисунке показан временной ход наклона fEPSP до и после индукции LTP, а также относительный наклон fEPSP, используемый для оценки пластичности. Определения групп, статистический анализ и полные условия эксперимента представлены в оригинальной публикации.[3]
Н.И. Чалисова с соавт. изучали Lys-Glu-Asp в органотипических культурах тканей нейроиммуноэндокринной системы и в модели ассоциативного обучения пчел. В экспериментах на культурах тканей авторы сообщили об изменениях в маркерах, связанных с пролиферацией и апоптозом, включая более высокие показатели Ki-67 и более низкие измерения р53 в культурах шишковидной железы, а также изменения в экспрессии CD5 и CD68. Величина некоторых ответов различалась в культурах, полученных от более молодых и старых животных. В публикации также сообщается об изменениях в измерениях ассоциативного обучения у медоносных пчел. Эти результаты описывают органотипическую культуру и поведенческие модели беспозвоночных, а не клинические результаты.
Н. С. Линькова с соавт. исследовали клеточный состав лимфоидной ткани шишковидной железы в органотипической культуре и сравнили несколько коротких пептидов. Авторы сообщили, что вилон и эпиталон влияют на дифференцировку избранных популяций лимфоцитов, тогда как трипептид везуген не изменяет дифференцировочную способность шишковидных иммунных клеток, но связан с повышенным пролиферативным потенциалом. Таким образом, в исследовании сообщалось о связанном с пролиферацией ответе на Весуген, но не было продемонстрировано тех же эффектов дифференцировки, которые наблюдались при использовании пептидов сравнения.[4]
Н. А. Красковская и соавт. использовали первичные нейроны гиппокампа мыши, подвергшиеся воздействию синаптотоксических состояний, связанных с амилоидом, в качестве модели in vitro. При концентрации, указанной в публикации, EDR была связана с увеличением количества грибовидных шипов на 71%, тогда как KED была связана с увеличением примерно на 20% по сравнению с модельным состоянием. Эти измерения были получены на культивируемых нейронах мышей и должны ограничиваться экспериментальной системой in vitro, описанной авторами.[5]
Л. С. Козина с соавт. оценили короткие регуляторные пептиды Пинеалон, Весуген, Вилон и Эпиталон в нескольких модельных системах in vitro. Авторы сообщили, что пептиды не продемонстрировали прямой антиоксидантной активности в использованных анализах, но изменили показатели перекисного окисления липидов в препаратах липопротеинов человека и увеличили стабильность мембран эритроцитов против осмотического гемолиза. Они также сообщили об изменениях во внутриклеточных измерениях активных форм кислорода и жизнеспособности нейрональных клеток с различиями в зависимости от пептидов в тестируемых системах. Работа проводилась in vitro и не выявила фармакологических или клинических эффектов in vivo.[6]
Елена Сахенберг и ее коллеги использовали систему трансдифференцировки in vitro, сочетающую микроРНК, факторы транскрипции и небольшие молекулы, для создания индуцированных нейрональных клеток из фетальных мезенхимальных стволовых клеток. KED, EDR и AEDG были оценены на более позднем этапе процесса. Авторы сообщили, что AEDG и KED были связаны со снижением экспрессии p21 на 15% и снижением активности бета-галактозидазы в 1,51–2,4 раза в условиях исследования. Пептиды существенно не изменили экспрессию TUj-1 или LaminB1. Эти результаты были получены с помощью разработанной модели дифференцировки in vitro.[7]
Рис2. Морфология клеток после воздействия коротких пептидов во время эксперимента по трансдифференцировке нейронов in vitro.[7]
На исходном рисунке показаны репрезентативные изображения фазово-контрастной микроскопии индуцированных нейрональных клеток в контрольных условиях и после воздействия AEDG, EDR или KED. Полные условия культивирования и аналитические методы описаны в оригинальной публикации.[7]
Серджио Капути и его коллеги исследовали AED, KED, KE, AEDG и смесь четырех пептидов в стволовых клетках периодонтальной связки человека, культивированных в базальных и нейроиндуктивных условиях. Используя иммунофлуоресценцию и вестерн-блот-анализ, авторы сообщили о более высокой экспрессии GAP43 и нестина в выбранных условиях KED и смеси пептидов. Измерения МТТ также показали зависящие от пептидов и времени различия в пролиферации клеток. Эти результаты были получены на культивируемых стволовых клетках человека и представляют собой результаты, связанные с дифференцировкой in vitro, а не свидетельства неврологических эффектов у людей.[8]
Рис3. Об измерениях пролиферации МТТ сообщалось в стволовых клетках периодонтальной связки человека, подвергнутых воздействию AEDG, KE, AED, KED или смеси пептидов.[8]
На исходном рисунке сравниваются измерения оптической плотности через 24, 48 и 72 часа и через 1 неделю культивирования. Статистические сравнения и полные условия культивирования представлены в оригинальной публикации.[8]
Ограничения исследований
Доказательства, изложенные выше, преимущественно основаны на органотипических культурах, первичных культурах нейронов, системах стволовых клеток, животных моделях и анализах молекулярного докинга. Эти подходы решают различные экспериментальные вопросы и не являются напрямую взаимозаменяемыми. В частности, молекулярная стыковка KED с промотором MKI67 является вычислительной моделью и сама по себе не демонстрирует прямого геномного связывания или взаимодействия с мишенью в живых клетках.[2] В цитируемых исследованиях также не установлены фармакокинетический профиль, системная биодоступность, долгосрочная безопасность или клиническая эффективность Весугена/КЕД у человека.
Еще одним ограничением является концентрация доказательств внутри пересекающихся исследовательских групп и ограниченное независимое воспроизведение предложенных механизмов пептид-биорегулятор. KED также вызывал разные ответы в зависимости от типа клеток: например, Весуген увеличивал пролиферативный потенциал без изменения дифференцировки иммунных клеток в культурах шишковидной железы, в то время как другие исследования сообщали об изменениях в маркерах нейронов или стволовых клеток. [4,7,8] Поэтому интерпретация должна оставаться привязанной к точной идентичности пептида, модели, концентрации и конечной точке, о которых сообщается в каждой публикации.
COCER Peptides представляет Весуген (KED) исключительно для лабораторных исследований и аналитического использования. Он не предназначен для использования человеком или ветеринарии. Этот материал не представлен как одобренный FDA лекарственный препарат, лекарство, пищевая добавка, медицинское устройство или ветеринарный продукт. Описанное выше исследование обобщает результаты, представленные в сторонних публикациях, и не является заявлением о клинической эффективности, безопасности, диагностике, лечении, профилактике или инструкцией по применению.
