Cocer Peptidesek 
duela hilabete 1
WEB GUNE HONETAN EMATEN DITUZTEN ARTIKULU ETA PRODUKTUEN INFORMAZIO GUZTIAK INFORMAZIOA HABALTZEKO ETA HEZKUNTZA HELBURUKO BAKARRIK DIRA.
Webgune honetan eskaintzen diren produktuak in vitro ikerketarako soilik dira. In vitro ikerketa (latinez: *in glass*, beira-ontzietan esanahia) giza gorputzetik kanpo egiten da. Produktu hauek ez dira farmazia, ez ditu AEBko Elikagaien eta Droga Administrazioak (FDA) onartu eta ez dira erabili behar gaixotasun, gaixotasun edo gaixotasunik saihesteko, tratatzeko edo sendatzeko. Legeak erabat debekatuta dago produktu horiek gizakien edo animalien gorputzean edozein modutan sartzea.
KPVri buruzko oinarrizko informazioa
KPV propietate antiinflamatorio esanguratsuak dituen tripptido bat da, eta horri esker alor askotan zeresana izan dezake.
1. Irudia HA-KPV-NP-en efektu terapeutikoak UCren aurka HA-KPV-NP-en ahozko administrazioak hidrogelean (kitosanoa/alginatoa) txertatutako HA-KPV-NPen efektu terapeutiko konbinatuak ematen ditu UCren aurkako efektu terapeutiko konbinatuak, mukosaren sendatzea azkartuz eta hantura arinduz.
KPVren hanturaren aurkako mekanismoa
1. Zelula seinaleztapen-bideen erregulazioa
NF-κB Seinale Bidea: NF-κB funtsezko transkripzio-faktore bat da hanturazko erantzunetan paper nagusia jokatzen duena. Zelulak hanturazko estimuluetara jasaten direnean, NF-κB zitoplasmatik nukleora translokatzen da, eta hanturazko zitokinen geneen transkripzioari hasiera emanez. KPV-k NF-κB aktibazioa galarazi dezake. Giza hesteetako epitelioko zeluletan eta giza T zeluletan, zelulak hanturazko zitokinekin estimulatu ziren, eta KPV gehitu zen aldi berean. NF-κB luciferase gene berriemailearen entseguak, proteinen immunoblotting, denbora errealeko transkripzio alderantzizko polimerasaren kate-erreakzioa eta entzimekin lotutako immunosorbent test (ELISA) bezalako metodoak erabiliz, aurkitu zen KPV-k kontzentrazio nanomolarretan NF-κB aktibazioa inhibitu dezakeela, eta horrela hantura pro-kinesikoaren jariapena murrizten du. Mekanismo hau funtsezkoa da hesteetako hantura erregulatzeko, hesteetako epitelio-zeluletan eta immunitate-zeluletan NF-κB-ren gehiegizko aktibazioa hesteetako hanturazko gaixotasunen (IBD) eta hesteetako hanturazko beste baldintza batzuen funtsezko ezaugarria baita.
MAP kinasaren seinaleztapen-bidea: mitogenoek aktibatutako proteina kinasa (MAPK) seinaleztapen-bidea hanturazko erantzunetan erregulazio-bide garrantzitsu bat da, zelulaz kanpoko seinalez erregulatutako kinasa (ERK), c-Jun N-terminal kinase (JNK) eta p38 MAPK barne. Kinasa hauek zelulak hanturazko estimuluetara jasaten direnean aktibatzen dira, beheranzko transkripzio-faktoreen fosforilazioa eraginez eta hanturarekin lotutako geneen adierazpena sustatuz. KPV-k MAP kinasaren hanturazko seinaleztapen-bidea ere inhibi dezake. Zelulak hanturazko estimuluetara jasaten direnean, KPV-k MAPK aktibazioa blokeatu dezake, beheranzko transkripzio-faktoreen fosforilazioa murriztuz, eta, ondorioz, hanturazko zitokinen ekoizpena murriztuz. Hanturazko egoeran, p38 MAPK aktibatzea TNF-α eta IL-6 bezalako zitokina proinflamatorioen adierazpena areagotzea dakar, KPV-k p38 MAPK jarduera inhibitu dezakeen bitartean, zitokina horien jariapena murriztuz eta, ondorioz, hanturazko erantzuna arinduz.
2. Zelula-garraiatzaileen bidezko efektuak
PepT1 garraiatzailea: PepT1 di/tripeptido garraiatzailea da normalean heste meharrean adierazia baina kolonean induzitua IBD-n zehar. KPVren antiinflamatorioak PepT1-ek partzialki bideratzen ditu. Hartze-esperimentuetan, KPV hotza hPepT1-en inhibitzaile lehiakor gisa erabili zen erradioaktibo markatutako substratu gisa, edo [⊃3;H]KPV erabili zen KPVren hartzearen ezaugarri zinetikoak zehazteko. KPV zelula immunologikoak eta hesteetako epitelio-zelulak sartzen ditu hPepT1 bidez. Horrek adierazten du PepT1ek, garraiatzaile gisa, KPV zeluletan sartzea errazten duela bere hanturaren aurkako efektuak gauzatzeko. PepT1 funtzioa inhibitzen denean, zeluletan sartzen den KPV-kopurua gutxitzen da, eta horren kontrako efektuak ahuldu egiten dira. PepT1 adierazpenaren beherakada duten zelula-ereduetan, kontzentrazio berean administratzen denean ere, KPV-k NF-κB aktibazioan eragin inhibitzaileak nabarmen murrizten ditu eta hanturazko zitokinen jariapena murrizten du PepT1 adierazpen normala duten zelulekin alderatuta, PepT1-ek KPVren antiinflamatorioaren mekanismoan duen bitartekaritza-funtzioa areago baieztatuz.
3. Hanturazko zitokinen erregulazioa
Zitokina proinflamatorioen inhibizioa: KPV-k nabarmen inhibitu dezake hanturazko zitokina anitzen ekoizpena eta askapena. TNF-α hanturazko erantzunetan funtsezko zitokina da, zelula immunologikoak aktibatzeko, beste zitokina proinflamatorio batzuen ekoizpena eragiteko eta ehunen kalteak eragiteko gai dena. Hanturazko hainbat eredutan, TNF-α-ren adierazpen mailak nabarmen murriztu ziren KPV tratamenduaren ondoren. Esaterako, sodio sulfatoak eragindako sagu kolitisaren eredu batean, KPV-rekin tratamenduak TNF-α-ren mRNA-ren adierazpenaren murrizketa nabarmena eragin zuen koloneko ehunean, denbora errealeko RT-PCR bidez detektatu bezala, eta TNF-α-ren proteina-edukiaren jaitsiera nabarmena serumean, ELISAk detektatu bezala. IL-1β, IL-6 eta beste zitokin proinflamatorio batzuk ere inhibitu zituen KPV-k. IL-1β-ek hantura-jauzi-erreakzio bat eragin dezake, beste hanturazko bitartekari batzuen askapena sustatuz. KPV-k bere adierazpena eta jariapena murriztu ditzake hanturazko ehunetan, horrela hanturazko erantzunaren intentsitatea arinduz.
Antiinflamatorioen zitokinen sustapena: KPV-k hanturaren aurkako zitokinak inhibitzeaz gain, antiinflamatorioen zitokinen adierazpena susta dezake. Interleukina-10 (IL-10) hanturaren aurkako zitokina garrantzitsu bat da, zelula immunologikoen aktibazioa inhibitu eta hanturazko zitokinen ekoizpena murrizteko.
4. Immunitate-zelulen erregulazioa
T zelulen funtzioaren erregulazioa: T zelulek funtzio erabakigarria dute erantzun immunologikoan eta hanturaren erregulazioan. Hanturazko baldintzetan, T zelulak aktibatzen dira eta hanturazko zitokinak jariatzen dituzte. Ikerketek frogatu dute KPVk T zelulen funtzioa erregula dezakeela. Jurkat giza T zelula-lerroarekin egindako esperimentuetan, Jurkat zelulak hanturazko zitokinekin estimulatzen zirenean, KPV gehitzeak T zelulen aktibazioa inhibitu zuen eta IFN-γ bezalako zitokin proinflamatorioen jariapena murriztu zuen. Hau T zelulen barruan NF-κB eta MAPK seinaleztapen bideak inhibituz lor daiteke. Gainera, animalia-eredu batzuetan, hala nola CD45RB(hi) koloneko hantura ereduan, KPV tratamenduak T zelulen infiltrazioa eta hesteetan funtzionatzea erregulatu dezake, hanturarekin lotutako T zelulen azpimultzoak murrizten ditu, hala nola Th1 eta Th17 zelulak, eta T zelula erregulatzaileen proportzioa areagotu, hesteetako hantura arintzeko.
Makrofagoen funtzioaren modulazioa: makrofagoak zelula immune garrantzitsuak dira hanturazko erantzunean eta klasikoki aktibatutako M1 makrofagoetan eta bestela aktibatutako M2 makrofagoetan sailka daitezke haien aktibazio-egoeraren arabera. M1 makrofagoek hanturazko zitokina kopuru handiak jariatzen dituzte, eta M2 makrofagoek hanturaren aurkako eta ehunen konponketa funtzioak dituzte. KPV-k makrofagoen polarizazioa erregula dezake. In vitro esperimentuek erakutsi zuten makrofagoak lipopolisakaridoarekin (LPS) estimulatzen zirenean M1 motara polarizatzeko, KPV-ren administrazio bateratzeak makrofagoen polarizazioa inhibitzen zuela M1 motarako, M1 makrofagoen markatzaileen adierazpena murrizten zuela, eta haien polarizazioa sustatzen zuen bitartean M2 motarako, M2 macrophage arginase markatzaileen adierazpena areagotuz (-1 arg-1). In vivo hanturazko ereduetan, hala nola, DSS-k saguetan eragindako kolitisa, KPV-rekin tratamenduak koloneko ehunean M2 motarantz polarizatzen diren makrofago gehiago eragin zuen, horrela hanturazko erantzunak arinduz eta ehunen konponketa sustatuz.
5. Hesteetako epitelio-zeluletan babes-efektuak
Hesi epitelialaren funtzioa hobetzea: hesteetako epitelio-zelulek osatzen duten hesi fisikoa patogenoen eta substantzia kaltegarrien inbasioaren aurkako lehen defentsa-lerro gisa balio du. Hantura-egoeretan, hesteetako epitelio-hesiaren funtzioak kaltetuak bakterioen translokazioa eta endotoxina isuria eragiten ditu, hanturazko erantzunak are gehiago areagotuz. KPV-k hesteetako epitelio-zelulen hesi-funtzioa hobetu dezake. In vitro zelulen esperimentuek, non hesteetako epitelioko zelula-lerroak hanturazko ingurune bat simulatzeko hanturazko zitokinekin tratatzen ziren, lotura estuko proteinen (adibidez, ZO-1 eta occludinaren) adierazpena murriztu zuten eta hesi-funtzioa hondatu zuten. Hala ere, KPV gehitzeak lotura estuko proteinen adierazpena mantentzen du, zelulen arteko konexioak hobetzen ditu eta hesteetako epitelio-zelulen hesi-funtzioa berreskuratzen du. KPV-rekin tratatutako DSS-ek eragindako kolitiseko saguetan, immunohistokimikak eta Western blot-aren azterketak koloneko ehunean lotura estuko proteinen adierazpen areagotu eta hesteetako iragazkortasun murriztea agerian utzi zuten, eta horrek adierazten du KPV-k heste-epitelio-hesia in vivo babesten duela, substantzia kaltegarrien inbasioa murrizten duela eta hanturazko erantzunak arintzen dituela.
Epitelio-zelulen ugalketa eta konponketa sustatzea: hanturak heste-zelulen epitelioen kalteak eta heriotza eragin ditzake, heste-funtzio normala kaltetuz. KPV-k hesteetako epitelio-zelulen ugalketa eta konponketa sustatzeko gaitasuna du. In vitro zelula-hazkuntzako esperimentuek erakutsi zuten kaltetutako hesteetako epitelio-zelulak KPVrekin tratatzeak zelulen ugalketa hobetu zuela, Cell Counting Kit-ek (CCK-8) detektatu bezala. Gainera, immunofluoreszentzia-analisiak ugaltzen ari diren zelulen antigeno nuklearraren (PCNA) espresio handiagoa agerian utzi zuen, zelulak ugaltze-egoera aktiboan zeudela adieraziz. TNBS-ek eragindako ultzerako kolitis arratoi-eredu batean, KPV/SH-PGA hidrogelarekin tratatu ondoren, behaketa histologikoek agerian utzi zuten koloneko epitelio-zeluletan kalteak konpondu zirela eta kripta-egiturak pixkanaka normaltasunera itzuli zirela. Hau KPV-k zelula epitelialen ugalketa eta konponketa sustapenarekin zerikusia izan dezake, hantura arintzen eta heste-ehunen berreskurapena sustatzen laguntzen duena.
2. irudia KPV terapeutikoa da DSS kolitisean.
6. Efektu antioxidatzaileak
Estres oxidatiboarekin erlazionatutako markatzaileen erregulazioa: hanturak estres oxidatiboko erreakzioekin batera izaten da askotan, oxigeno-espezie erreaktiboen (ROS) eta nitrogeno-espezie erreaktiboen (RNS) produkzio handiagoarekin, zelulen eta ehunen oxidazio-kalteak eraginez. KPV-k efektu antioxidatzaileak erakusten ditu eta estres oxidatiboari lotutako markatzaileak erregula ditzake. Hanturazko eredu batzuetan, hala nola, kotoizko bolak eragindako saguaren granuloma ereduan eta arrautza zuriak eragindako arratoiaren bizkarraldeko aire-zakuaren sinovitisaren ereduan, malondialdehido (MDA) eta superoxido dismutasa (SOD) jarduera murriztua detektatu ziren hanturazko ehunetan. KPV tratamenduaren ondoren, MDA mailak nabarmen murriztu ziren eta SOD jarduera handitu zen. MDA lipidoen peroxidazioaren produktua da, eta bere maila murriztuek zeluletan lipidoen peroxidazioaren kaltea murriztu dela adierazten dute; SOD entzima antioxidatzaile garrantzitsu bat da, eta bere jarduera handitzeak erradikal askeak kentzeko gaitasun handiagoa adierazten du. KPV-k hanturazko ehunetan kalte oxidatiboa arin dezake estres oxidatibo maila erregulatuz, eta horrela hanturaren aurkako efektuak eragin ditzake.
7. Beste Mekanismo Potentzialak
Melanokortina-hartzailearekin erlazioa: KPV α-MSHtik eratorritako tripptido bat da. Bere hanturaren aurkako efektuak MC1R seinaleztapenetik partzialki independenteak diren arren, zenbait testuingurutan MC1Rrekin lotu daitezke. MC1Re/e adierazten duten animalietan, DSS-k eragindako kolitisaren ondoren KPV tratamenduak hanturaren aurkako efektu esanguratsuak izan zituen oraindik, tratamendu taldeko animalia guztiak DSS-k eragindako kolitisaren garaian heriotzatik erreskatatu zituen, eta KPV-ren hanturaren aurkako efektuak MC1R seinaleztapenetik gutxienez partzialki independenteak direla adieraziz. MC1R adierazpen normala duten animalietan, KPV-k hanturaren aurkako efektuak areagotu ditzake MC1Rrekin elkarreraginean edo beheranzko seinaleztapen bideak erregulatuz.
KPVren antiinflamatorioak
1. Hesteetako hantura ereduetan eginkizuna
DSS-k eragindako kolitisaren eredua: DSS-ek eragindako sagu-kolitisaren ereduan, KPV-k hanturaren aurkako efektu esanguratsuak erakutsi zituen. Pisu aldaketei dagokienez, KPVrekin tratatutako saguek pisua lehenago berreskuratu zuten eta neurri handiagoan tratatu gabeko saguekin alderatuta. Behaketa histologikoek KPV-rekin tratatutako saguen koloneko ehunean hanturazko infiltrazioaren murrizketa nabarmena agerian utzi zuten, eta mieloperoxidasaren (MPO) jardueraren murrizketa nabarmena baieztatu zen. MPO neutrofiloetan dagoen entzima bat da, eta bere jarduera-mailak ehunetan hanturazko zelulen infiltrazioaren neurria islatzen du. KPV tratamenduaren ondoren MPO jardueraren murrizketak koloneko ehunean neutrofiloen infiltrazioa gutxitu eta hanturazko erantzunak arintzen ditu. Koloneko ehunetan, TNF-α eta IL-1β bezalako zitokina proinflamatorioen mRNA adierazpena detektatuz, KPV tratamenduak nabarmen murrizten zituela zitokina proinflamatorio horien adierazpen mailak aurkitu zen. KPV-k DSS-ek eragindako kolitisaren sintomak arindu zituen hainbat alderditatik, besteak beste, hanturazko zelulen infiltrazioa murriztea, hanturazko faktorearen adierazpena murriztea eta pisua berreskuratzea sustatzea.
CD45RB(hi) koloneko hantura eredua: CD45RB(hi) koloneko hantura ereduan, KPV-k hanturaren aurkako efektu onak ere erakutsi zituen. Eredu hau CD45RB oso adierazgarria duten T zelulak sagu immunoeskasietara transferituz sortu zen. KPV tratamenduaren ondoren, saguek hanturazko sintomak hobetu zituzten, pisua pixkanaka berreskuratzen zuten eta azterketa histologikoak hesteetako hantura aldaketak murriztu zituzten. KPV-k tratatutako taldeak hanturazko zelulen infiltrazioa gutxitu zuen eta kripten egiturazko kaltea murriztu zuen heste-ehunetan, eta adieraziz KPV-k CD45RB(hi)-k eragindako heste-hantura modu eraginkorrean arintzen duela eta heste-ehunen egitura eta funtzio normala berreskuratzen du.
TNBS-k eragindako kolitis ultzeragarria eredua: TNBS-ek eragindako kolitis ultzeragarria arratoi-ereduan, KPV-k efektu terapeutiko esanguratsuak ere erakutsi zituen. Arratoiei KPV/SH-PGA hidrogela rectalki eman ondoren, kolitisaren sintomak nabarmen hobetu ziren. Arratoien pisu-galera maila arindu egin zen eta gaixotasunaren jarduera-indizea (DAI) puntuazioa murriztu zen. DAI puntuazioak arratoien gorputz-pisuaren aldaketak, fekalen ezaugarriak eta hematokesia bezalako adierazleak hartzen ditu kontuan. Bere murrizketak adierazten du KPV/SH-PGA hidrogelak modu eraginkorrean arindu dezakeela TNBS-ek eragindako ultzerako kolitisaren larritasuna. KPV/SH-PGA hidrogelaren tratamenduak arratoietan kolon laburtzea, koloneko mieloperoxidasa maila murriztea eta koloneko egitura morfologikoa berreskuratzen ditu, epitelio-hesia, kriptak eta zelula osorik barne. Koloneko ehunetan ere nabarmen murriztu zen hanturazko zitokinen, TNF-α eta IL-6en adierazpena, KPV-ren efektu antiinflamatorioa gehiago frogatuz TNBS-ek eragindako kolitis ultzeragarriaren ereduan.
Ondorioa
KPV-k, propietate antiinflamatorioak dituen tripeptido gisa, efektu itxaropentsuak erakusten ditu hesteetako hanturaren eta hanturarekin lotutako beste hainbat gaixotasunen prebentzioan eta tratamenduan. Bere hanturaren aurkako mekanismoek hainbat alderdi hartzen dituzte barne, besteak beste, seinaleztapen zelularreko bideen erregulazioa, estres antioxidatzailea eta apoptosiaren eta autofagiaren modulazioa.
Iturriak
[1] Shao W, Chen R, Lin G, et al. KPV tripeptidoa harrapatzen duen hidrogel mukoadhesivo in situ: kimioterapiak eragindako ahoko mukositisaren aurkako hantura, bakterioen eta konponketa-efektua [J]. Biomaterialen Zientzia, 2021,10(1):227-242.DOI:10.1039/d1bm01466h.
[2] Sun J, Xue P, Liu J, et al. Cysteamine-Grafted γ-Polyglutamic Acid Egonkortutako Tripeptide KPV auto-gurutzatutako hidrogelaren hidrogelak, arratoietan TNBS-ek eragindako kolitis ultzeragarria arintzeko [J]. Acs Biomaterials Science & Engineering, 2021,7(10):4859-4869.DOI:10.1021/acsbiomaterials.1c00792.
[3] Xiao B, Xu Z, Viennois E, et al. KPV tripeptidoaren ahoz bideratua azido hialuronikoz funtzionalizatutako nanopartikulen bidez modu eraginkorrean arintzen du kolitis ultzeratiboa [J]. Terapia Molekularra, 2017,25(7):1628-1640.DOI:10.1016/j.ymthe.2016.11.020.
[4] Dalmasso G, Charrier-Hisamuddin L, Nguyen H, et al. P-078: PepT1-en bitartez KPV-k tripiptidoaren harketak hesteetako hantura murrizten du [J]. Hesteetako hanturazko gaixotasunak, 2008,14(suppl_1):S32.DOI:10.1097/00054725-200801001-00111.
[5] Kannengiesser K, Maaser C, Heidemann J, et al. Melanokortinatik eratorritako KPV tripeptidoak hanturaren aurkako potentziala du hesteetako hanturazko gaixotasunaren muineko ereduetan [J]. Hesteetako hanturazko gaixotasunak, 2008,14(3):324-331.DOI:10.1002/ibd.20334.
Ikerketarako soilik erabilgarri dagoen produktua:
