Аўтар Cocer Peptides 
1 месяц таму
УСЕ АРТЫКУЛЫ І ІНФАРМАЦЫЯ ПА ПРАДУКТАХ, РАЗМЕШЧАНЫЯ НА ГЭТЫМ ВЭБ-САЙЦЕ, ПРЫЗНАЧАНЫ ВЫКЛЮЧНА ДЛЯ РАСПАЎСЮДЖЭННЯ ІНФАРМАЦЫІ І АДУКАЦЫЙНЫХ МЭТАЎ.
Прадукты, прадстаўленыя на гэтым сайце, прызначаны выключна для даследаванняў in vitro. Даследаванне in vitro (лац. *in glass*, што азначае ў шкляным посудзе) праводзіцца па-за межамі чалавечага цела. Гэтыя прадукты не з'яўляюцца фармацэўтычнымі прэпаратамі, не былі адобраны Упраўленнем па кантролі за харчовымі прадуктамі і лекамі ЗША (FDA) і не павінны выкарыстоўвацца для прафілактыкі, лячэння або лячэння любых захворванняў, хвароб або хвароб. Законам катэгарычна забаронена ўводзіць гэтыя прадукты ў арганізм чалавека і жывёлы ў любой форме.
Асноўная інфармацыя аб КПВ
KPV - гэта трыпептыд са значнымі супрацьзапаленчымі ўласцівасцямі, якія дазваляюць яму гуляць важную ролю ў многіх галінах.
Малюнак 1. Тэрапеўтычны эфект HA-KPV-NPs супраць UC Пероральное ўвядзенне HA-KPV-NPs, убудаваных у гідрагель (хітазан/альгінат), дае камбінаваны тэрапеўтычны эфект супраць UC за кошт паскарэння гаення слізістай і палягчэння запалення.
Супрацьзапаленчы механізм КПВ
1. Рэгуляцыя клеткавых сігнальных шляхоў
Сігнальны шлях NF-κB: NF-κB з'яўляецца ключавым фактарам транскрыпцыі, які гуляе цэнтральную ролю ў запаленчых рэакцыях. Калі клеткі падвяргаюцца ўздзеянню запаленчых стымулаў, NF-κB перамяшчаецца з цытаплазмы ў ядро, ініцыюючы транскрыпцыю генаў провоспалительных цітокіны. KPV можа інгібіраваць актывацыю NF-κB. У эпітэліяльных клетках кішачніка чалавека і Т-клетках чалавека клеткі стымулявалі празапаленчымі цітокінамі і адначасова дадавалі KPV. Выкарыстоўваючы такія метады, як рэпарцёрны аналіз гена люцыферазы NF-κB, імунаблотынг бялкоў, палімеразную ланцуговую рэакцыю зваротнай транскрыпцыі ў рэжыме рэальнага часу і імунаферментны аналіз (ELISA), было выяўлена, што KPV у нанамалярных канцэнтрацыях можа інгібіраваць актывацыю NF-kB, тым самым зніжаючы сакрэцыю празапаленчых цітокіны. Гэты механізм мае вырашальнае значэнне ў рэгуляцыі запалення кішачніка, паколькі празмерная актывацыя NF-κB у эпітэліяльных клетках кішачніка і імунных клетках з'яўляецца ключавой асаблівасцю запаленчага захворвання кішачніка (ВЗК) і іншых запаленчых станаў кішачніка.
Сігнальны шлях MAP-кіназы: сігнальны шлях мітаген-актываванай пратэінкіназы (MAPK) з'яўляецца яшчэ адным важным рэгулятарным шляхам у запаленчых рэакцыях, уключаючы пазаклеткавую кіназу, якая рэгулюецца сігналам (ERK), N-канцавую кіназу c-Jun (JNK) і p38 MAPK. Гэтыя киназы актывуюцца, калі клеткі падвяргаюцца ўздзеянню запаленчых стымулаў, што прыводзіць да фасфаралявання фактараў транскрыпцыі ніжэй па плыні і спрыяе экспрэсіі генаў, звязаных з запаленнем. KPV таксама можа інгібіраваць запаленчы сігнальны шлях MAP-киназы. Калі клеткі падвяргаюцца ўздзеянню запаленчых стымулаў, KPV можа блакаваць актывацыю MAPK, памяншаючы яго фасфараляванне ніжэйстаячых фактараў транскрыпцыі, тым самым зніжаючы выпрацоўку празапаленчых цітокіны. У стане запалення актывацыя p38 MAPK прыводзіць да павелічэння экспрэсіі провоспалительных цітокінаў, такіх як TNF-α і IL-6, у той час як KPV можа інгібіраваць актыўнасць p38 MAPK, зніжаючы сакрэцыю гэтых цітокінаў і, такім чынам, палягчаючы запаленчую рэакцыю.
2. Эфекты, апасродкаваныя клеткавым транспарцёрам
Транспарцёр PepT1: PepT1 - гэта ды/трыпептыдны транспарцёр, які звычайна экспрэсуецца ў тонкім кішачніку, але індукуецца ў тоўстай кішцы падчас ВЗК. Супрацьзапаленчае дзеянне KPV часткова апасродкавана PepT1. У эксперыментах па паглынанні халодны KPV выкарыстоўваўся ў якасці канкурэнтнага інгібітара для hPepT1 у якасці радыеактыўна пазначанага субстрата, або [⊃3;H]KPV выкарыстоўваўся для вызначэння кінэтычных характарыстык паглынання KPV. KPV пранікае ў імунныя клеткі і эпітэліяльныя клеткі кішачніка праз hPepT1. Гэта паказвае на тое, што PepT1, як транспарцёр, палягчае трапленне KPV у клеткі для аказання супрацьзапаленчага дзеяння. Калі функцыя PepT1 інгібіруецца, колькасць КПВ, які паступае ў клеткі, памяншаецца, і адпаведна саслабляецца яго супрацьзапаленчае дзеянне. У клеткавых мадэлях з накдаўнам экспрэсіі PepT1, нават пры ўвядзенні ў аднолькавай канцэнтрацыі, KPV дэманструе значна паніжаны інгібіруючы эфект на актывацыю NF-κB і паніжаную сакрэцыю провоспалительных цітокінаў у параўнанні з клеткамі з нармальнай экспрэсіяй PepT1, што яшчэ больш пацвярджае вырашальную пасярэдніцкую ролю PepT1 у супрацьзапаленчым механізме KPV.
3. Рэгуляцыя цітокіны запалення
Інгібіраванне празапаленчых цітокіны: KPV можа істотна інгібіраваць выпрацоўку і вызваленне некалькіх празапаленчых цітокіны. TNF-α з'яўляецца ключавым цітокіны ў запаленчых рэакцыях, здольны актываваць імунныя клеткі, індукаваць выпрацоўку іншых провоспалительных цітокіны і выклікаць пашкоджанне тканін. У розных мадэлях запалення ўзроўні экспрэсіі TNF-α былі значна зніжаны пасля лячэння KPV. Напрыклад, у мадэлі мышынага каліту, выкліканага сульфатам натрыю, лячэнне KPV прывяло да значнага зніжэння экспрэсіі мРНК TNF-α ў тканіны тоўстай кішкі, як выяўлена з дапамогай RT-PCR у рэальным часе, і значнага зніжэння ўтрымання бялку TNF-α ў сыроватцы крыві, як выяўлена з дапамогай ELISA. IL-1β, IL-6 і іншыя провоспалительные цітокіны таксама былі інгібіраваныя KPV. IL-1β можа выклікаць каскадную рэакцыю запалення, спрыяючы вызваленню іншых медыятараў запалення. KPV можа паменшыць яго экспрэсію і сакрэцыю ў запаленчых тканінах, тым самым змякчаючы інтэнсіўнасць запаленчай рэакцыі.
Стымуляванне супрацьзапаленчых цітокінаў: у дадатак да інгібіравання провоспалительных цітокінаў, KPV таксама можа спрыяць экспрэсіі супрацьзапаленчых цітокінаў. Інтэрлейкін-10 (IL-10) - важны супрацьзапаленчы цітокіны, які можа інгібіраваць актывацыю імунных клетак і зніжаць выпрацоўку провоспалительных цітокіны.
4. Рэгуляцыя імунных клетак
Рэгуляцыя функцыі Т-клетак: Т-клеткі гуляюць вырашальную ролю ў імунных рэакцыях і рэгуляцыі запалення. Ва ўмовах запалення Т-клеткі актывуюцца і вылучаюць провоспалительные цітокіны. Даследаванні паказалі, што KPV можа рэгуляваць функцыю Т-клетак. У эксперыментах з лініяй Т-клетак чалавека Jurkat, калі клеткі Jurkat стымулявалі празапаленчымі цітокінамі, даданне KPV інгібіравала актывацыю Т-клетак і зніжала сакрэцыю празапаленчых цітокіны, такіх як IFN-γ. Гэта можа быць дасягнута шляхам інгібіравання сігнальных шляхоў NF-κB і MAPK у Т-клетках. Акрамя таго, у некаторых мадэлях на жывёл, такіх як мадэль запалення тоўстай кішкі CD45RB(hi), лячэнне KPV можа рэгуляваць інфільтрацыю і функцыю Т-клетак у кішачніку, памяншаць звязаныя з запаленнем падгрупы Т-клетак, такіх як клеткі Th1 і Th17, і павялічваць долю рэгулятарных Т-клетак, палягчаючы такім чынам запаленне кішачніка.
Мадуляцыя функцыі макрафагаў: макрафагі з'яўляюцца важнымі імуннымі клеткамі ў запаленчай рэакцыі і могуць быць класіфікаваны на класічна актываваныя макрафагі M1 і альтэрнатыўна актываваныя макрафагі M2 на аснове іх стану актывацыі. М1 макрофагов вылучаюць вялікую колькасць провоспалительных цітокіны, у той час як М2 макрофагов валодаюць супрацьзапаленчымі функцыямі і функцыямі аднаўлення тканін. KPV можа рэгуляваць палярызацыю макрофагов. Эксперыменты in vitro паказалі, што калі макрафагі стымуляваліся ліпапаліцукрыдамі (ЛПС) да палярызацыі да тыпу M1, сумеснае ўвядзенне KPV інгібіравала палярызацыю макрофагов да тыпу M1, зніжала экспрэсію макрофагальных маркераў M1, адначасова спрыяючы іх палярызацыі да тыпу M2, павялічваючы экспрэсію маркераў макрофагов M2 (напрыклад, аргіназа-1 Arg-1). У мадэлях запалення in vivo, такіх як DSS-індукаваны каліт у мышэй, лячэнне KPV прывяло да большай колькасці макрафагаў у тканінах тоўстай кішкі, якія палярызаваліся да тыпу M2, тым самым змякчаючы запаленчыя рэакцыі і спрыяючы аднаўленню тканін.
5. Ахоўнае дзеянне на эпітэліяльныя клеткі кішачніка
Павышэнне функцыі эпітэліяльнага бар'ера: фізічны бар'ер, утвораны эпітэліяльнымі клеткамі кішачніка, служыць першай лініяй абароны ад уварвання патагенаў і шкодных рэчываў. Пры запаленчых станах парушэнне бар'ернай функцыі кішачнага эпітэлія прыводзіць да транслокации бактэрый і ўцечцы эндатаксінаў, што яшчэ больш узмацняе запаленчыя рэакцыі. КПВ можа ўзмацняць бар'ерную функцыю эпітэліяльных клетак кішачніка. Эксперыменты in vitro з клеткамі, дзе эпітэліяльныя клеткі кішачніка апрацоўвалі празапаленчымі цітокінамі для імітацыі запаленчага асяроддзя, прывялі да зніжэння экспрэсіі бялкоў цеснага злучэння (такіх як ZO-1 і окклюдин) і пагаршэння бар'ернай функцыі. Аднак даданне KPV падтрымлівае экспрэсію бялкоў цеснага злучэння, узмацняе міжклеткавых сувязі і аднаўляе бар'ерную функцыю эпітэліяльных клетак кішачніка. У мышэй з DSS-індукаваным калітам, якія атрымлівалі KPV, імунагістахімія і Вестэрн-блот аналіз выявілі павышаную экспрэсію бялкоў цеснага злучэння ў тканінах тоўстай кішкі і зніжэнне пранікальнасці кішачніка, што паказвае на тое, што KPV абараняе кішачны эпітэліяльны бар'ер in vivo, памяншае ўварванне шкодных рэчываў і змякчае запаленчыя рэакцыі.
Спрыянне праліферацыі і аднаўленню эпітэліяльных клетак: запаленне можа выклікаць пашкоджанне і гібель эпітэліяльных клетак кішачніка, пагаршаючы нармальную функцыю кішачніка. КПВ валодае здольнасцю спрыяць праліферацыі і аднаўленню эпітэліяльных клетак кішачніка. Эксперыменты на культуры клетак in vitro паказалі, што апрацоўка пашкоджаных эпітэліяльных клетак кішачніка KPV павялічвае праліферацыю клетак, як выяўлена наборам для падліку клетак (CCK-8). Акрамя таго, імунафлюарэсцэнтны аналіз выявіў павышаную экспрэсію ядзернага антыгена праліферуючых клетак (PCNA), што паказвае на тое, што клеткі знаходзяцца ў актыўным праліфератыўным стане. На мадэлі пацучынага язвавага каліту, выкліканага TNBS, пасля лячэння гідрагелем KPV/SH-PGA гісталагічныя назіранні паказалі, што пашкоджанні эпітэліяльных клетак тоўстай кішкі аднаўляюцца, а структуры крыпты паступова вяртаюцца да нармальнага стану. Гэта можа быць звязана са спрыяннем KPV праліферацыі і аднаўленню эпітэліяльных клетак, што дапамагае палегчыць запаленне і спрыяць аднаўленню тканін кішачніка.
Малюнак 2 KPV з'яўляецца тэрапеўтычным пры каліце DSS.
6. Антыаксідантныя эфекты
Рэгуляцыя маркераў, звязаных з акісляльным стрэсам: Запаленне часта суправаджаецца рэакцыямі акісляльнага стрэсу з павелічэннем выпрацоўкі актыўных формаў кіслароду (АФК) і актыўных формаў азоту (РНС), што прыводзіць да акісляльнага пашкоджання клетак і тканак. KPV праяўляе антыаксідантныя эфекты і можа рэгуляваць маркеры, звязаныя з акісляльным стрэсам. У некаторых запаленчых мадэлях, такіх як мадэль мышынай гранулёмы, выкліканай ватовым шарыкам, і мадэль сінавіту спіннога паветранага мяшка пацукі, выкліканага яечным бялком, у запаленчых тканінах былі выяўлены павышаныя ўзроўні малановага дыяльдэгіду (MDA) і зніжаная актыўнасць супероксиддисмутазы (SOD). Пасля лячэння КПВ ўзровень МДА значна знізіўся, а актыўнасць СОД павялічылася. MDA з'яўляецца прадуктам перакіснага акіслення ліпідаў, і яго паніжаныя ўзроўні паказваюць на памяншэнне пашкоджання клетак перакісным акісленнем ліпідаў; СОД з'яўляецца важным антыаксідантным ферментам, і яго падвышаная актыўнасць азначае павышаную здольнасць паглынаць свабодныя радыкалы. KPV можа змякчыць акісляльнае пашкоджанне запаленчых тканін, рэгулюючы ўзровень акісляльнага стрэсу, тым самым аказваючы супрацьзапаленчае дзеянне.
7. Іншыя патэнцыйныя механізмы
Узаемасувязь з рэцэптарам меланакортыну: KPV - гэта трыпептыд, атрыманы з α-MSH. Нягледзячы на тое, што яго супрацьзапаленчыя эфекты часткова не залежаць ад перадачы сігналу MC1R, у пэўных кантэкстах яны могуць быць звязаны з MC1R. У жывёл, якія экспрэсуюць MC1Re/e, лячэнне KPV пасля каліту, выкліканага DSS, па-ранейшаму аказвала значны супрацьзапаленчы эфект, ратуючы ўсіх жывёл у групе лячэння ад гібелі падчас каліту, выкліканага DSS, што паказвае на тое, што супрацьзапаленчае дзеянне KPV па меншай меры часткова не залежыць ад перадачы сігналаў MC1R. У жывёл з нармальнай экспрэсіяй MC1R KPV можа ўзмацняць супрацьзапаленчае дзеянне, узаемадзейнічаючы з MC1R або рэгулюючы яго сігнальныя шляхі ўніз па плыні.
Супрацьзапаленчае дзеянне КПВ
1. Роля ў мадэлях запалення кішачніка
Мадэль каліту, выкліканага DSS: у мадэлі каліту ў мышэй, выкліканага DSS, KPV прадэманстраваў значны супрацьзапаленчы эфект. З пункту гледжання змены вагі, мышы, якія атрымлівалі KPV, аднавілі сваю вагу раней і ў большай ступені ў параўнанні з мышамі без лячэння. Гісталагічныя назіранні выявілі прыкметнае памяншэнне запаленчай інфільтрацыі ў тканіны тоўстай кішкі мышэй, якія атрымлівалі КПВ, што дадаткова пацвярджаецца значным зніжэннем актыўнасці миелопероксидазы (МПО). MPO - гэта фермент, які прысутнічае ў нейтрофілов, і ўзровень яго актыўнасці адлюстроўвае ступень інфільтрацыі запаленчых клетак у тканінах. Зніжэнне актыўнасці MPO пасля лячэння KPV паказвае на зніжэнне інфільтрацыі нейтрофілов ў тканіны тоўстай кішкі і паслабленне запаленчых рэакцый. Пры выяўленні экспрэсіі мРНК провоспалительных цітокінаў у тканінах тоўстай кішкі, такіх як TNF-α і IL-1β, было выяўлена, што лячэнне KPV значна зніжае ўзроўні экспрэсіі гэтых провоспалительных цітокінаў. KPV палягчае сімптомы каліту, выкліканага DSS, з розных аспектаў, уключаючы памяншэнне інфільтрацыі запаленчых клетак, зніжэнне экспрэсіі фактару запалення і спрыянне аднаўленню вагі.
Мадэль запалення тоўстай кішкі CD45RB(hi): У мадэлі запалення тоўстай кішкі CD45RB(hi) KPV таксама прадэманстраваў добры супрацьзапаленчы эфект. Гэтая мадэль была індукаваная шляхам пераносу Т-клетак, якія экспрэсуюць CD45RB, мышам з імунадэфіцытам. Пасля лячэння KPV у мышэй палепшыліся сімптомы запалення, паступовае аднаўленне вагі, а гістологіческое даследаванне паказала зніжэнне запаленчых змяненняў у кішачніку. Група, якая атрымлівала KPV, паказала зніжэнне інфільтрацыі запаленчых клетак і памяншэнне структурных пашкоджанняў крыпты ў тканінах кішачніка, што паказвае на тое, што KPV эфектыўна палягчае запаленне кішачніка, выкліканае CD45RB(hi), і аднаўляе нармальную структуру і функцыю тканіны кішачніка.
Мадэль язвавага каліту, выкліканага TNBS: у мадэлі язвавага каліту, выкліканага TNBS, у пацукоў KPV таксама прадэманстраваў значныя тэрапеўтычныя эфекты. Пасля рэктальнага ўвядзення гідрагелю KPV/SH-PGA пацукам сімптомы каліту прыкметна палепшыліся. Ступень страты вагі ў пацукоў палегчылася, а паказчык індэкса актыўнасці хваробы (DAI) знізіўся. Ацэнка DAI ўсебакова ўлічвае такія паказчыкі, як змены масы цела пацукоў, характарыстыкі кала і гематохезию. Яго зніжэнне паказвае на тое, што гідрагель KPV/SH-PGA можа эфектыўна палегчыць цяжар язвавага каліту, выкліканага TNBS. Апрацоўка гідрагелем KPV/SH-PGA таксама прадухіляе скарачэнне тоўстай кішкі ў пацукоў, зніжае ўзровень миелопероксидазы тоўстай кішкі і аднаўляе марфалагічную структуру тоўстай кішкі, уключаючы эпітэліяльны бар'ер, крыпты і непашкоджаныя бокаловидные клеткі. Экспрэсія провоспалительных цітокінаў, TNF-α і IL-6, у тканінах тоўстай кішкі таксама была значна зніжана, што дадаткова дэманструе супрацьзапаленчы эфект KPV на мадэлі язвавага каліту, індукаванага TNBS.
Заключэнне
KPV, як трыпептыд з супрацьзапаленчымі ўласцівасцямі, дэманструе перспектыўныя эфекты ў прафілактыцы і лячэнні запалення кішачніка і розных іншых захворванняў, звязаных з запаленнем. Яго супрацьзапаленчыя механізмы ўключаюць некалькі аспектаў, уключаючы рэгуляцыю клеткавых сігнальных шляхоў, антыаксідантны стрэс і мадуляцыю апоптозу і аўтафагіі.
Крыніцы
[1] Шао У, Чэнь Р, Лін Г і інш. Мукаадгезіўны гідрагель in situ, які захоплівае трыпептыд KPV: супрацьзапаленчае, антыбактэрыйнае і аднаўленчае ўздзеянне на выкліканы хіміятэрапіяй мукозіт паражніны рота [J]. Навука аб біяматэрыялах, 2021,10(1):227-242.DOI:10.1039/d1bm01466h.
[2] Сунь Дж, Сюэ П, Лю Дж і інш. Самастойна звязаны гідрагель стабілізаванага трыпептыда KPV з прышчэпленым цыстэамінам γ-поліглутамінавай кіслаты для палягчэння язвавага каліту, выкліканага TNBS, у пацукоў [J]. Acs Biomaterials Science & Engineering, 2021,7(10):4859-4869.DOI:10.1021/acsbiomaterials.1c00792.
[3] Xiao B, Xu Z, Viennois E і інш. Аральна мэтавая дастаўка трыпептыда KPV праз наначасціцы, функцыяналізаваныя гіалуронавай кіслатой, эфектыўна палягчае язвавы каліт [J]. Малекулярная тэрапія, 2017,25(7):1628-1640.DOI:10.1016/j.ymthe.2016.11.020.
[4] Dalmasso G, Charrier-Hisamuddin L, Нгуен H, і інш. P-078: Паглынанне трыпептыда KPV, апасродкаванага PepT1, памяншае запаленне кішачніка [J]. Запаленчыя захворванні кішачніка, 2008,14(suppl_1):S32.DOI:10.1097/00054725-200801001-00111.
[5] Kannengiesser K, Maaser C, Heidemann J і інш. Трыпептыд KPV, атрыманы з меланокортина, валодае супрацьзапаленчым патэнцыялам у мышыных мадэлях запаленчага захворвання кішачніка [J]. Запаленчыя захворванні кішачніка, 2008,14(3):324-331.DOI:10.1002/ibd.20334.
Прадукт даступны толькі для даследчага выкарыстання:
