Аутор Цоцер Пептидес 
пре 1 месец
СВИ ЧЛАНЦИ И ИНФОРМАЦИЈЕ О ПРОИЗВОДУ ДАНЕ НА ОВОМ ВЕБ САЈТУ СУ ИСКЉУЧИВО ЗА ДИСЕМИНАЦИЈУ ИНФОРМАЦИЈА И ЕДУКАТИВНЕ СВРХЕ.
Производи који се налазе на овој веб страници намењени су искључиво за ин витро истраживања. Ин витро истраживања (латински: *у стаклу*, што значи у стакленом посуђу) се спроводе ван људског тела. Ови производи нису фармацеутски производи, нису одобрени од стране америчке Управе за храну и лекове (ФДА) и не смеју се користити за превенцију, лечење или лечење било ког медицинског стања, болести или болести. Законом је строго забрањено уношење ових производа у људско или животињско тело у било ком облику.
Основне информације о КПВ
КПВ је трипептид са значајним антиинфламаторним својствима, што му омогућава да игра улогу у многим пољима.
Слика 1 Терапеутски ефекти ХА-КПВ-НП против УЦ Орална примена ХА-КПВ-НП уграђених у хидрогел (хитозан/алгинат) даје комбиноване терапеутске ефекте против УЦ убрзавањем зарастања слузокоже и ублажавањем упале.
Анти-инфламаторни механизам КПВ
1. Регулисање сигналних путева ћелије
НФ-κБ сигнални пут: НФ-κБ је кључни фактор транскрипције који игра централну улогу у инфламаторним одговорима. Када су ћелије изложене инфламаторним стимулансима, НФ-κБ се транслоцира из цитоплазме у језгро, иницирајући транскрипцију гена проинфламаторних цитокина. КПВ може инхибирати активацију НФ-κБ. У хуманим интестиналним епителним ћелијама и хуманим Т ћелијама, ћелије су стимулисане проинфламаторним цитокинима, а КПВ је додат истовремено. Користећи методе као што су тестови репортера гена НФ-κБ луциферазе, имуноблотирање протеина, ланчана реакција полимеразе са реверзном транскрипцијом у реалном времену и имуносорбентни тест (ЕЛИСА), откривено је да КПВ у наномоларним концентрацијама може инхибирати активацију НФ-κБ, чиме се смањује секреција токина. Овај механизам је кључан у регулацији инфламације црева, пошто је прекомерна активација НФ-κБ у ћелијама цревног епитела и имуних ћелија кључна карактеристика инфламаторне болести црева (ИБД) и других инфламаторних стања црева.
Сигнални пут МАП киназе: Сигнални пут протеин киназе активиране митогеном (МАПК) је још један важан регулаторни пут у инфламаторним одговорима, укључујући киназу регулисану екстрацелуларним сигналом (ЕРК), ц-Јун Н-терминалну киназу (ЈНК) и п38 МАПК. Ове киназе се активирају када су ћелије изложене инфламаторним стимулансима, што доводи до фосфорилације низводних транскрипционих фактора и промовише експресију гена повезаних са упалом. КПВ такође може инхибирати инфламаторни сигнални пут МАП киназе. Када су ћелије изложене инфламаторним стимулансима, КПВ може блокирати активацију МАПК, смањујући његову фосфорилацију низводних транскрипционих фактора, чиме се смањује производња проинфламаторних цитокина. У инфламаторном стању, активација п38 МАПК доводи до повећане експресије проинфламаторних цитокина као што су ТНФ-α и ИЛ-6, док КПВ може инхибирати активност п38 МАПК, смањујући лучење ових цитокина и на тај начин ублажавајући инфламаторни одговор.
2. Ефекти посредовани ћелијским транспортером
ПепТ1 транспортер: ПепТ1 је ди/трипептидни транспортер који се типично експримира у танком цреву, али се индукује у дебелом цреву током ИБД. Анти-инфламаторни ефекти КПВ делимично су посредовани ПепТ1. У експериментима узимања, хладни КПВ је коришћен као компетитивни инхибитор за хПепТ1 као радиоактивно обележен супстрат, или је [⊃3;Х]КПВ коришћен за одређивање кинетичких карактеристика узимања КПВ. КПВ улази у имуне ћелије и епителне ћелије црева преко хПепТ1. Ово указује да ПепТ1, као транспортер, олакшава улазак КПВ-а у ћелије да би показао своје антиинфламаторне ефекте. Када је функција ПепТ1 инхибирана, количина КПВ која улази у ћелије се смањује, а њени антиинфламаторни ефекти су сходно томе ослабљени. У ћелијским моделима са срушеном експресијом ПепТ1, чак и када се примењује у истој концентрацији, КПВ показује значајно смањене инхибиторне ефекте на активацију НФ-κБ и смањену секрецију проинфламаторних цитокина у поређењу са ћелијама са нормалном експресијом ПепТ1, додатно потврђујући кључну посредничку улогу ПепТ1 у механизму против инфламације КПВ.
3. Регулација инфламаторних цитокина
Инхибиција проинфламаторних цитокина: КПВ може значајно инхибирати производњу и ослобађање вишеструких проинфламаторних цитокина. ТНФ-α је кључни цитокин у инфламаторним одговорима, способан да активира имуне ћелије, индукује производњу других проинфламаторних цитокина и узрокује оштећење ткива. У различитим инфламаторним моделима, нивои експресије ТНФ-α су значајно смањени након третмана КПВ. На пример, у моделу колитиса миша изазваног натријум сулфатом, третман са КПВ је довео до значајног смањења експресије мРНК ТНФ-α у ткиву дебелог црева, што је откривено РТ-ПЦР у реалном времену, и значајног смањења садржаја протеина ТНФ-α у серуму, што је откривено ЕЛИСА-ом. ИЛ-1β, ИЛ-6 и други проинфламаторни цитокини су такође инхибирани од стране КПВ. ИЛ-1β може да изазове инфламаторну каскадну реакцију, промовишући ослобађање других инфламаторних медијатора. КПВ може смањити његову експресију и секрецију у инфламаторним ткивима, чиме се ублажава интензитет инфламаторног одговора.
Промоција антиинфламаторних цитокина: Осим што инхибира проинфламаторне цитокине, КПВ такође може промовисати експресију антиинфламаторних цитокина. Интерлеукин-10 (ИЛ-10) је важан антиинфламаторни цитокин који може инхибирати активацију имуних ћелија и смањити производњу проинфламаторних цитокина.
4. Регулација имуних ћелија
Регулација функције Т ћелија: Т ћелије играју кључну улогу у имунолошким одговорима и регулацији упале. У инфламаторним условима, Т ћелије се активирају и луче проинфламаторне цитокине. Студије су показале да КПВ може регулисати функцију Т ћелија. У експериментима са хуманом Т ћелијском линијом Јуркат, када су Јуркат ћелије стимулисане проинфламаторним цитокинима, додавање КПВ инхибира активацију Т ћелија и смањује лучење проинфламаторних цитокина као што је ИФН-γ. Ово се може постићи инхибицијом НФ-κБ и МАПК сигналних путева унутар Т ћелија. Поред тога, у неким животињским моделима, као што је ЦД45РБ(хи) модел упале дебелог црева, КПВ третман може регулисати инфилтрацију Т ћелија и функцију у цревима, смањити подгрупе Т ћелија повезане са упалом као што су Тх1 и Тх17 ћелије, и повећати удео регулаторних Т ћелија, чиме се ублажава црева.
Модулација функције макрофага: Макрофаги су важне имуне ћелије у инфламаторном одговору и могу се класификовати у класично активиране М1 макрофаге и алтернативно активиране М2 макрофаге на основу њиховог стања активације. М1 макрофаги луче велике количине проинфламаторних цитокина, док М2 макрофаги поседују антиинфламаторне функције и функције поправљања ткива. КПВ може регулисати поларизацију макрофага. Експерименти ин витро су показали да када су макрофаги стимулисани липополисахаридом (ЛПС) да се поларизирају према М1 типу, истовремена примена КПВ инхибира поларизацију макрофага према М1 типу, смањује експресију маркера макрофага М1, истовремено промовишући њихову поларизацију, повећавајући експресију М2макрофага типа маркера ( аргиназа-1 Арг-1). У ин виво инфламаторним моделима, као што је колитис изазван ДСС код мишева, третман са КПВ је резултирао поларизацијом више макрофага у ткиву дебелог црева према типу М2, чиме се ублажавају упални одговори и подстиче поправка ткива.
5. Заштитни ефекти на епителне ћелије црева
Побољшање функције епителне баријере: Физичка баријера формирана од цревних епителних ћелија служи као прва линија одбране од инвазије патогена и штетних супстанци. У инфламаторним стањима, поремећена функција цревне епителне баријере доводи до транслокације бактерија и цурења ендотоксина, што додатно погоршава инфламаторне одговоре. КПВ може побољшати функцију баријере цревних епителних ћелија. Експерименти са ћелијама ин витро, где су цревне епителне ћелијске линије третиране проинфламаторним цитокинима да би се симулирало инфламаторно окружење, резултирали су смањеном експресијом протеина чврстог споја (као што су ЗО-1 и оклудин) и поремећеном функцијом баријере. Међутим, додавање КПВ-а одржава експресију протеина чврстог споја, побољшава међућелијске везе и обнавља функцију баријере цревних епителних ћелија. Код ДСС-индукованог колитиса мишева лечених КПВ-ом, имунохистохемија и Вестерн блот анализа откриле су повећану експресију протеина тесног споја у ткиву дебелог црева и смањену цревну пермеабилност, што указује да КПВ штити цревну епителну баријеру ин виво, смањује инвазију штетних супстанци и одговора на све штетне супстанце у фламма.
Промовисање пролиферације и поправке епителних ћелија: Упала може изазвати оштећење и смрт цревних епителних ћелија, нарушавајући нормалну функцију црева. КПВ има способност да промовише пролиферацију и поправку цревних епителних ћелија. Експерименти са ћелијском културом ин витро су показали да третирање оштећених цревних епителних ћелија са КПВ појачава пролиферацију ћелија, што је откривено комплетом за бројање ћелија (ЦЦК-8). Поред тога, имунофлуоресцентна анализа је открила повећану експресију нуклеарног антигена пролиферирајућих ћелија (ПЦНА), што указује да су ћелије у активном пролиферативном стању. У моделу улцерозног колитиса код пацова изазваног ТНБС-ом, након третмана КПВ/СХ-ПГА хидрогелом, хистолошка запажања су открила да је оштећење епителних ћелија дебелог црева поправљено, а структуре крипта се постепено враћају у нормалу. Ово може бити повезано са КПВ промоцијом пролиферације и поправке епителних ћелија, што помаже у ублажавању упале и промовише опоравак цревног ткива.
Слика 2 КПВ је терапеутски код ДСС колитиса.
6. Антиоксидативни ефекти
Регулација маркера повезаних са оксидативним стресом: Запаљење је често праћено реакцијама оксидативног стреса, са повећаном производњом реактивних врста кисеоника (РОС) и реактивних врста азота (РНС), што доводи до оксидативног оштећења ћелија и ткива. КПВ испољава антиоксидативне ефекте и може регулисати маркере везане за оксидативни стрес. Код неких инфламаторних модела, као што су модел мишјег гранулома изазваног ватом и модел синовитиса дорзалне ваздушне кесе пацова изазваног беланцетом, у инфламаторним ткивима откривени су повишени нивои малондиалдехида (МДА) и смањена активност супероксид дисмутазе (СОД). Након третмана КПВ, нивои МДА су се значајно смањили, а активност СОД се повећала. МДА је производ пероксидације липида, а његови смањени нивои указују на смањено оштећење ћелија пероксидацијом липида; СОД је важан антиоксидативни ензим, а његова повећана активност означава повећану способност уклањања слободних радикала. КПВ може ублажити оксидативна оштећења у инфламаторним ткивима регулацијом нивоа оксидативног стреса, на тај начин испољавајући антиинфламаторне ефекте.
7. Други потенцијални механизми
Веза са рецептором меланокортина: КПВ је трипептид изведен из α-МСХ. Иако су његови антиинфламаторни ефекти делимично независни од МЦ1Р сигнализације, они могу бити повезани са МЦ1Р у одређеним контекстима. Код животиња које су експримирале МЦ1Ре/е, третман КПВ-ом након колитиса изазваног ДСС-ом је и даље имао значајне антиинфламаторне ефекте, спасавајући све животиње у групи третмана од смрти током ДСС-индукованог колитиса, што указује да су антиинфламаторни ефекти КПВ-а барем делимично независни од МЦ1Р сигнализације. Код животиња са нормалном експресијом МЦ1Р, КПВ може појачати антиинфламаторне ефекте интеракцијом са МЦ1Р или регулацијом његових низводних сигналних путева.
Анти-инфламаторни ефекти КПВ
1. Улога у моделима запаљења црева
Модел колитиса изазваног ДСС-ом: У моделу колитиса миша изазваног ДСС-ом, КПВ је показао значајне антиинфламаторне ефекте. Што се тиче промена тежине, мишеви третирани КПВ-ом су опоравили своју тежину раније иу већој мери у поређењу са нетретираним мишевима. Хистолошка посматрања открила су значајно смањење инфламаторне инфилтрације у ткиву дебелог црева мишева третираних КПВ, што је даље потврђено значајним смањењем активности мијелопероксидазе (МПО). МПО је ензим присутан у неутрофилима, а нивои његове активности одражавају степен инфилтрације инфилтрације инфламаторних ћелија у ткивима. Смањење активности МПО након третмана КПВ указује на смањену инфилтрацију неутрофила у ткиву дебелог црева и ублажавање инфламаторних одговора. Откривањем експресије мРНА проинфламаторних цитокина у ткиву дебелог црева, као што су ТНФ-α и ИЛ-1β, откривено је да третман КПВ значајно смањује нивое експресије ових проинфламаторних цитокина. КПВ је ублажио симптоме колитиса изазване ДСС-ом са више аспеката, укључујући смањење инфилтрације инфламаторних ћелија, смањење експресије фактора запаљења и промовисање опоравка телесне тежине.
ЦД45РБ(хи) модел запаљења дебелог црева: У моделу запаљења дебелог црева ЦД45РБ(хи), КПВ је такође показао добре антиинфламаторне ефекте. Овај модел је индукован преношењем Т ћелија које високо експримирају ЦД45РБ у имунодефицијентне мишеве. Након третмана КПВ, мишеви су показали побољшане симптоме упале, постепени опоравак тежине, а хистолошки преглед је открио смањене инфламаторне промене у цревима. Група која је третирана КПВ показала је смањену инфилтрацију инфламаторних ћелија и смањено оштећење структуре крипте у цревним ткивима, што указује да КПВ ефикасно ублажава упалу црева изазвану ЦД45РБ(хи) и обнавља нормалну структуру и функцију цревног ткива.
Модел улцерозног колитиса изазваног ТНБС: У моделу улцерозног колитиса изазваног ТНБС пацова, КПВ је такође показао значајне терапеутске ефекте. Након давања КПВ/СХ-ПГА хидрогела ректално пацовима, симптоми колитиса су се значајно побољшали. Степен губитка тежине код пацова је смањен, а скор индекса активности болести (ДАИ) смањен. ДАИ скор свеобухватно разматра индикаторе као што су промене телесне тежине пацова, фекалне карактеристике и хематохезија. Његово смањење указује да КПВ/СХ-ПГА хидрогел може ефикасно ублажити тежину улцерозног колитиса изазваног ТНБС-ом. Третман КПВ/СХ-ПГА хидрогелом такође спречава скраћивање дебелог црева код пацова, смањење нивоа мијелопероксидазе у дебелом цреву и обновљену морфолошка структура дебелог црева, укључујући епителну баријеру, крипте и нетакнуте пехарасте ћелије. Експресија проинфламаторних цитокина, ТНФ-α и ИЛ-6, у ткиву дебелог црева је такође значајно смањена, што даље показује антиинфламаторни ефекат КПВ у моделу улцерозног колитиса изазваног ТНБС.
Закључак
КПВ, као трипептид са антиинфламаторним својствима, показује обећавајуће ефекте у превенцији и лечењу упале црева и разних других болести повезаних са инфламацијом. Његови антиинфламаторни механизми укључују више аспеката, укључујући регулацију ћелијских сигналних путева, антиоксидативни стрес и модулацију апоптозе и аутофагије.
Извори
[1] Схао В, Цхен Р, Лин Г, ет ал. Ин ситу мукоадхезивни хидрогел који хвата трипептид КПВ: антиинфламаторни, антибактеријски и поправљајући ефекат на орални мукозитис изазван хемотерапијом[Ј]. Биоматериалс Сциенце, 2021,10(1):227-242.ДОИ:10.1039/д1бм01466х.
[2] Сун Ј, Ксуе П, Лиу Ј, ет ал. Самоповезани хидрогел трипептида КПВ стабилизованог са γ-полиглутаминском киселином усађеног цистеамином за ублажавање улцерозног колитиса изазваног ТНБС-ом код пацова [Ј]. Ацс Биоматериалс Сциенце & Енгинееринг, 2021,7(10):4859-4869.ДОИ:10.1021/ацсбиоматериалс.1ц00792.
[3] Ксиао Б, Ксу З, Виенноис Е, ет ал. Орално циљана испорука трипептида КПВ преко наночестица функционализованих хијалуронском киселином ефикасно ублажава улцерозни колитис[Ј]. Молекуларна терапија, 2017, 25(7):1628-1640.ДОИ:10.1016/ј.имтхе.2016.11.020.
[4] Далмассо Г, Цхарриер-Хисамудин Л, Нгуиен Х, ет ал. П-078: ПепТ1 посредовано унос трипептида КПВ смањује интестиналну инфламацију[Ј]. Инфламаторне болести црева, 2008,14(суппл_1):С32.ДОИ:10.1097/00054725-200801001-00111.
[5] Канненгиессер К, Маасер Ц, Хеидеманн Ј, ет ал. Трипептид КПВ добијен из меланокортина има антиинфламаторни потенцијал у мишјим моделима инфламаторне болести црева [Ј]. Инфламаторне болести црева, 2008,14(3):324-331.ДОИ:10.1002/ибд.20334.
Производ доступан само за истраживачку употребу:
